微量加样器的质量控制

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【摘要】微量加样器是酶免疫测定中加样必用的设备，其使用和校准对酶免疫测定结果有直接的影响。也是检验人员必须掌握的一项基本技能。但在实际工作中，很少引起重视，微量加样器的使用很不规范，校准则基本没有，或不知道如何正确地使用、校准和维护。本文对微量加样器如何正确地使用、校准等做系统的介绍。

【关键词】微量加样器 使用 校准 维护

中图分类号：R197.39 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2011）4-302-01

1 微量加样器的使用

1.1 设定容量值

P型加样器容量计读数由三位数字组成（显示所转移液体容量），读数精确到个位数。单道可调移液器容量计读数则由四位数字组成，读数精确到小数后一位，从上（最大有效数字）到下（最小有效数字）读取。利用底部刻度可将容量调节到更精确的分度。 P型根据型号不同，数字可能是黑色或红色的。单道可调加样器的数字不同型号均为白色。

转动加样器的黑色调节环或按钮的白色调节旋钮均可设定容量。用白色调节旋钮设定容量比较方便和快速，尤其是穿戴手套时。使用黑色调节环可较准确调节到设定值。

1.2 吸液

首先选择一支合适的吸头安放在加样器套筒上。使用P5000及P10ML时，装吸头前必在套筒上加插一过滤芯。稍加扭转压紧吸头使之与套筒间无空气间隙。未装吸头的加样器绝不可用来吸取任何液体。

标准吸液步骤如下：

1.2.1 把按钮压至第一停点；

1.2.2 垂直握住加样器，使吸头浸入液体深度视型号而定（见下表）

不同型号器允许浸入深度

1.2.3 缓慢、平稳地松开按钮，吸液样。等1秒钟，然后将吸头提离液面。用吸水纸拭去吸嘴外面可能附着的液滴。小心勿触及吸头口。

1.3 放液

1.3.1 将吸头口贴到容器内壁并保持10～40°倾斜。

1.3.2 平稳地把按钮压到第一停点。等1s后再把按钮压至第二停点以排出剩余液体。

1.3.3 压住按钮，同时提起加样器，使吸头贴容器壁擦过。

1.3.4 松开按钮。

1.3.5 按吸头弹射器除去吸头（只有改用不同液体时才需更换吸头）。

1.4 预洗

当装上一个新吸头（或改变吸取的容量值）时应预洗吸头，先吸人1次液样并将之排回原容器中。

预洗新吸头能有效提高移液的精确度和重现性。这是因为第一次吸取的液体会在吸头内壁形成液膜，导致计量误差。而同一吸头在连续操作时液膜相对保持不变，故第2次吸液时误差即可消除。

1.5 致密及黏稠液体

对于密度低于水的液体，可将容量计的读数调到低于所需值来进行补偿。

排放致密或黏稠液体时，宜在第一停点多等1～2秒压到第二停点。对密度高、黏稠大或挥发性的液体，推荐使用活塞正移动加样器。

1.6 加样器吸头

加样器吸头是整个移液系统的有机组成部分，对其基本要求是，必须有高机械、热力学和化学稳定性，且纯度高，生产过程纯净，无有机或化学物质（如染料）和重金属污染。选择密封良好的环口、薄壁和嘴口尖细的吸头，将使得在加样时，吸头的安装或卸脱更加容易。吸头管壁有弹性，加样吸液时不会产生漩涡，这样加样的精度就更高。吸头嘴口无毛刺，表面光洁平滑，使得其沾湿性极小，可避免液体滞留外壁引起的误差。吸头应与加样器上吸头套筒密封完好，可防止由于空气泄漏而造成加样精度或准确度的误差。此外，吸头还应有液体容积刻度线。D200吸头在20/1l和100~1处有标记；D1000吸头在300~1处有标记，D10吸头在2/A1处有标记。最后，吸头应能在121℃下消毒20min。

如果在使用加样器加样中，想绝对避免样品与样品、样品与加样器或样品与操作人员之间的污染，建议使用Diamond带滤芯吸头。Diamond带滤芯吸头可以经高温消毒，其内置滤芯不会损坏。

2 微量加样器的校准

2.1 加样器的适用范围：各种品牌、型号、可调和多道加样器。

2.2 校准的基本操作条件：

2.2.1 操作室：独立房间，显示温度和湿度的状态；温度控制：15-30℃（±0.5℃）； 湿度控制：60%-90% ；工作台面：防震、防尘、远离热源、无阳光直。

2.2.2 天平：0.000 01精密分析天平（小数点后5位），每年需进行校准。

2.2.3 测试介质：双蒸馏水，每4小时更换一次，批次更换周期不大于2周。

2.3 选定校准体积：1.拟校准体积；2.加样器标定体积的中间体积；3.最小可调体积（不小于拟校准体积的10%）。

2.4 校准步骤：

2.4.1 将加样器调至拟校准体积，选择合适的吸头；

2.4.2 调节好天平；

2.4.3 吸吹蒸馏水3次，使吸头湿润，用吸水纸拭干洗头；

2.4.4 垂直握住加样器，将吸头进入液面2-3mm处，缓慢（1-3秒）地吸取蒸馏水；

2.4.5 将吸头离开液面，靠于管壁，去掉吸头外部的液体；

2.4.6 将加样器以30°角放入称量烧杯中，缓慢地将加样器压至第一档，等1-3秒再压至第二档，使吸头内液体完全排出；

2.4.7 记录称量值；

2.4.8 按上述步骤称量10次；

2.4.9 取10次测定值的均值作为最后加样器吸取蒸馏水重量，按蒸馏水在不同温度、气压下的重量、体积的换算因子计算体积。然后按校准结果调节加样器。

3 加样器的维护保养程序

加样器应根据使用频率进行维护，但至少应每3各月进行一次，具体方法如下：

3.1 一般可用中性洗涤剂或60%的异丙醇清洁，然后用蒸馏水反复洗涤，去除洗涤剂或异丙醇，晾干。清洁后活塞处可使用一定量的剂。

3.2 如液体进入加样器内严重污染，可将加样器拆开后清洁。具体步骤参照加样器说明书。

3.3 可调式移液器在不使用时应竖立放于支架上，应远离潮湿、腐蚀性物品。

3.4 移液器操作过程中为防止液体进入套筒内，应必须注意压放按钮时保持平稳；加样器不得倒转；吸头内有液体不得将加样器平放。

3.5 有些加样器的吸管可部分高压消毒，但需注意消毒时不可超温超时，也不可挤压放置，以免造成变形。

3.6 每天开始工作之前应检查移液器的外表是否清洁，如有灰尘或污物，应小心擦拭后开始工作。

注：本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文