血清低水平HBV表面抗原测定临床意义探讨

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摘要　目的：探讨低水平血清乙肝病毒表面抗原（HBsAg）的。方法：采用微粒子酶免疫分析技术对非肝炎病患者886例进行乙肝两对半检测，包括HBsAg、HBs-Ab、HBeAg、HBe-Ab、HBc-Ab。结果：HBsAg阳性患者166例浓度在5μg/L以下，占检测总人群的18.70%。结合两对半检查结果发现低水平HBsAg人群主要体现血清学特征为“HBsAg（+）、HBcAb（+）、HBeAb（+）”和“HBeAg（-）、HBsAb（-）”模式为主（81.81%）。结论：提高HBsAg检测灵敏度对于低水平的人群具有重要临床意义，同时分析血清学模式具有一定的意义。

关键词　抗原　乙肝病毒　免疫

我国是乙肝高发国家，主要以病毒感染为主，这给我国的健康安全带来了不小的挑战，随着科技的不断发展和技术革命的不断更新，如何更加快捷、简便、准确地分析出低水平抗原表达的乙肝患者，对其早期诊断治疗具有积极的意义。目前对乙肝的诊断仍然以表面抗原HBsAg为主，故此为进一步分析和有效检测，采用微粒子酶免疫技术对886例非肝炎患者进行两对半检测，观察HBsAg　5μg/L以下的患者比例并分析其表达模式，现研究报告如下。

资料与方法

2009～2011年入院体检的非肝炎病患者血清样本886例。采用微粒子酶免疫技术进行乙肝两对半（HBsAg、HBs-Ab、HBeAg、HBe-Ab、HBc-Ab）检测。

设备材料：免疫荧光分析仪。采用HBsAg试剂盒，根据国家临检中心制定的标准调整HBsAg检测灵敏度：HBsAg检测灵敏度0.23μg/L；1μg/L、2μg/L和5μg/LHBsAg定值参比血清。

方法：①抗原与微粒子单抗结合；②测抗原再与生物素标记二抗结合组成复合物，被微粒子包被；③比色皿底部玻璃纤维捕获上述复合物，达到富集的目的；④微粒子复合物与有HRP标记的生物素抗体结合；⑤荧光底物MUP与HRP发生作用分解Mu，后者能激发荧光，根据速率法检测荧光强度，计算含量。

判断标准：①HBeAg阳性：S/N≥2100；②HBsAg阳性：S/N≥20；③HBc与HBe阳性：S/CO≤1000；对低水平HBsAg（5μg/L）者进行中和试验，中和率≥50%确定低水平者为HBsAg阳性。

结　果

886例患者中检测出166例患者血清＜HBsAg浓度5μg/L，占总人数的187%，其中低于1μg/L　24例，占低水平人数的145%；1～2μg/L　40例，占低水平人数的241%；2～5μg/L　102例，占低水平人数614%。

通过两对半检测对其阳性模式进行分析发现低水平HBsAg人群主要体现血清学特征为“HBsAg（+）、HBcAb（+）、HBeAb（+）”和“HBeAg（-）、HBsAb（-）”模式136人，占所有低水平患者的8193%，“HBsAg（+）、HBc-Ab（+）”124例，占低水平人数的7470%，“HBsAg（+）、HBsAb（+）”24例（145%）。

讨　论

随着生活水平的不断提高，人们的健康意识和自我保健意识不断增强，对于乙肝的重视程度不断加深［１，2］。目前已经有研究指出部分，hbv感染人群其血清HBsAg仍保持很低的水平，采用常规普通的检测方法和诊断指标，容易导致漏诊，因此更加快捷、高效、高灵敏的检测出低水平HBV感染具有明显的临床意义。本研究中采用微粒子免疫荧光分析技术886例非肝病患者进行HBsAg、HBs-Ab、HBeAg、HBe-Ab、HBc-Ab，分析其低水平表达情况以及低水平患者的常见抗体、抗原表达模式。以充分认识肝炎诊断、进一步减少临床假阳性和假阴性的误诊率。

在本次实验中一共检测出5μg/L以下HBsAg阳性患者166名，占总人群的187%，占了较高的比率，说明提高灵敏度检测的必要性。同时对其模式进行分析，发现低水平的HBsAg阳性患者模式主要以“HBsAg（+）、HBcAb（+）、HBeAb（+）”和“HBeAg（-）、HBsAb（-）”为主占总人数的8193%，为临床治疗和评估患者预后等提供了指标参考。在对5μg/L以下HBsAg阳性患者我们进一步分析，发现还存在＜1μg/L者，其比例145%，但其中主要还是以2～5μg/L患者为主（614%），进一步强调了需要提高灵敏度的必要性，以及微粒子法的良好评估作用。同时对＜1μg/L者进行分析，发现“HBsAg（+）、HBs-Ab（+）”者于其重合，与相关文献报道一致［3］。二者同时存在的内在机制可能是HBV发生变异，有待进一步探讨。总之，低水平HBsAg人群是一个值得注意的问题，因此在临床工作中需要进一步重视对低水平HBsAg的认识。

参考文献

1　杨守纯，陶其敏.我国病毒性肝炎免疫学检测史的回顾与展望.中华医学检验杂志，1999，22：275-277.

2　Coursaget　P，Yvonnet　B，Bourdil　C，et　al.HBsAg　positive　reactivity　in　man　not　due　to　hepatitis　B　virus.Lancet，1987，12：1354-1358.

3　成军，杨守纯，主编.现代肝炎病毒分子生物学.北京：人民军医出版社，1997：278-280.