病毒灭活血浆与新鲜冰冻血浆在血浆置换治疗中的效果分析

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[摘要] 目的 探讨血浆置换中应用病毒灭活血浆与新鲜冰冻血浆的效果差异。 方法 2012年1～6月洛阳市26例进行血浆置换患者分别采用新鲜冰冻血浆及病毒灭活血浆治疗，并对两组治疗前后的血凝、蛋白等指标进行比较。 结果 应用病毒灭活血浆组治疗后患者PT、APTT与治疗前比较差异有统计学意义（P < 0.05），两组治疗前后清蛋白检测差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 大量应用血浆制品时，病毒灭活血浆安全性仍较高，但若患者有出血倾向则易选用新鲜冰冻血浆（FFP）做置换液，临床效果更佳。

[关键词] 病毒灭活血浆；新鲜冰冻血浆；血浆置换；效果

[中图分类号] R457.1+4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）05（b）-0062-02

亚甲蓝光化学（MB）法灭活血浆中的病毒是一种最安全、有效的适合于临床用单袋血浆病毒灭活的方法，其灭活效果已被大量实验证实[1-2]，输注病毒灭活血浆成为当前国内外预防输注血浆制品传播传染病的有效措施，MB法病毒灭活血浆技术，已被推广应用于全国部分血站。对于MB法病毒灭活血浆后，对于血浆内有效成分的影响国内各家血站报道不一，但是都一致显示MB法病毒灭活后的血浆有效成分有所改变[3-4]。但是这些或多或少的改变是否影响临床应用效果，尤其是在血浆置换中大量应用血浆时是否有影响，国内目前尚无报道。笔者对此情况进行了研究，具体如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

2012年1～6月随机采用库存新鲜冰冻血浆。无偿献血者的血液（400 mL/袋），于采集后6 h内分离制备的新鲜血浆（5000 g/min，10 min，4℃），按照操作规程制备成新鲜冰冻血浆（200 mL/袋）。在净化间将血浆与一次性病毒灭活输血过滤器相连。向血浆中加入亚甲蓝，混匀后使亚甲蓝的浓度为1 μg/mL，并在31800LX强度的光照下4℃摇动照射30 min，然后把经光照后的血浆通过一次性血浆灭活血袋的滤器滤除亚甲蓝，制备成病毒灭活血浆。

同期选择在洛阳市所进行的血浆置换患者26例，其中重症肝病患者19例，有机磷农药中毒7例，患者年龄在15～50岁，中位年龄31岁，其中，男性17例，女性9例，以上病例在血浆置换中12例置换液采用新鲜冰冻血浆，采用病毒灭活血浆14例。

1.2 方法

光照病毒灭活：（1）采用中保康医疗器具有限公司生产的ZBK-YBM-01型医用血桨病毒灭活柜，操作按说明书；（2）采用上海输血技术有限公司生产的HDME-1医用血浆病毒灭活柜，操作按说明书。

血浆置换法：采用美国血液技术公司生产的MCS+型血细胞分离机，选择血浆置换程序及TPE规程卡、980E耗材，置换液采用新鲜冰冻血浆或病毒灭活血浆。

主要仪器：SORVAL 3BP离心机（美国Thermo 公司），ZBK-YBM-01型医用血浆病毒灭活柜及耗材（淄博中保康医疗器具有限公司），MCS+型血细胞分离机及耗材（美国血液技术公司生产），奥林巴斯全自动生化分析仪。

1.3 观察指标

血浆凝血因子活性侧定：应用国际通用的一期法检测血浆。血浆清蛋白测定： 用双缩脉法检测血浆总蛋白。

1.4 统计分析

应用SPSS 12.0分析软件，分析应用新鲜冰冻血浆和病毒灭活血浆血浆置换两组间的凝血时间、血浆蛋白比较采用t检验。

2 结果

2.1 不同血浆置换前后患者凝血因子比较

应用新鲜冰冻血浆、病毒灭活血浆进行血浆置换治疗后，凝血因子结果见表1。结果显示应用病毒灭活血浆组治疗后患者PT、APTT与治疗前比较差异有统计学意义（P < 0.05）。

2.2 不同血浆置换前后患者血浆蛋白比较

应用新鲜冰冻血浆、病毒灭活血浆血浆置换治疗后，血浆蛋白结果表2。结果显示两组治疗前后清蛋白检测差异无统计学意（P > 0.05）。

3 讨论

血浆是可发生经输血传播疾病的主要血液成分之一，近几年的用量持续增加，因此在保证血浆临床输用安全的同时，提高血浆质量和应用效果是非常重要的。病毒灭活作为一种降低输血风险的新技术，除应能有效地灭活血液成分中可能存在的病毒外，更重要的是对血液成分的功能应无显著性影响，保证血液成分的足够疗效。MB光化学法是近年发展起来的新技术[5-6]。光化学法灭活病毒的机制主要是依靠光敏剂在光照射下，产生自由基（一类机制）或单线态氧（二类机制）氧化损伤病毒的分子结构，从而杀灭病毒，由于目前全国各地血站供临床使用的血浆均为单人份血浆，其可能内含的脂质包膜病毒，对人体健康有危害，为了克服此危害，必须对脂质包膜病毒灭活。大量实验数据证明，用亚甲蓝光化学处理血浆可完全灭活血浆内所含的VSV和Sindbis病毒（这2种病毒是国内外公认的血液制品病毒灭活有效性的指示病毒，其中VSV是HIV的模型病毒，Sindbis是HCV的模型病毒，均为RNA脂质包膜病毒），病毒滴度明显下降。同时保证血浆主要凝血因子（Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ）的回收率>80%，白、球蛋白的回收率>90%。血浆蛋白的免疫原性无变化，总蛋白损失轻微[7]。

血浆置换因患者病情需几乎置换出患者体内原有血浆，本研究旨在研究大量应用病毒灭活冰冻血浆后患者体内的凝血状态以及血清蛋白的变化。研究结果表明，大量的新鲜冰冻血浆应用后患者体内的凝血状态以及血清蛋白均无明显变化，但是病毒灭活冰冻血浆应用后，患者体内凝PT、APTT均有所延长，但是延长均在正常范围内，说明病毒灭活冰冻血浆应用量较大时可以影响患者体内凝血。凝血因子绝大多数在肝脏合成，肝实质损伤可导致凝血因子的合成减少，表现为凝血酶原（PT）延长，患者有出血倾向。因此肝病患者在血浆置换过程中，推荐使用新鲜冰冻血浆（FFP）做置换液，临床效果更佳。笔者在多例临床血浆置换术应用当中，根据不同患者、不同病情使用不同血浆（新鲜冰冻血浆、病毒灭活血浆），均获得良好疗效。

有研究表明虽然过滤前后FⅧ和FⅨ因子活性几乎无改变，但是对因子影响最大的是灭活过程[8]。经过MB光化学法对血浆进行病毒灭活处理后，血浆中的FⅨ因子灭活前后变化不大，FⅧ因子水平下降，但活性水平仍大于75%，仍在国家质量标准允许范围内，虽然对因子有一定的损伤作用，但结合其灭活性能，MB光化学病毒灭活工艺对单人份血浆的病毒灭活还是一种比较有效的方法，其对临床输血安全性具有重要意义。临床在应用病毒灭活血浆时，可以适当增加用量，保证治疗效果，如将原来10～15 mL/kg的应用剂量增加25%用量，提高至13～19 mL/kg[2]。

要从根本上控制和杜绝血源性的传染病，除加强筛查以外，还必须对血液进行灭活病毒处理，才能达到输血安全的目的。血液成分的病毒灭活是实现安全输血的唯一途径。尤其在进行血浆置换术中，大量应用血浆制品时，病毒灭活血浆安全性仍较高。

[参考文献]

[1] 王文逸. 利用鸭乙型肝炎病毒感染模型评价血液成分中病毒的灭活效果[J]. 微生物与感染，2006，1（2）：21-24.

[2] 李燕. 维生素C对病毒灭活中血浆蛋白活性的保护效应[J]. 中国实验血液学杂志，2006，14（2）：394-396.

[3] 王飞. 亚甲蓝光化学法血浆病毒灭活前后血浆成分的变化[J]. 临床学与检验，2010，4（12）：97-99.

[4] 陈志，陈江，逯心敏，等. 重型肝炎患者血浆置换治疗前后凝血功能变化的研究[J]. 国际检验医学杂志，2011，9（22）：88-89.

[5] 袁翠云，张长青，任继秀. 血浆置换加血液滤过治疗慢性重型肝炎疗效观察[J]. 医药论坛杂志，2011，9（9）：165-168.

[6] 周福元，杨淑玲，陈金军，等. 血浆置换治疗肝功能衰竭临床研究[J].临床合理用药杂志，2011，14（11）：289-291.

[7] 潘志敏，刘光俊，王兴，等. 胸腺肽α1配合血浆置换治疗慢性乙型重型肝炎的效果观察[J]. 实用肝脏病杂志，2011，4（10）：18-20.

[8] 蔡尚原，张长青，付敏，等. 大剂量HBsAb阳性血浆置换治疗肝衰竭临床研究[J]. 医药论坛杂志，2011，14（8）：58-60.

（收稿日期：2013-01-22 本文编辑：林利利）