射干麻黄糖浆对豚鼠支气管哮喘的实验研究

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陈若冰　邱兰萍　张学仕

摘　要：目的：从内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6－酮－前列腺素F1α(6－keto－PGF1α)的角度说明射干麻黄糖浆治疗豚鼠支气管哮喘的机理。方法：选用荷兰白种豚鼠，随机分成4组，采用Barnes及吕宝璋方法进行哮喘遣模，观察各组豚鼠血浆中ET,TXB2、6－keto－PGF1α含量的变化。结果：氨茶碱组和射干麻黄糖浆组动物血浆中ET、TXB2的含量低于模型组，6－keto－PGF1α的含量高于模型组。结论：射干麻黄糖浆是治疗哮喘的有效方剂，其作用机理之一是提高血浆中ET,TXB2的含量和降低血浆中6－keto－PGF1α的含量。

关键词：哮喘；射干麻黄糖浆；内皮素(ET)；血栓素B2(TXB2)；6－酮－前列腺素F1α(6－keto－PGF1α)

中图分类号：R285.5　文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2007)07－1480－03

在我国，支气管哮喘的患病率为1％－4％，并呈逐年增加的趋势，其已成为严重威胁公众健康的一种主要慢性疾病。

射干麻黄糖浆是以射干麻黄汤加上地龙、甘草等药炮制而成，以《金匮要略》原文“咳而上气，喉中水鸡声，射干麻黄汤主之”为理论基础，用以指导治疗发作期哮喘。本实验旨在通过对哮喘豚鼠血浆中ET、TXB2、6－keto－PGF1α含量的研究，探讨射干麻黄糖浆治疗哮喘的作用机理。

1　材料与方法

1．1 实验材料

1．1．1　动物荷兰白种豚鼠加只，雄性，体重(350±50)g，由辽宁中医药大学实验动物中心提供。实验动物合格证书编号：辽实动质字[2000]019号。

1．1．2　疗物中药：射干麻黄糖浆，药用：射干15g，麻黄8g，救冬花15g，细辛3g，紫菀15g，地龙15g，五味子15g，半夏15g，生姜15g，甘草15g，大枣6枚等12味。共4剂，常规煎煮成550mL的汤药(即4mL汤药中含有4g生药)，再放入60％的糖和微量防腐剂制成射干麻黄糖浆。

西药：氨茶碱片，赤峰制药(集团)蒙欣药业有限公司，内卫药准字(1996)第000206，制成氨茶碱溶液，其含量为4mL溶液含0.015g氨茶碱。

1．1．3　试剂 蛋白片，上海化学试剂分装厂，GB2756－81，批号92－11－28，购于沈阳医药股份有限公司。分别在使用前配成10％和1％的蛋白溶液。

1．1．4　试剂盒内皮素(ET)、血栓素B2(TXB2)、6－酮－前列腺素F1α(6－keto－PGF1α)放免试剂盒，100规格，购于北京北方生物技术研究所。

1．1．5　仪器设备雾化器DS－671，5mL针管100个，低温高速离心机MR1822 1400r/min souan法国

1．2实验方法

1．2．1 实验动物分组和饲养条件将实验动物随机分为4组：空白对照组、模型组、氨茶碱组、射干麻黄糖浆组。每组10只，分笼饲养，室内安静，自然光照，通风良好，室温20－26℃，湿度45％－65％，饲料为全价颗粒大鼠饲料和每日于市场购买的新鲜胡萝卜、大头菜，垫料为干草，每2－3天换1次垫料并进行室内消毒。

1．2．2　造模方法及给药，豚鼠适应性饲养3天，熟悉环境后，进行造模，除空白对照组外，其余3组均腹部注射新鲜配置的10％蛋白溶液1mL，空白对照组腹部注射1mL生理盐水，14天后，除空白对照组通过雾化器用生理盐水进行喷雾激发无反应外，其余3组均通过雾化器用新鲜配置的1％蛋白溶液进行喷雾激发，直到出现烦躁、咳嗽、腹肌抽动、鼻翼煽动等症状，每日1次，于激发前灌胃，空白对照组和模型组给予4mL生理盐水，射干麻黄糖浆组给予4mL射干麻黄糖浆(含4g生药)，氨茶碱组给予4mL氨茶碱溶液(含0.015g氨茶碱)，并记录各组喷雾激发到出现症状的时间。

1．3　取材和指标检测

配制新鲜的20％氨基甲酸乙酯溶液(即乌拉坦)，腹腔注射进行麻醉，剖开胸腔，用一次性5mL注射器心脏穿刺取静脉血2mL注入内含10％EDTA二钠3μL和抑肽酶40μL的洁净试管中，混匀，4℃，3000r/min离心10min，分离血浆，于－70℃下保存，待测ET。取一次性5mL空针吸取消炎痛－EDTA・Na2液约0.1mL，快速静脉穿刺取血5mL。即刻在空针颠倒混匀，注入试管内，4℃，3500r/min离心15min，分离血浆，放-70℃下保存，待测TXB2和6－keto－PGF1α。检测方法为免疫平衡法。

1．4统计方法

采用SPSS.11软件进行方差分析。

2　结　果

哮喘激发后豚鼠皮毛没有激发前光滑、柔顺，食量减少；在4组中，模型组从激发开始到出现症状的时间比氨茶碱组和射干麻黄糖浆组短，模型组哮喘的程度比氨茶碱组和射干麻黄糖浆组重；从豚鼠精神状态看，氨茶碱组和射干麻黄糖浆组的豚鼠的精神状态好于模型组，其食量也比模型组大。见表1－3。

3　讨　论

3．1 射干麻黄糖浆的药理作用

中医认为哮喘是宿痰内伏于肺，遇诱因而引发，使痰阻气道，肺失肃降，气道挛急。射干麻黄糖浆中用射干降逆行气，开肺化痰；麻黄、细辛发散风寒于外，温肺化饮于内，止咳平喘；紫菀、款冬花下肺气之逆，降气化痰，半夏燥湿化痰，生姜和胃化痰，五味子收敛肺气，恐劫散之药，伤其正气，以大枣和胃健脾。再加上地龙、甘草等增强平喘止咳，祛痰作用。诸药共奏温肺逐饮、化痰降逆、下气平喘之功。

现代医学认为哮喘是多种炎症细胞参与的气道慢性炎症，这种炎症使气道对各种激发因子产生气道高反应性，同时引起气道缩窄。现代药理研究发现：麻黄对支气管平滑肌有松弛作用，麻黄中Ephedroxane有利于呼吸道炎症的消退，麻黄水提物、醇提物能抑制过敏介质释放。射干具有抗炎、祛痰作用。细辛具有抗炎、抗变态及免疫抑制作用。地龙具有平喘作用，对支气管具有显著的舒张作用。款冬花、半夏、紫菀、五味子有镇咳、祛痰作用，五味子同时对免疫功能有双向调节作用。甘草具有具有增强免疫功能、抗过敏作用和平喘作用。生姜具有抗炎、镇痛、松弛平滑肌作用。大枣具有抗变态反应作用。此外，还有一些临床报道，认为射干麻黄汤可提高哮喘患者的肺功能，能降低血浆内皮素、

血浆黏度水平。所以，从现代药理的角度看。射干麻黄糖浆可以治疗哮喘。

3．2血栓素B2(TXB2)6－酮－前列腺素F1α(6－keto－PGF1α)内皮素(ET)作用

TXB2和6－keto－PGF1α是肺内含有的TXA2、PGI2的代谢产物，其活性稳定，TXA2对肺的血管和支气管有强烈的收缩的作用，6－keto－PGF1α的生理作用与血栓素A2(TXA2)完全相反，有舒张肺血管的作用，并能抑制组胺及乙酰胆碱引起的支气管平滑肌的收缩，缺氧时PGI2的作用更明显。

ET在肺内的广泛分布于肺血管，呼吸道上皮，黏膜腺体和拟交感神经节，在肺内，小支气管的含量最高。ET是已知最强的气管和支气管平滑肌收缩剂，一些实验证明，应用ET灌流肺，可以促进TXA2释放，ET对肺血管的收缩具有快慢两个时相，第I相可能是ET直接作用的结果，第n相可能是继发TXA2释放引起的。研究证明，ET可以诱导PGF2，促进糖蛋白的分泌，又可通过上皮细胞，产生PGI2，抑制黏膜腺体的分泌，前者是直接作用，后者是继发效应。ET除以上作用，还可促进呼吸纤毛的摆动，增加摆动频率，加强纤毛一黏液排送功能；它还能刺激肺泡巨噬细胞释放花生四烯酸和TXB2，此外它对肺血管平滑肌和成纤维细胞亦有促进增殖的作用。

可见，炎症刺激可促进ET、TXB2、6－keto－PGF1α的释放，同时，此三者又可再刺激炎症的产生，而三者本身也具有一定的相互作用，存在相互关联。ET、TXB2都可使平滑肌收缩，6－keto－PGF1α可舒张平滑肌，因此三者在血浆中的值可以反应射干麻黄糖浆治疗哮喘的疗效。

4　结　论

本实验结果显示，射干麻黄糖浆组和氨茶碱组血浆中ET的含量与模型组相比较(P＜0.05)。说明射干麻黄糖浆可以降低哮喘发作的豚鼠血中的ET的水平。射干麻黄糖浆组和氨茶碱组血浆中TXB2、6－keto－PGF1α的含量与模型组相比(P＜0.05)，说明射干麻黄糖浆可以降低血浆中TXB2的水平，升高血浆中6－keto－PGF1α的水平，因此，从ET,TXB2、6－keto－PGF1α的角度看，射干麻黄糖浆具有一定治疗哮喘的作用。