石榴皮抗鸡球虫的效果研究
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【摘 要】试验选择50只14日龄肉用公雏,随机分为石榴皮组(添加量为1.0%)、甘草组 (添加量为1.0%)、直杀球虫散组(添加量为1.0%)、感染不给药组和不感染不给药对照组。于无球虫条件下饲养,从17日龄起饲喂混有药物的饲料,除不感染不给药对照组外,其他各组均在22日龄接种3×105个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,根据各组的存活率、相对增重率、病变记分、血便记分和抗球虫指数观察药物的疗效,结果表明石榴皮和甘草有中等抗球虫效果。
【关键词】鸡；抗球虫；石榴皮；甘草
鸡球虫病是由艾美耳属球虫(Eimeria)寄生于肠上皮细胞引起的疾病。暴发该病的雏鸡群病死率达40%～80%,甚至更高;而由于球虫病造成的鸡发育滞缓、减重、产蛋减少、药物及饲料浪费带来的经济损失,往往比鸡死亡的后果更严重[1]。由于抗球虫药的使用不当以及误用等情况,加上长期的自然选择的作用,耐药虫株日益增多,使得许多抗球虫药的防治效果显著降低,甚至完全失效，仍然暴发鸡球虫病,给养鸡业带来无法弥补的经济损失。因球虫产生耐药性,使抗球虫药的使用年限大大缩短。为解决这一问题,许多兽医工作者认真分析和总结前人的经验并开始进行中药防治球虫试验,从而研究和开发有抗球虫效果的中草药添加剂。为了观察石榴皮中药抗球虫的效果,特进行了本试验。
1.材料与方法
1.1实验用药
石榴皮:购于阿克苏，新榨石榴皮，经70℃烘干粉碎后待用。主要成分：石榴皮中含有鞣质、黄酮类、甙类、生物碱 、苹果酸等十几种药用功效成份。
甘草:由甘草研究所提供，粉碎后待用。
直杀球虫散:江西兽药厂生产。
1.2试验鸡
为14日龄三黄鸡全公鸡，购于阿克苏。
1.3试验用球虫卵囊
采自当地感染球虫的肉鸡舍中的粪便。处理方法：鸡粪中加两倍的水充分搅匀过滤，取滤液3000-5000rpm离心5min,去上清液。取沉淀加两倍量33%的硫酸锌充分搅匀， 1000-1500rpm离心5min，取上清液，2倍量稀释，低速离心，取沉淀。即获得试验感染用的新鲜卵囊, 加2%的重铬酸钾27℃保存,经三天孢子化后备用。
1.4试验设计和方法
从60只14日龄的小鸡中选出50只随机分成五组,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组饲料中分别添加1.0%石榴皮和1.0%甘草、1.0%直杀球虫散、Ⅳ、Ⅴ组作为感染不给药组和不感染不给药组。在22日龄时接种3×105个孢子化卵囊,接种后每天仔细观察鸡的病理变化,并做试验记录。观察第5、6、7d的血便情况,并收集5、6、7三天的粪便,计数O.P.G。第8d宰杀所有鸡只,进行病变记分。试验结束后整理数据,计算出存活率、增重率、饲料利用率、ACI等,从而判断出石榴皮抗球虫效果。
1.5抗球虫效果判断标准
1.5.1临诊表现
试验期间观察和记录试验鸡的精神、食欲及粪便排出情况。
1.5.2相对增重率
试验开始喂药物时早晨空腹称重，记为初重。试验结束时称末重,计算相对增重率。相对增重率=(感染各组鸡平均增重/不感染不给药组鸡平均增重)×100%。
1.5.3存活率
存活率=(组内鸡存活数/组内鸡总数)×100%。
1.5.4粪便记分
接种卵囊后第4、5、6、7、8ｄ,参考Ｍｏｒｅｈｏｕｓｅ的方法[3]，按以下标准记分:正常0分;少量血便1分;中等量血便2分;许多血便3分;无正常粪便4分。0分不作记录次数计。平均粪便记分=每组鸡粪便记分之和／记录次数。
1.5.5病变计分
按Ｊｏｈｎｓｏｎ等[4]的方法,做鸡的盲肠及小肠病变记分。病变值=每组平均病变记分×10。摘取小肠，剪开洗净小肠。根据剖检后肠道病变的严重程度记分。无病变记0分;轻微病变者记1分;盲肠壁增厚，有小到中等出血记2分;内有很多出血块记3分;因球虫死亡记４分。
1.5.6卵囊排出情况
感染后第4～8d,收集粪便,计算每克粪便中的卵囊数(Ｏ.Ｐ.Ｇ)。并按角田清[5]的标准换算成卵囊值。即感染后第6d鸡的Ｏ.Ｐ.Ｇ值与感染不给药组鸡的Ｏ.Ｐ.Ｇ值的比值小于1%,卵囊值为0;在1%～25%时,卵囊值为5;在25%～50%时,卵囊值为10;在50%～75%时,卵囊值为20;在75%～100%时,卵囊值为40。
1.5.7抗球虫指数(ＡＣＩ)
按照美国默克(Ｍｅｒｃｋ)公司的计算公式,ＡＣＩ≤120为无效,ＡＣＩ=120～160为中等有效,ＡＣＩ=160～180为良好,ＡＣＩ>180为优秀。ＡＣＩ=(存活率+相对增重率)-(病变值+卵囊值+粪便计分)。
2.结果
2.1临床表现和血便计分
试验期间,不感染不给药组鸡精神、食欲、粪便均正常。感染不给药组和各用药组均有不同数量鸡不同程度地表现出病状,如:精神沉郁、采食量减少或食欲废绝、排出血便和出现死亡、畏寒等。各用药组在第5d出现少量血便,第8d即停止血便。
2.2增重情况
甘草组在三个用药组中鸡的增重最高,其次为石榴皮组和直杀球虫散组,甘草组与不感染不给药组鸡的增重相比有显著差异,显著高于不感染不给药组的鸡。石榴皮组增重与不感染不给药组的鸡相比无显著差异，显著高于感染不给药组的鸡，而直杀球虫散组与感染不给药组的鸡无显著差异。
2.3粪便及盲肠内容物克卵囊数
石榴皮组、甘草组和直杀球虫散组的鸡在感染后第6～8d的Ｏ.Ｐ.Ｇ值显著低于感染不给药组,卵囊值分别为5,10,5。而中药Ⅱ组鸡在第6～7d的Ｏ.Ｐ.Ｇ值与感染不给药组无显著差异,卵囊值为40(表3)。在盲肠内容物的检查中, 未感染未给药组的鸡未见卵囊。各用药组鸡的Ｏ.Ｐ.Ｇ值,以中药Ⅱ组的最高,其次为中药Ⅰ组的,盐霉素组和地克珠利组的卵囊很少,各组鸡的Ｏ.Ｐ.Ｇ值均极显著低于感染未给药组。
2.4抗球虫药效综合判断结果
甘草组和石榴皮组抗球虫指数, 分别达165.4、160.79，具有良好的抗球虫效果。直杀球虫散,为107.32, 具有低效抗球虫效果。
3.讨论
（1）柔嫩艾美耳球虫是鸡的艾美耳球虫中致病性最强的一种,它主要危害15～45日龄雏鸡,从本试验的结果(ACI值为60.53、血便情况严重、死亡率高等)来看,这次试验中使用的柔嫩艾美耳球虫的毒力较强。
（2）据农业部门(1992)农(牧)药字99号文件规定,抗球虫指数(ACI)值大于180者为高效,160～180者为中效,小于160者为低效,小于120者为无效。从上述结果可知, 石榴皮组抗球ACI值为165.4、甘草为162.79、直杀球虫散为107.32，由此判定石榴皮和甘草组抗球虫有中等的抗球虫效果,可应用于饲料中预防鸡球虫感染。直杀球虫散低效抗鸡球虫作用,这可能与近年广泛使用该药造成产生该药的耐药性球虫株有关。
【参考文献】
［１］立农,陈杖榴.鸡球虫耐药性的研究进展[J].中国兽医杂志,1999,33(4):47～51.
［２］角田清.鸡球虫病[M].上海:上海科学技术出版社,1986.
［３］李佩国，陈丽凤等.人工感染鸡球虫发病规律的研究,河北职业技术师范学院学报，2000，14（3）.