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鸡α—干扰素抗传染性法氏囊炎感染试验研究

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摘要 选取90只28日龄SPF鸡,随机分为6组,每组15只,分别为干扰素预防组、卵黄抗体组、干扰素与卵黄抗体联合使用高剂量组、干扰素与卵黄抗体联合使用低剂量组、攻毒对照组以及健康对照组。结果表明,当鸡α-干扰素与法氏囊卵黄抗体联合应用时,无论是高剂量还是低剂量,均能产生很好的保护作用。推荐在单独使用鸡α-干扰素抗鸡传染性法氏囊炎病毒感染时可使用1万U/羽的剂量,在与法氏囊卵黄抗体联合应用时,可采用0.5万U鸡α-干扰素+适量法氏囊卵黄抗体,分点进行肌肉注射给药,每日1次,连用3次。

关键词 鸡;α-干扰素;传染性法氏囊炎;感染

中图分类号 S855.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2013)15-0277-02

在中国传统养殖业中,病毒性传染病占据主要地位,危害畜禽的健康,由于其具有变异快、非典型、易暴发、高发病率、高死亡率等特点,给动物养殖业造成了巨大的经济损失,因此亟需一种新型制剂来加强对病毒病的防治工作[1-2]。干扰素(interferon,IFN)系统是脊椎动物细胞功能自我稳定的重要系统,它在机体抵抗多种病原微生物以及特异性免疫应答中具有重要作用[3]。自1957年英国学者发现IFN以来,它一直是细胞因子研究中最为活跃、也是进展最快的领域之一。IFN在基因表达调控的研究中有重要意义,而且在病毒病的发病机理和防制上占有重要地位[4-5]。该试验旨在通过对供试鸡只进行抗感染治疗,从而确定α-干扰素对鸡传染性法氏囊炎的抗感染效果。

1 材料与方法

1.1 试验材料

鸡传染性法氏囊病病毒强毒株,购自北京市农林科学院畜牧兽医研究所,规格为2 mL/支,病毒含量约为106.5EID50/0.2 mL。鸡α-干扰素规格为2 000万U/10 mL,稀释后备用;鸡传染性法氏囊病精制卵黄抗体,购自洛阳普莱柯生物工程有限公司,规格为250 mL/瓶。26日龄SPF健康雏鸡,购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。

1.2 试验方法

从北京梅里亚维通实验动物技术有限公司购进26日龄SPF雏鸡100只,放入隔离器进行常规饲养。2 d后(即28日龄时),从中选取体型大小比较接近、精神状态较好的90只SPF鸡,对其进行随机分组,共分为6组,每组15只,分别为干扰素预防组、卵黄抗体组、干扰素与卵黄抗体联合使用高剂量组、干扰素与卵黄抗体联合使用低剂量组、攻毒对照组以及健康对照组,并对每组鸡只进行逐只称重,记录初始体重。根据对鸡传染性法氏囊病病毒强毒株的前期鉴定研究结果,确定用灭菌PBS液将毒种进行15倍稀释[6],除健康对照组外,其余各组鸡只取0.2 mL稀释液采用滴鼻、点眼的方式进行攻毒。试验鸡在人工感染法氏囊毒株的同时进行给药,给药前用灭菌PBS将鸡α-干扰素稀释为1万U/0.5 mL。具体给药剂量及方式见表1。

1.3 临床疗效判断

临床症状观察主要观察试验期间鸡的精神、食欲、活动、粪便以及发病死亡等情况,连续观察10 d。将在试验过程中发病死亡的鸡只进行剖检,逐个观察病变程度,包括法氏囊、胸肌、腿肌以及腺胃和肌胃的病理变化。在试验开始和试验结束时对试验鸡逐只进行称重,根据每组试验鸡的增重情况,计算其增重率。

2 结果与分析

2.1 试验鸡的临床症状观察

健康对照组鸡只在试验期间,精神、食欲、活动及粪便均表现正常,攻毒对照组鸡只在感染初期表现为羽毛松乱,精神不佳,活动减少,并随着时间的推移逐渐加重,攻毒第3天,全群均表现典型的传染性法氏囊炎症状,精神沉郁,闭目蹲立或者趴卧,缩颈,羽毛逆立,食欲减退,并且在此期间攻毒鸡只死亡数量达到高峰[7]。各个给药组临床症状均显著轻于攻毒组,有部分出现羽毛松乱,极个别鸡只出现蹲立、活动减少的现象,但大多数鸡只精神状态、采食饮水情况都较好,其中以鸡α-干扰素与卵黄抗体联合使用的2个剂量组效果最为显著(表2)。

2.2 试验鸡法氏囊病变情况

健康对照组鸡只的法氏囊较柔软,呈淡粉红色,囊内干净。攻毒后发病死亡的鸡只剖检观察均可见胸肌、腿肌有明显出血情况,胸腺也表现为出血肿胀,腺胃和肌胃交界处可见明显出血带,腺胃间有出血点,法氏囊多数肿大出血,部分呈紫葡萄样外观,部分胶冻样水肿,切开可见有乳糜样内容物,并且布满出血点。

2.3 试验鸡只增重结果

试验组鸡只在试验开始时进行称重,并且在给药后观察10 d,试验结束时进行称重,分别计算鸡只的平均体重以及各组的增重率。与攻毒对照组进行比较,各给药组的增重效果十分显著,但各个给药组之间相比较,差异并不显著(表3)。

3 结论与讨论

该试验着重比较了1万U鸡α-干扰素单独应用及其与法氏囊卵黄抗体联合应用的保护效果,结果表明,当鸡α-干扰素与法氏囊卵黄抗体联合应用时,无论是高剂量还是低剂量,均能产生很好的保护作用。同时,考虑到在联合用药时应用较低剂量,能够减少经济支出,因此推荐在单独使用鸡α-干扰素抗鸡传染性法氏囊炎病毒感染时可使用1万U/羽的剂量,在与法氏囊卵黄抗体联合应用时,可采用0.5万U鸡α-干扰素+适量法氏囊卵黄抗体,分点进行肌肉注射给药,每日1次,连用3次。

4 参考文献

[1] 梁斌.国内动物干扰素的研究进展[J].甘肃畜牧兽医,2005,35(2):39-42.

[2] 杨汉春.兽医免疫学[M].3版.北京:中国农业出版社,2003.

[3] 吴志光,夏春,汪明,等.鸡Ⅱ型干扰素存在亚型[J].动物医学进展,2001,22(1):50-54.

[4] 黄泓,张伟.包含体的体外复性研究进展[J].生命的化学,2003,23(5):397-400.

[5] 于德强,何询.重组蛋白复性技术研究进展[J].生物技术通讯,2004, 15(1):67-69.

[6] BERNASCONI D,SCHULTZ U,STAEHELI P.The interferon-induced Mx protein of chicken lacks antiviral activity[J].Journal of Interferon & Cytokine Res,1995,15(1):47-53.

[7] 殷震,刘景华.动物病毒学[M].2版.北京:科学出版社,1997:613-628.