血细胞分析仪血小板异常结果时血涂片的重要性

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摘要：目的 探讨血细胞分析仪测定血小板异常时血涂片的重要性。方法 SYSMEX XT-1800i血细胞计数仪检测血小板异常结果（增高>500×109/L，减少

关键词：血细胞分析仪；血小板异常；血涂片染色；显微镜

血小板（PLT）的功能主要是促进止血和加速凝血，血小板的数量和质量的异常会导致出血性疾病。血小板数量的减少常见于血小板减少性紫癜，再生障碍性贫血，脾功能亢进和白血病等有关病症。血小板数量增加多见于常见于骨髓增生性疾病，如慢性粒细胞白血病、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症等病症。血小板质量异常主要见于血小板无力症，因此对血小板数量检测是临床最常用的检验项目之一，血小板的检测是临床诊断和治疗各种原因血小板减少症的重要指标。患者的血小板减少或增加可能会指导临床医师抽骨髓检查或输入血小板治疗，因此判断和鉴定血小板的减少或增加是极其重要和必须的。及时发现各种原因所引起的血小板假性减少和假性增加，有效地减少了因为诊断和治疗错误而引起的医疗纠纷，因此如果能及时发现这对医生和患者来说都尤为重要。随着检验技术的发展，血细胞分析仪已基本普及，血细胞分析仪在测定血细胞方面，特别是测定血小板具有检测方便，快捷和重复性好以及工作效率高等诸多优点，已在各大、中医院检验科的临床检验工作中广泛应用。血小板检查是临床血常规检查中的重要检查项目，由于测定时受诸多因素影响，熟练掌握常见的测定影响因素能有效地指导临床的诊断与治疗。但是在实际检测中，由于血细胞分析仪在测定血小板时常常会出现血小板的假性减少或增加，而且产生的原因复杂多变，这给操作者辨别真伪带来一定困难，一旦辨别错误，容易引起医疗事故和纠纷，这应该引起临床广泛注意。

1资料与方法

1.1一般资料 收集寿县县医院2011年7月～2013年6月仪器测定PLT500×109/L 100例，年龄8月～45岁，其中内科100例，儿科150例。

1.2仪器与试剂 SYSMEX-1800i全自动血细胞分析仪，双筒显微镜，原装配套试剂、质控物，瑞氏染色液。

1.3方法

1.3.1患者静脉采血，2ml血加入含有EDTA-K3抗凝真空管中，充分混匀，在1h内上机完成，每份标本测定3次，取平均值。

1.3.2对250例血小板结果异常的标本，同时进行血涂片复检，仪器计数相符合的标本（片中无血小板聚集现象，散在分布，与涂片观察相符）200例，其中50例为假性血小板减少和增加。

1.3.3诊断血小板假性减少的标准。当血小板计数低于50×109/L时，多是显著性减少，而且此时并没有浅表皮肤及黏膜出血；显微镜检查发现血小板聚集成堆，在排除标本采集中不慎发生的凝集现象，这时可诊断为血小板假性减少。

1.3.4血涂片法 将血液标本推片、染色后，油镜下进行读片。血涂片法血小板数（×109/L）=涂片计数血小板的数×血液细胞分析仪白细胞数（×109/L）/涂片计数血小板时所能见到白细胞数。

2结果

2.1排除了50例血小板假性增加和假性减少后，其余200例血细胞计数血小板增加或减少时与涂片法比较，符合率为（70/100）70%、（130/150）87%。

2.2 50例血小板假性增加和假性减少仪器法与血涂片法比较，见表1。

3讨论

采血是否顺利是造成血小板偏低的一个重要影响因素，采集手指末梢血时，因进针浅，出血慢，挤压采血部位，使组织液渗入血液中，造成血小板减少，采集静脉血，若采血过程不顺利，血流不畅，静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时，因组织损伤，导致组织凝血因子混入血标本，产生肉眼看不见的微小凝块，造成血小板减少，这是造成血细胞计数测定血小板结果偏低的常见的原因。因此，在阅片时应特别注意血小板减少患者阅片，如果必要应重新采血复查。

血液标本放置的时间过短也能造成血小板结果偏低。在实际的工作中，在采取血液标本后都是立即开始检测，这时常常会出现血小板计数假性减少现象。究其原因，是因为血小板离体后，血小板的形态发生了变化，血小板外膜形成的微小管的游离端向外扩展，这使得在血小板周围形成一些丝状伪足，这些血小板伪足相互作用，形成了血小板可逆聚集体。这种血小板因为很难被溶血剂溶解，这使得血小板计数会暂时减少，随着时间的慢慢推移，这种假性聚集会发生一定程度的解聚。因此，为了提高准确性，建议在采血后放置15～20min再测定可得到准确结果。

自动化的血液分析仪，无论是阻抗法还是光散射法，对于血小板数及形态正常的标本，结果一般比较可靠。但是，对于血小板明显减少或血小板形态异常者来讲，用自动化的血液分析仪来分析计数误差较大，甚至有时很难计数。主要原因是阻抗法和光散射法基本上都是按照细胞的大小来区分和计数的，但是正常人的血小板体积相差较大，而且体积分布的直方图并不是对称分布，而是明显向右延伸，也就是是说存在一些大的血小板。在病理的情况下，会更多地增加一些大血小板。因为多数血液分析仪较难区分出小红细胞与大血小板，这使得很多大血小板被认为是红细胞而未计入血小板总数中，这也使得血小板计数结果明显偏低。

大量的输入血液时会引起血小板减少。这种情况多在4～6d后恢复正常。此外，某些患者在输血后的1w左右时间内，会出现血小板计数明显减少的现象。有些治疗方法对血小板的计数也会产生较大影响，如血液经光量子血疗仪照射后，血小板计数明显减少，经电镜观察发现，照射后的血小板形态不完整，形成大量的伪足及血小板碎片。

EDTA盐是全自动血细胞计数仪常用的抗凝剂，它能保持细胞形态和防止血小板聚集，而有极少数人血小板在EDTA盐抗凝后，反而使PLT聚集，EDTA （Ethylene Diamine Tetraacetic Acid）依赖性血小板减少症（EDTA- dependent pseudo thrombocytopenia，PTCP）是因为EDTA盐抗凝血中EDTA诱导血小板中的特殊蛋白使得血小板发生了凝集，而且当在全自动血细胞计数仪上检测时，血小板计数会发生假性减少的现象，血细胞分析仪不能计数凝集的血小板，因此导致本应在正常计数范围内的血小板可能计数为20×109/L[1]。

当标本中血小板小于20×109/L时，仪器法可信度较差，不能很好地反映血小板的真实数量，也不能保证检测结果的准确性，采用血涂片间接计数血小板，可较直观地反映患者血小板数量的多少，尤其对于血小板减少者。但是在某些情况下，假性血小板减少隐藏着真实的血小板减少或者血小板增多[2]，由于血小板生理特性，易粘附、聚集，在PLT

小红细胞所导致血小板假性增高的100例血小板增高，其中30例假性增高，占30%，主要原因是当MCV20%，血小板直方图异常，尾部翘起，仪器显示小红细胞症、红细胞大小不均、缺铁性等提示，但在日常临床检验工作中，血小板假性增高并没有引起重视，

综上所述， 血细胞分析仪计数血小板具有快速、简便、重复性好等优点。然而，血小板易于粘附、聚集、破坏，常出现血小板计数假性减少现象，这给临床的准确诊断疾病带来了一定的困难。造成假性血小板增加或减少的原因复杂，但在临床中若遇到静脉抗凝血检查血小板显著增加或减少而临床检查无体症时，应立即血涂片染色镜检查，这样可以准确测出异常血液标本的血小板数，在某种程度上保证了异常标本检测结果的准确性，为临床提供准确可靠的诊疗信息，以免患者误诊、误治。

参考文献：

[1]邢忠海，刘东声.EDTA依赖性血小板减少的分析与对策[J].实用医学杂志，2011，27（3）：507-508.

[2]李盛龙，赵丹.乙二胺四乙酸盐依赖性假性血小板减少症研究进展[J].基层医学论坛，2012，16（19）： 2551-2553.

[3]汪虹彬，黄德元.血球计数仪血小板检测结果减低原因的探讨[J].实用医技杂志，2011，15（32）：4523-4524.

[4]杜明，张薇，李秀萍.血细胞仪测定血小板假性减少的原因及对策[J].中国误诊学杂志，2012，12（3）：569-570.