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胚胎工程中几个需要关注的问题

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胚胎工程的内容较为抽象和深奥,有些问题,适当深究其本质,可避免死记硬背,更有利于理解。本文对胚胎工程中获能、“极体”的个数、同期处理和超数排卵技术中所用的激素等相关内容进行了阐述和分析。

一、获能

1.什么叫获能

刚刚排出的,不能立即与卵子受精,必须在雌性动物的生殖道发生相应的生理变化后,才能获得受精能力。1951年,张明觉和奥斯汀发现了这一生理现象,并把它称为“获能”。

2.去能及获能的原理

为什么刚刚排出的,不能立即与卵子受精呢?在雌性动物的生殖道内到底发生了什么变化呢?

其实,在附睾内已经获得了受精能力,但附睾分泌的一些物质附于表面,其中有一种含唾液酸的糖蛋白,从免疫学角度来看,唾液酸有掩盖特异抗原的机能,这就使在漫长的成熟及运行过程中,不至于被免疫活性细胞识别而引起自身免疫反应。另外,唾液酸糖蛋白可稳定顶体前区的细胞膜,抑制的顶体反应,从而抑制了它的受精能力,这种物质被称为去能因子。

所谓获能过程即为去除表面的这种因子并获得受精能力的过程,这将使膜的结构与机能发生剧烈的改变。去能因子的清除主要依靠宫颈、子宫及输卵管液中的β淀粉酶、胰蛋白酶、β葡糖苷酶及唾液酸酶,后者在卵泡液中含量也很高。

获能以后,膜的不稳定性增加,并去除了抑制顶体反应的因子,才可能发生顶体反应。发生顶体反应后,释放出的顶体酶可溶解出一条通道,使穿越放射冠和透明带,进入卵黄膜,才能完成受精作用。所以,直接取自附睾的不具有受精能力。而把这些放在雌性生殖道内若干时间后,再取出作体外受精试验,才具有受精能力。

3.获能的部位

在阴道内不能获能,只有当他穿过宫颈时,精浆内大量的去能因子才能被阻挡。同子宫内膜接触后,子宫内膜产生获能因子。输卵管的分泌物也参与了获能。因此,可以说的获能过程是一个多时相的过程。先在子宫内,后在输卵管内获能。随着的获能,氧耗量增加,运动加速,并迅速游向卵子,最终使精卵结合。

二、关于极体的个数

选修三《现代生物科学技术专题》第63页中有这样的描述:当在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时,说明卵子已经完成了受精,这是判断卵子是否受精的重要标志。

选修三《现代生物科学技术专题》第63页图3-5,第65页图3-6,都没显示第一极体的再分裂过程。针对多数哺乳动物的第一极体不进行减数第二次分裂形成第二极体,所以看到的两个极体并非都是第二极体,一个是第一极体,另外一个是第二极体。(与书上图示一致)

三、同期处理中所用的激素是性激素还是促性腺激素

1.同期的原理

母牛的周期,从卵巢的机能和形态变化方面可分为卵泡期和黄体期两个阶段。卵泡期是在周期性黄体退化继而血液中孕激素水平显著下降后,卵巢中卵泡迅速生长发育,最后成熟并导致排卵的时期。卵泡期之后,卵泡破裂并发育成黄体,随即进入黄体期。黄体期内,在黄体分泌的孕激素的作用下,卵泡的发育成熟受到抑制,母畜不表现,在未受精的情况下,黄体维持约15~17天,即行退化,随后进入另一个卵泡期。由此看来,黄体期的结束是卵泡期到来的前提条件。相对高的孕激素水平可以抑制,一旦孕激素水平降到低限,卵泡即开始迅速生长发育,并表现。因此,同期的中心问题是控制黄体期的寿命,并同时终止黄体期。如能使一群母畜的黄体期同时结束,就能引起它们同期。

2.同期的处理方法

现行的同期技术主要通过两种途径:一种是向待处理母牛群同时施用孕激素,抑制卵泡的发育和,经过一定时期同时停药,随之引起同期。另一种是利用前列腺素或其类似物使黄体溶解,中断黄体期,降低了孕激素水平,从而提前进入卵泡期,使提前到来。这两种方法所用的激素性质不同,但都是使孕激素水平迅速下降,达到同期化的目的。

四、超数排卵处理中所用的激素是性激素还是促性腺激素

在超数排卵技术中,所用的激素为促性腺激素。

超数排卵就是在动物周期的一定阶段,提高血液中促性腺激素浓度,降低发育卵泡的闭锁,增加早期卵泡发育到成熟卵泡的数量(即增加每次排卵数目),使动物产多胎,并准确地按照预定的时间进行排卵,达到提高繁殖率的目的。

为什么超数排卵技术不直接用性激素呢?这是由于性激素是由性腺产生释放,长期使用外源性激素会导致性腺萎缩。促性腺激素由垂体产生释放,作用于性腺,可以达到与性激素相同的效果并且不会使性腺萎缩。

使用激素及方法:牛超数排卵使用的激素主要有促卵泡素(FSH)、孕马血清促性腺激素(PMSG)、绒毛膜促性腺激素(HCG)等几种。使用前应根据母牛体重、超数排卵次数等情况,确定超数排卵所使用的FSH剂量,一般体形较大的牛剂量大些,重复超数排卵的剂量也要适当提高。