HPLC法测定麦杞西洋参饮料中人参皂苷Rb1的含量

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【摘要】 目的 建立此种麦杞西洋参饮料中人参皂苷Rb1的含量测定方法。方法 hplc法。流动相：乙腈-水-磷酸（28：72：0.1）。检测波长为203nm；柱温40℃。结果 人参皂苷Rb1含量在0.4695-2.3476mg/ml之间呈良好线性，平均回收率为98.0%，RSD=1.7%（n=5）。结论 方法可靠，简单可行，为控制麦杞西洋参饮料的内在质量提供了科学依据。

【关键词】 麦杞西洋参饮料：西洋参；人参皂苷Rb1；HPLC法

doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.547 文章编号：1004-7484（2012）-08-2852-01

麦杞西洋参饮料以西洋参为主要原料，经过科学工艺制成，具有缓解体力疲劳的保健功能。为更好地控制其内在质量，确保其质量稳定可靠，我们以HPLC法测定了本品中的主要有效成分西洋参中人参皂苷Rb1的含量，为控制其质量提供科学依据。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪：安捷伦1200高效液相色谱仪；天平：分析天平十万分之一XS-205；人参皂苷Rb1对照品：中国药品生物制品检定所；麦杞西洋参饮料样品：吉林省集安益盛药业股份有限公司。所用试剂甲醇、乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件 色谱柱：安捷伦C18；流动相：乙腈-水-磷酸（28：72：0.1）；检测波长：203nm；柱温：40℃；流速：1ml/min；进样量：10ul；理论板数：理论板数按人参皂苷rb1峰计算不应低于1800。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rb1对照品25mg，置于25ml量瓶中，加50%甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，作对照品液（每1ml中含人参皂苷Rb11mg）。

2.3 供试品溶液的制备 精密量取本品50ml，加0.1mol/L氢氧化钠溶液调节PH值至12，用水饱和正丁醇溶液振摇提取3次，每次25ml，合并提取液，置水浴上蒸干，残渣加50%甲醇溶解至5ml量瓶中并稀释至刻度，作为供试品溶液。

2.4 阴性对照溶液的制备 按处方组成，取出西洋参外的其余药，按制备工艺要求，制成不含西洋参的阴性对照样品，再按供试品溶液的制备方法，制成阴性对照溶液。

2.5 空白试验 按上述条件，分别吸取供试品溶液、对照品溶液，阴性对照品溶液适量，分别注入液相色谱仪测定，结果其它成分对人参皂苷Rb1的测定无干扰，符合测定要求，详细结果，见下图：

2.6 线性关系考察 精密称取人参皂苷Rb1对照品0.05869g，置25ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，作对照品溶液（每1ml中含人参皂苷Rb12mg）。从对照品溶液中精密吸取溶液2、4、5、6、8ml，分别置10ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取上述溶液及对照品溶液各10ul，注入液相色谱分析仪分析，以峰面积为纵坐标，以人参皂苷Rb1浓度为横坐标，得回归方程为：A=2011.7C-3.0445，r=0.9999（n=6），结果表明：人参皂苷Rb1对照品在所试浓度0.4695-2.3476mg/ml范围内具良好的线性关系，详细结果，见表1。

2.7 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液，连续进样6次，进行精密度试验，其 =2577.68，RSD=0.3875%（n=6）。结果表明仪器具有良好的精密度，详细结果，见表2。

2.8 稳定性考察 精密吸取同一样品，照2.3方法制备测定，考察0、2、4、6、8小时时峰面积的变化，结果8小时内稳定性良好，其 =2349.23，RSD=0.5838%（n=5），详细结果，见表3。

2.9 重现性考察 精密吸取同一批样品6份，照2.3方法制备，独立试验，结果平均含量为11.7mg/100ml，其RSD=1.3378%（n=6）。表明重现性良好，详细结果，见表4。

2.10 回收率试验 取已知含量（11.7mg/100ml）样品5份，分别精密量取25ml，分别精密加入人参皂苷Rb1对照品溶液（0.1224mg/ml）25ml，按供试品溶液的制备方法制成检测溶液，并依法测定，详细结果，见表5。其平均回收率为98.02%，RSD=1.7207%（n=5）。

3 讨论

本研究采用高效液相色谱法，选用人参皂苷Rb1为标示性成分，对麦杞西洋参饮料中西洋参的有效成分之一人参皂苷Rb1进行含量测定。并分别对线性关系，精密度，稳定性，重现性和回收率进行了考察。试验结果表明所建立的方法稳定、准确、可行，能有效地控制麦杞西洋参饮料的内在质量。

参考文献

[1] 《中华人民共和国药典》2010版西洋参项下含量测定.

[2] 陈军辉，等.12种西洋参中总皂苷及人参皂苷Rb1的测定比较.时珍国医国药，2005，16（9）：845-847.

[3] 中华人民共和国农业行业标准NY 316-1997项下人参皂甙Rb1含量的测定方法.