猪免疫抗体不同检测方法的对比试验

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇猪免疫抗体不同检测方法的对比试验范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

[摘 要] 应用某国产胶体金诊断试剂盒和进口酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断试剂盒，分别检测猪血清中口蹄疫、猪瘟和蓝耳病抗体合格率，比较两种血清学诊断方法的准确性。结果表明，胶体金诊断试剂盒结果和ELISA结果差异显著，两者的符合率较低。因此，应加强国内部分胶体金诊断试剂的监控。

[关键词] 抗体检测 胶体金 ELISA

随着养殖业的持续发展及动物防疫工作的进一步深化，对动物进行免疫接种已成为预防和控制动物疫病的重要手段。口蹄疫、猪瘟和蓝耳病是国家要求强制免疫的重大动物疫病，其抗体监测关系免疫效果的考核、合理免疫程序的建立，也是评估疫苗质量、对重大动物疫情预警能力的的可靠依据。

县级以上兽医实验室目前开展抗体监测主要使用ELISA试剂盒，其昂贵、费时和要求专业仪器和专业人员的特点，使之不适合基层推广使用。近年来，随着一系列胶体金检测产品在动物疫病检测领域的推广运用，以其操作简单、价格低廉、现场即时检测等特点，迅速获得了基层兽医站和养殖户的认可。为了解这项新技术的检测准确性和可靠性，我们用胶体金和ELISA两种试剂盒检测猪血清中的抗体水平，其结果对比如下。

一、材料与方法

1.被检血清

从全市5个规模养猪场采集并分离猪血清共27份，-20℃保存备用。

2.诊断试剂

口蹄疫合成肽ELISA试剂盒为上海优耐特生物医药有限公司生产，批号：201012004；猪瘟抗体ELISA试剂盒为北京爱德士元亨生物科技有限公司生产，批号：43220-X681；猪蓝耳病抗体ELISA试剂为北京爱德士元亨生物科技有限公司生产，批号： 40959-X061。

胶体金快速诊断试剂盒为苏州艾瑞德生物医药有限公司生产，猪口蹄疫抗体快速检测试剂盒批号：CFC005A；猪瘟抗体快速检测试剂盒批号：CFC002A；猪繁殖与呼吸综合症抗体快速检测试剂盒批号：CFC001A。

3.检测方法

3.1酶联免疫吸附试验（ELISA）严格按照说明书进行操作，以测得样品OD值大于临界值为阳性，否则为阴性。

3.2胶体金快速诊断法严格按照说明书进行操作，以检测线和对照线同时出现紫红色线为阳性，只有对照线出现紫红色线为阴性。

二、检测结果

表1 两种方法检测血清抗体结果

两种方法的检测结果经x2检验，有显著差异。

表2 样品结果分布图

三、结果分析

1.由表1可知，分别用2中诊断试剂盒测定27份血样抗体，ELISA测得的口蹄疫和蓝耳病抗体的合格率明显高于胶体金 ，而测得猪瘟抗体的合格率略低于胶体金。从两种方法的检测结果的符合率来看，猪瘟最高，为74%，口蹄疫次之，为41%，蓝耳病检测符合率只有26%。两种检测方法的结果出现了明显分离，因此，两种检测方法不具有平行相关性。

2.由表2可知，对样本个体而言，既有ELISA检测合格而胶体金不合格的样本，又有胶体金检测合格而ELISA检测不合格的样本。因此，不能以此判断两种检测方法的敏感性高低。

四、讨论

1.在重大动物疫病防控效果的考核中，抗体检测是检验免疫效果不可或缺的手段，而检测方法的不同往往导致结果上存在一定的差异。在本实验中，应用ELISA和胶体金两种方法对27份猪血清进行抗体检测，结果有显著差异（x2检验，P>0.05）。ELISA检测技术比较成熟，具有很高的特异性和敏感性，胶体金快速诊断法需凭肉眼观察色带深浅，与参照图对照，难免主观上的偏差。另外，胶体金抗原成分与被检抗体的亲和性，也与检测的合格率直接相关。

2.而胶体金快速检测试剂盒是新型定性和半定量的现场即时检测技术，目前在人传染病和激素类检测上非常成功，而在畜禽应用上处于起步阶段。 本文对国家强制免疫的三种疾病分别用两种方法检测，结果证明，胶体金检测技术目前仅适合基层养殖场，作为动物疫病的早期诊断和适时免疫的一项参考。不能忽视的是，一部分生产厂家技术并不成熟，提高该项技术检测的可靠性是其能否进一步推广运用的首要问题。否则，即使作为基层初步筛选的方法意义也不大。