出血性膀胱炎患者尿中BK病毒的阳性率调查分析

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摘要 目的：探讨造血干细胞移植术后并发出血性膀胱炎患者中bk病毒的阳性率。方法：造血干细胞移植术后并发出血性膀胱炎患者30例作为观察组，30例健康成人为对照组，运用PCR检测技术检测尿中的BK病毒DNA。结果：观察组26例检测出BK病毒DNA，病毒尿持续阳性中位时间7周（2～14周），对照组均未检出BK病毒。结论：造血干细胞移植术后出血性膀胱炎是常见的并发症之一，在这些患者中病毒尿的发生率明显增高，BK病毒可能参与出血性膀胱炎的发病过程。

关键 词BK病毒；出血性膀胱炎；造血干细胞移植

BK病毒是多瘤病毒家族亚成员之一，系DNA病毒，BK病毒广泛感染人群，最新统计发病率7%～68%。出现临床症状的患者常限于免疫功能缺陷的个体，当机体免疫功能受抑制时复活，大量复制而致病。出血性膀胱炎是造血干细胞移植后常见的并发症之一，严重影响移植后的生存率，导致多脏器的衰竭。除药物和排异因素外，病毒感染尤其是BK病毒所引起的作用也越来越引起人们的重视。

资料与方法

2011-2012年收治接受造血干细胞移植后合并出血性膀胱炎患者30例，作为观察组，同时选择正常健康人30例作为对照组。收集两组的尿液进行检测。出血性膀胱炎按临床检验结果分四个等级：①Ⅰ级：镜下血尿；②Ⅱ级：肉眼血尿；③Ⅲ级：肉眼血尿伴随血凝块；④Ⅲ一Ⅳ级伴有尿道梗塞导致肾功能损伤的表现。30例出血性膀胱炎患者中镜下血尿9例、肉眼血尿18例、肉眼血尿伴随血凝块3例。

尿液DNA的PCR检测：高速离心（8000r/min，3min）取尿液上清200UL，用病毒基囚组DNA提取试剂盒（北京康为世纪产品）提取病毒DNA。PCR检测：正向引物：5′AGTCTT-TAGGGTCTTCTACC3’，反向引物：5'GGTGCCAACCTATGCAACAC3；反应体系：总体积25μL，其中PCR-mixture12.5μL（含0.1U Taq酶，500μ mol/LdNTP，3mmol/L MgCl2等），正向、反向引物各0.5μL，DNA模板5uL，灭菌双蒸水6.5μL。反应条件：94℃ 5min，94℃45s，57℃30s，72℃30s，共40个循环，72℃10min。BK病毒PCR产物176hp大小，用2%琼脂糖凝胶电泳观察。每次扩增均以双蒸水为模板作为为阴性参照，BK病毒DNA为模板作为阳性参照。

统计学分析：应用SPSS17.0统计软件进行数据分析，采用X2检验，t检验及方差分析等方法分析。P

结果

观察组26例检测出BK病毒DNA，病毒尿持续阳性中位时间7周（2～14周），对照组均未榆出BK病毒。

讨论

虽然造血干细胞移植后BK病毒在患者尿中的检出率显著增高，但经统计学分析，病毒浓度与病毒尿的出现可能与年龄、供/受者CMV感染血清学状态、性别、基础疾病、预处理方案、供者来源、干细胞来源（骨髓/外周血）、移植后血液学重建速度、GVHD严重程度、GVHD预处理方案等临床因素不存在显著相关。免疫功能低下的患者体内人类多瘤病毒被激活，近年来引发的相关疾病逐渐受到关注，如艾滋病合并JCV相关的进行性多灶性白质脑病（PML）。肾移植后患者并发BKV相关性肾病，导致暂时甚至永久性肾功能不全，是肾移植失败的原因之一。BK病毒感染、巨细胞病毒感染等因素可共同促进出血性膀胱炎的发生。

本研究结果显示，观察组26例检测出BK病毒DNA，病毒尿持续阳性中位时间7周（2～14周），对照组均未检出BK病毒。因此，造血干细胞移植术后出血性膀胱炎是常见的并发症之一，在这些患者中病毒尿的发生率明显增高，BK病毒可能参与出血性膀胱炎的发病过程。