紫草素对D-半乳糖损伤老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇紫草素对D-半乳糖损伤老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
【摘要】 目的 探讨新疆软紫草有效成分紫草素对D半乳糖所致老年性痴呆模型大鼠学习记忆功能的影响。方法 雄性Wistar大鼠腹腔注射D半乳糖生理盐水(150 mg/kg•d)连续6周,继以紫草素高(0.7 mg/100 g•d)、低(0.35 mg/100 g•d)剂量灌胃给药1周。以Morris水迷宫测定大鼠空间学习记忆能力、以黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定大鼠脑匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力及丙二醛(maleic dialdehyde, MDA)含量。结果 与对照组相比,模型组的学习记忆能力和SOD活力明显降低、MDA含量明显升高(P
老年性痴呆(AD)是一种严重危害老年人群身心健康的慢性神经退行性疾病,其发生机制与自由基过载造成的氧化应激反应密切相关,后者可引起痴呆模型动物脑内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量增高、超氧化物歧化酶(SOD)水平降低,是AD发生的重要影响因素。新疆软紫草有效成分紫草素具有体外抗氧化及抗衰老等多种药理活性,对氧化应激损伤具有较好的拮抗作用,但其是否具有脑内抗氧化及改善AD患者学习记忆的作用尚未见明确报道。本研究采用AD大鼠模型,通过观察其脑内MDA和SOD含量的变化,初步探讨紫草素对AD的防治作用。
1 材料与方法
1.1 动物及分组 30只雄性Wistar大鼠,体质量230~270 g,购自新疆实验动物中心,合格证号XJLA-2008-04。动物
基金项目:石河子大学高层次人才科研基金项目(项目编号:RCZX200664)
作者单位:721000宝鸡市人民医院(景富春);石河子大学药学院药本05级1班(高建波 刘冬);石河子大学药学院药理系(许玉华 王振华); 石河子大学药学院中药系(谭勇)
被随机分为对照组、模型组、阳性药组、紫草素高剂量组和紫草素低剂量组, 5只/组。
1.2 药物和试剂 D-半乳糖(批号080120)和考马斯亮蓝G250购自上海蓝季公司、超氧化物歧化酶(SOD,批号20080515)及丙二醛(MDA,批号20080407)试剂盒为南京建成生物工程研究所提供,软紫草有效成分紫草素(20070806)购自中国生物制品检定所,其他试剂均为国产分析纯,水为超纯水。
1.3 仪器 Thermo 多功能酶标仪,Morris水迷宫(中国医学科学院药物研究所),德国IAK-R104组织匀浆机,湖南凯达TGL20M高速冷冻离心机。
1.4 造模及给药方法 模型组、阳性药组、紫草素高剂量组和紫草素低剂量组大鼠均腹腔注射D-半乳糖300 mg/(kg•d),对照组同样方法注射0.9%氯化钠注射液2 ml/(kg•d),连续6周。于第6周末次给药结束后开始进行水迷宫实验,将筛选合格动物纳入后续实验,水迷宫试验方法参照文献[1]。其中,阳性药组给予灌胃给药哈伯因0.008 mg/100(g•d),紫草素高剂量组和低剂量组分别灌胃给药紫草素0.7 mg 和0.35 mg/100 g•d,连续1周。对照组及模型组灌胃给药等容积生理盐水。给药结束后先行水迷宫实验,然后进行脑匀浆SOD和MDA测定。
1.5 脑匀浆SOD和MDA含量测定 对照组、模型组、阳性药组、紫草素高剂量组和低剂量组均于末次给药后迅速置0℃冰面断头处死,冰浴下快速匀浆,继以低温高速离心,设定速度3000 r/min,离心时间10 min。取上清液备用。SOD和MDA试剂的配制均参照试剂盒相应说明书。脑匀浆中蛋白含量测定用考马斯亮蓝G250法。
1.6 统计学方法 所获数据均采用x±s表示,用SPSS for Windows 10.0统计软件作单因素方差分析(ANOVA),以P
2 结果
2.1 紫草素对D半乳糖损伤所致老年性痴呆模型大鼠的行为学影响 见表1。与对照组大鼠相比,模型组大鼠在Morris水迷宫中的游泳持续时间明显延长,搜索策略多为随机式或边缘式。两种指标的组间差异具有统计学意义(P
表1
紫草素D半乳糖致老年性痴呆模型大鼠在Morris水迷宫中的游泳时间(x±s,n=30)
组别剂量(mg/kg)游泳时间(s)
Day1Day2Day3Day4Day5
空白2.0092.71±22.6771.81±43.0654.42±45.0928.01±25.3425.22±25.46
模型150.00106.33±36.992.23±39.94*84.24±43.84**52.78±48.27*48.74±46.40*
阳性药0.0898.56±27.7281.76±41.1266.92±41.1140.91±24.6531.47±27.52
紫草素高剂量7.00102.85±29.5483.23±38.6172.67±39.8842.35±26.4337.08±23.32
紫草素低剂量3.50104.53±30.6386.30±45.2382.79±40.3751.33±27.9047.55±33.12
注:与空白组比较,*P
2.2 紫草素对D半乳糖损伤所致老年性痴呆模型大鼠脑匀浆中SOD和MDA含量的影响 见表2。模型组大鼠各时间点的SOD浓度均明显低于对照组,而阳性药组和紫草素高剂量组在各时间点则显著高于模型组,两两比较差异具有统计学意义(P
表2
紫草素对D半乳糖致老年性痴呆模型大鼠脑匀浆中SOD和 MDA含量的影响(x±s,n=6)
组别剂量(mg/kg)SOD(NU/mg•prot)MDA(nmol/mg•prot)
空白2.00471.98±12.16**49.74±11.53**
模型2.00439.92±8.1286.82±18.47
阳性药0.08467.18±10.74**59.87±6.69*
紫草素高剂量7.00458.55±7.30*59.31±16.40*
紫草素低剂量3.50451.78±0.0661.55±7.90*
注:与模型组比较,*P
与SOD不同,MDA的浓度在各组呈现出相反的变化,其差异亦有统计学意义(P
3 讨论
老年性痴呆(AD)是一种严重危害老年人群身心健康的慢性神经退行性疾病。近年来,随着全球人口老龄化步伐的加快,该病的患病率呈现上升趋势。据国内外有关调查显示,西方发达国家60岁以上老年人的痴呆患病率达2.3%~11.9%,我国在北京、上海、西安和成都等四个中心城市对年龄≥55岁人口进行的调查表明痴呆患病率为2.7%~7.3%。
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文
研究表明,AD的发生与多种因素导致脑内学习记忆相关神经元损伤有关[2],其中氧化胁迫反应是主要病理改变之一。氧化胁迫可引起痴呆模型动物脑组织胆碱能神经和多巴胺能神经功能受损,胆碱乙酰化酶活性降低,单胺氧化酶活性(MAO-B)升高,造成脑内与学习记忆和认知功能相关的神经递质乙酰胆碱(ACh)及多巴胺等的水平降低。还可导致衰老神经元胞浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量明显增高,后者呈帽状结构围绕脂褐素沉积,并成为老年斑的组成部分。氧化胁迫尚能造成其顶下小叶中表达超氧化物歧化酶(SOD)及在海马中表达谷光甘肽(GSH)的mRNA基因转录水平降低,促进了神经元变性和痴呆的发生。
新疆软紫草提取物具有抗氧化和抗衰老等多种药理活性[3],其抗氧化能力相当于2,6-二叔丁基对甲酚的42%和维生素C的35.5 %[4],对D-半乳糖所致急性氧化性肝损伤具保护作用,对超氧阴离子(O-2)、羟自由基(•OH)和单线态氧(1O2)等有较强清除能力,对氧化胁迫损伤具有较好的拮抗作用[5],同时尚可延长果蝇寿命并呈现出一定的量效关系[6]。这些研究结果表明,软紫草可能具有抗AD患者神经元氧化胁迫损伤作用。
本研究发现紫草素具有一定的抗脑内氧化胁迫作用,能明显改善D半乳糖痴呆模型大鼠脑匀浆中的SOD 和MDA的活性及含量变化,改善其学习记忆能力,提示以紫草素为研究靶点有可能开发出新的抗老年痴呆药物,开展紫草素抗老年性痴呆作用研究具有重要基础及临床研究价值。
参 考 文 献
[1] 丛伟红,刘建勋,徐立. 脑维康对D半乳糖致脑老化模型大鼠学习记忆的影响. 中药药理与临床,2007,23(5):155.
[2] 刑宏义,孙圣刚. Alzheimer病的胆碱能系统研究进展.国外医学神经病学神经外科学分册,2000,27(5):262-264.
[3] 肖培根. 新编中药志. 化学工业出版社,2002:976-986.
[4] 王威. 天然紫草素的研究. 食品科学, 2002, 23(6):56-58
[5] 买尔旦•马合木提, 刘燕 , 尼加提•热合木. 新疆紫草提取物对 D2氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤的保护作用. 中国中药杂志,2006,31(19):1646-1649.
[6] 许今博, 买尔旦 •马合木提, 于亚鹭. 新疆紫草提取物对果蝇寿命的影响.新疆医科大学学报, 2007,30(3):228.
本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文