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ABO血型正定型检测中使用最少试剂量的测定

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摘要:目的 abo正定型检测中使用最少量的抗A抗B检测出患者的血型。方法 对门诊32例建卡孕妇分别进行ABO血型正定型测定,并逐步减少抗A抗B的加入量,观察结果。结果 32例标本用2%的RBC悬液分别加入50μl、40μl、30μl、20μl、10μl的抗A抗B,离心速度1000转1min后均能检测出患者的ABO血型。结论 ABO血型正定型检测中用2%的RBC悬液加入10μl的抗A抗B即能检测出患者的血型。

关键词:ABO血型;正定型检测

Determination of the Least Amount of Reagent in the ABO Type Positive Test

FAN Xiao-chun

(Department of Clinical Laboratory,Shuyang County Renci Hospital,Suqian 223600,Jiangsu,China)

Abstract:Objective ABO is setting using the least amount of anti A and anti B detected in the patient's blood type detection. Methods 32 cases of pregnant women were the cards ABO blood group positive type determination, and gradually reduce the amount of anti A and anti B, observations. Results 32 samples with 2% RBC suspension were added to 50 L, 40 L, 30 l, 20 L, 10 microliters of anti A and anti B, centrifugal speed 1000 rpm for 1 minutes could be detected with ABO blood group. Conclusion ABO blood group positive type detection by 2% RBC suspension into 10 microliters of anti A and anti B can detect the patient's blood type..

Key words:ABO blood group;Positive type detection

ABO血型系统是临床输血、器官移植和新生儿溶血、亲缘鉴定、法医学鉴定以及某些疾病相关调查的最重要的血型系统。1900年出生在奥地利的美国免疫学家Karl Landsteiner(1868年~1943年)发现了不同人的RBC膜上的A抗原和B抗原以及血清中的A抗体和B抗体各不相同。根据人类RBC膜上是否有A抗原或B抗原,以及血清中是否有A抗体和B抗体,将人类的血型分为四类,即A型、B型、AB型和O型。A型血中RBC膜表面有A抗原,血清中有B抗体;B型血中RBC膜表面有B抗原,血清中有A抗体;AB型血中RBC膜表面有A抗原和B抗原,血清中无A抗体和B抗体;O型血中RBC膜表面无A抗原和B抗原,血清中有A抗体和B抗体。

人类的ABO血型抗原一般是终身变的。ABO抗原主要存在于人体的RBC膜上,也存在于人体WBCpPLTp某些血浆蛋白以及其他组织细胞上。组织细胞合成并分泌的ABO血型抗原称为血型物质,这种血型物质的检测可帮助ABO血型的鉴定,血型物质存在于各种分泌物和体液中,唾液中含量是最高的,然后是血清p尿液pp羊水p汗液p胃液、乳液、胆汁等。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院20~25岁建卡孕妇32例,每位患者采集1管EDTA抗凝的静脉血液。

1.2 仪器 离心机、50μl的加样枪、1000μl的加样枪、上海血液生物医药有限责任公司的抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体)、显微镜、玻片一次性塑料试管、一次性塑料吸管。

1.3方法 ①将32例标本编号并分别制出2%的RBC悬液(用1000μl的加样枪取出980μl的生理盐水至一次性塑料试管中,将抗凝血液离心分离出RBC,用50μl的加样枪取出20μl的RBC至980μl的生理盐水中);②将一次性塑料试管分别按顺序编号,每个号码分A管和B管(例1A,1B,2A,2B.);③用1000μl的加样枪分别将每份标本的2%RBC悬液吸取300μl加至A管和B管中;④在A管中加入50μl的抗A,在B管中加入50μl的抗B离心(1000转1min)观察结果:分别取出一次性塑料管轻轻晃动观察,再用一次性吸管分别吸取在玻片上至显微镜低倍视野下观察;⑤然后再重复①~③的操作依次的减少在A管和B管中加入抗A抗B的量(40μl,30μl,20μl,10μl)分别离心观看结果。

2结果

2.1结果的判断标准 ①A型:A管出现凝集,B管不出现凝集;②B型:A管不出现凝集,B管出现凝集;③AB型:A管出现凝集,B管出现凝集;④O型:A管不出现凝集,B管不出现凝集。

2.2实验结果 32例标本分别加入的50μl,40μl,30μl,20μl,10μl的抗A抗B,经离心1000转1min后均得到相应的血型。

3 讨论

新生儿的ABO血型抗原特别的弱,约为成人的20%,血清中的抗体也未稳定,所以新生儿在做血型鉴定时只做正定型。之后随着成长ABO血型的抗原性也逐渐增强,大概20岁左右就能到达高峰期,当进入老年期的时候ABO血型的抗原性则逐渐减低。本次试验共检测了32例20~25岁的建卡孕妇,恒定的取了300微升的2%RBC悬液,分别取了50μl、40μl、30μl、20μl、10μl的抗A抗B,得出的结果的准确率是100%。

4结论

通过本次实验结果可以看出,20岁左右的建卡孕妇血型检测我们可以节省试剂的用量,即取2%的RBC悬液300μl,加入10μl的抗A抗B离心1000转1min即可得出患者的血型。

参考文献:

[1]中华人民共和国.中国输血技术操作规程-血站部分[M].天津科学技术出版社,1997.60-63.

[2]熊立凡,刘成玉主编.临床检验基础[M].第4版,北京:人民卫生出版社,2008.