超高压提取柿叶中熊果酸工艺条件的优化

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摘要：为研究超高压提取柿叶中熊果酸的优化工艺，在单因素试验的基础上，采用正交试验研究提取压力、提取时间、乙醇体积分数和料液比对提取率的影响，并且同超声波辅助提取法和微波辅助提取法进行了比较。结果表明，超高压提取柿叶中熊果酸的最佳工艺参数为提取压力３００ ＭＰａ、提取时间４.0 ｍｉｎ、乙醇体积分数９５％和料液比１∶１１（ｍ／Ｖ，ｇ∶ｍＬ），该条件下熊果酸提取率为０．４３％，比超声波辅助提取法和微波辅助提取法的提取率分别提高了１０．３％和１６．２％，表明超高压提取法适合提取柿叶中熊果酸。

关键词：超高压提取；柿叶；熊果酸

中图分类号：Ｓ６６５．２；Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：0439－８114（２０12）16－3567-03

Optimization of Ultra High Pressure Method for Ursonic Acid Extraction from

Diospyros kaki Leaves

ＤＯＮＧ Ｈａｉ－ｌｉ，ＬＩＵ Ｈｏｎｇ

（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｈｕａｉｎａｎ Ｕｎｉｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈｕａｉｎａｎ ２３２０３８，Ａｎｈｕｉ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｏ ｏｐｔｉｍｉｚｅ ｕｌｔｒａ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ （ＵＨＰ） ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ （ＵＡ） ｆｒｏｍ Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ ｋａｋｉ Ｌ．ｆ． ｌｅａｖｅｓ， ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ＵＨＰ ｐｒｅｓｓｕｒｅ， ＵＨＰ ｔｉｍｅ， ｅｔｈａｎｏｌ volume fraction ａｎｄ ｓｏｌｉｄ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ ｏｎ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ＵＡ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈａｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｍｅｔｈｏｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ UA ｗｅｒｅ， ＵＨＰ ｐｒｅｓｓｕｒｅ， ３００ ＭＰａ； ＵＨＰ ｔｉｍｅ， ４.0 ｍｉｎ； ｅｔｈａｎｏｌ ｖｏｌｕｍｅ ｆｒａｃｔｉｏｎ， ９５％； ａｎｄ ｓｏｌｉｄ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ ｒａｔｉｏ， １∶１１（ｍ／Ｖ，ｇ∶ｍＬ）． Ｔｈｅ ｙｉｅｌｄ ｏｆ UA ｕｎｄｅｒ ｔｈｅｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗａｓ ０．４３％ ｗｈｉｃｈ ｗａｓ １０．３％ ａｎｄ １6．2％ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ａｎｄ ｍｉｃｒｏｗａｖｅ ｍｅｔｈｏｄ， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， ｉｎｄｉｃａｔｉｎｇ ｔｈａｔ ＵＨＰ ｗａｓ ａ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ＵＡ ｉｎ Ｄ． ｋａｋｉ ｌｅａｖｅｓ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｕｌｔｒａ ｈｉｇｈ ｐｒｅｓｓｕｒｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ； Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ ｋａｋｉ Ｌ．ｆ． ｌｅａｖｅｓ； ｕｒｓｏｌｉｃ ａｃｉｄ

柿叶为柿树科柿树属植物柿（Ｄｉｏｓｐｙｒｏｓ ｋａｋｉ Ｌ．ｆ．）的新鲜或干燥叶，其性味苦、酸、涩、凉，具有抗菌消炎、生津止渴、清热解毒、润肺强心、镇咳止血、抗癌防癌等多种医疗保健功能［１，２］。柿叶化学成分较复杂，目前研究表明，其主要含有黄酮类、三萜类、多糖等化合物［３－６］，其中三萜类成分熊果酸是柿叶的重要化学成分［７］。为提取柿叶中的熊果酸，一些研究者已经采用微波辅助提取法、超声波辅助提取法等方法［８］提取柿叶中的熊果酸。然而，这些方法容易对提取物中的有效成分造成破坏。超高压提取是在常温条件下提取植物原料中有效成分的新技术，该技术可以大大缩短提取时间、降低能耗，而且可避免提取过程中有效成分发生变化。

采用超高压提取柿叶中的熊果酸，研究提取压力、提取时间、乙醇体积分数和料液比对提取率的影响，并且同微波辅助提取法和超声波辅助提取法进行比较，为提取柿叶中熊果酸寻求新的方法。

１ 材料与方法

１．１ 材料

柿叶采自安徽省淮南市，真空干燥后粉碎，过６０目筛后待用；所有溶剂为分析纯。

ＵＨＰ９００×２－Ｚ超高压处理装置为郑州轻工业学院研制，ＪＹ８８－ＩＩ超声波细胞粉碎机来自上海新芝生物技术研究所，ＷＦ－２０００型快速微波反应器购自上海屹尧分析仪器公司。

１．２ 方法

１．２．１ 柿叶熊果酸的超高压提取法 称取一定量的柿叶粉碎物，加入不同体积、不同体积分数的乙醇溶液，混合成悬浊液；装入聚乙烯高压塑料袋中，真空封口，浸泡于超高压装置的传压介质油中，超高压处理，然后过滤，去除固体颗粒得提取液，提取２次，合并提取液，真空浓缩，测定熊果酸含量，计算熊果酸提取率。

熊果酸提取率的计算公式为：

Ｙ=■×100%

式中，Ｙ为熊果酸提取率；Ｃ为提取物中熊果酸含量；Ｖ为提取物的体积；m为柿叶粉碎物的质量。

１．２．２ 柿叶熊果酸的超声波辅助提取法 称取１０ ｇ柿叶粉碎物，加入１００ ｍＬ体积分数为７５％的乙醇，混合成悬浊液；在２００ Ｗ超声波功率下超声波辅助提取２０ ｍｉｎ，去除固体颗粒得提取液，提取２次，合并提取液，真空浓缩，测定熊果酸含量，计算熊果酸提取率［９］。

１．２．３ 柿叶熊果酸的微波辅助提取法 称取１０ ｇ柿叶粉碎物，加入１００ ｍＬ体积分数为７５％的乙醇，混合成悬浊液；在３００ Ｗ微波功率下处理４ ｍｉｎ，去除固体颗粒得提取液，提取２次，合并提取液，真空浓缩，测定熊果酸含量，计算熊果酸提取率［１０］。