大豆黄酮对热应激状态下奶牛血清CK、D―BIL、T―BIL的影响
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摘要 为了观察不同剂量大豆黄酮对热应激奶牛血清ck、D-bil、T-bil的影响，将40头体能相近的中国荷斯坦奶牛随机分成4组，试验组日粮中分别添加200、300、400 mg/d大豆黄酮，对照组饲喂基础日粮。在试验前及试验后10、30、60 d尾中静脉采血，分离血清，测定4组奶牛血清中CK、D-BIL、T-BIL的含量。结果表明：大豆黄酮对热应激奶牛血清中CK、D-BIL含量没有明显的影响（P>0.05）；在试验后30 d，试验Ⅰ组的血清T-BIL含量显著高于对照组（P
关键词 大豆黄酮；CK；D-BIL；T-BIL
中图分类号 S811 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）08-0246-01
大豆黄酮（DA）属于异黄酮类植物雌激素，主要来源于豆科植物。DA有许多有益的生理效应与药理作用，可以促进动物生长、提高泌乳性能、增强机体免疫力、调节内分泌等[1]。荷斯坦奶牛体型较大且汗腺不发达，生活在亚热带易发生热应激。奶牛产生热应激，易引起采食量下降，产奶量降低；另外，生理、生化功能紊乱，直接导致奶牛免疫力和繁殖性能显著降低[2]。该试验旨在探讨DA对热应激奶牛血清CK（肌酸激酶）、D-BIL（直接胆红素）、T-BIL（总胆红素）的影响，为DA在奶牛生产中的广泛应用提供参考。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物与分组。选用安徽省蚌埠市和平乳业奶牛场荷斯坦奶牛40头，按产奶量、泌乳期及胎次配对随机分成4组，即试验Ⅰ、试验Ⅱ、试验Ⅲ和对照组，每组10头，另外每组另选2头奶牛备用。
1.1.2 仪器设备。Anke LX-ⅡB台式离心机（上海安亭科学仪器厂），冰箱（海尔205F），DW-86L386海尔超低温保存箱，BS 224S电子天平，mindray BS-200全自动生化测定仪，IBM SPSS Statistics 20统计软件。
1.1.3 药物与试剂。药品：大豆黄酮购买于常州神马植物提取有限公司，4，7-二羟基异黄酮含量为80%。试剂：血清CK、T-BIL、D-BIL测定试剂盒，皆由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产。
1.2 试验设计
试验在奶牛场进行，试验期间平均温度33.51 ℃，平均湿度62.2%，温湿指数为85.18。试验前预饲1周，试验开始时，分别在试验Ⅰ、试验Ⅱ和试验Ⅲ组日粮中添加200、300、400 mg/d大豆黄酮，每天8：30将大豆黄酮拌于精料中1次给予试验奶牛，对照组饲喂基础日粮，试验第0、10、30、60天9：30空腹尾中静脉采血，分离血清，-70 ℃保存，备测。
1.3 测定指标与方法
采用mindray BS-200全自动生化测定仪及各种试剂盒测定血清CK（紫外-谷氨酸脱氢酶法）、D-BIL（钒酸氧化法）、T-BIL（钒酸氧化法）的含量。
1.4 统计分析
试验结果采用 SPSS 20软件进行方差分析和LSD多重比较，数据以平均值±标准差（x±SD）表示。
2 结果与分析
大豆黄酮对热应激奶牛血清中CK、D-BIL含量没有明显的影响（P>0.05）；在试验后30 d，试验Ⅰ组的血清T-BIL含量显著高于对照组（P
3 结论与讨论
3.1 讨论
血液中CK含量升高一般提示已有肌肉损害或正发生肌肉损害[3]。血液中D-BIL、T-BIL的浓度是目前临床诊断肝胆疾病的重要指标。
（1）对CK的影响。CK含量差异不显著且均高于正常范围，提示可能已有炎症发生。结果差异不显著可能与DA添加量、添加方式等有关。大豆黄酮能否保护热应激奶牛的肌细胞完整性有待进一步研究[4-5]。
（2）对D-BIL的影响。健康奶牛血清中D-BIL含量参考范围为0.7～7.5 μmol/L[3]。试验各组血清中D-BIL含量均不显著于对照组，各组试验奶牛血清中D-BIL含量均属于正常的水平。结果表明，大豆黄酮可以维持热应激奶牛肝胆功能正常。
（3）对T-BIL的影响。正常的生理条件下，奶牛血清中T-BIL水平参考范围为0.2～17.1 μmol/L[3]。在试验后30 d，日粮中添加200 mg/d DA的试验Ⅰ组血清中T-BIL含量显著高于对照组，但各组均处于正常的水平。表明大豆黄酮能够维持热应激奶牛胆红素代谢正常。只有1组结果与其他各组显著不同，出现这种情况可能与热应激奶牛个体差异有一定的关系[6]。
3.2 结论
日粮中添加大豆黄酮对热应激奶牛血清CK、 D-BIL、T-BIL影响不显著。
4 参考文献
[1]王月影，王艳玲，杨国宇，等.异黄酮植物雌激素-大豆黄酮的研究进展[J].中国畜牧兽医，2005，32（3）：14-16.
[2] LIU D Y，HE S J，JIN E H，et al.Effect of daidzein on production perfor-mance and serum antioxidative function in late lactation cows under heat stress[J].Livestock Science，2013，152（1）：16-20.
[3] 韩银华.荷斯坦奶牛肝功能与生产性能、繁殖性能的相关性研究[D].南宁：广西大学，2012.
[4] 刘德义，藏云龙，顾有方，等.大豆黄酮对奶牛血清钙、磷及葡萄糖水平的影响[J].黄牛杂志，2005（3）：17-19.
[5] 刘德义，顾有方，陈会良，等.大豆黄酮对奶牛血清钙、磷及葡萄糖水平的影响[J].中国饲料，2005（4）：20-21，24.
[6] 周隆英.大豆黄酮对畜禽生产性能的影响[J].畜禽业，2012（8）：40-41.