斯蒂芬牌伊力勉胶囊对兔免疫功能促进作用实验研究

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[摘要] 目的 观察斯蒂芬牌伊力勉胶囊对新西兰兔免疫功能的影响。方法 新西兰白兔60只,随机分组给药,斯蒂芬牌伊力勉胶囊组分为低、高剂量组,分别口服给予斯蒂芬牌伊力勉胶囊,胎盘片组口服给予胎盘片,人胎盘组织液组肌肉注射人胎盘组织液,阳性对照组给予贞芪扶正胶囊,对照组口服给予空胶囊,给药结束检测各组免疫功能指标。结果 斯蒂芬牌伊力勉胶囊高低剂量组胸腺、脾脏指数及单核巨噬细胞吞噬指数相较于对照组均有提高,其血清半数溶血值显著升高。结论 斯蒂芬牌伊力勉胶囊具有促进兔免疫功能的作用。

[关键词] 斯蒂芬牌伊力勉胶囊; 胎盘; 免疫增强

[中图分类号] R392 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)11-13-02

胎盘(placenta)又名“紫河车”,为常用中药,1578年李时珍《本草纲目》就有记载:人、羊、猪、牛等哺乳动物的胎盘皆可入药,安神养血,益气补精。现代医学研究表明:胎盘含有多种免疫球蛋白、活性肽、激素等生物活性物质及氨基酸、矿物质等成分,是一种机体免疫功能的调节剂和营养、美容保健品,具有促进新陈代谢及延缓衰老等作用[1-3]。斯蒂芬牌伊力勉胶囊以胎盘为主要成分,由邯郸康业制药有限公司利用双层胶囊专利技术研发,为了进一步研究斯蒂芬牌伊力勉胶囊对免疫功能的影响,本研究进行了多项相关免疫学实验。

1 材料与方法

1.1 试验药物

斯蒂芬牌伊力勉胶囊,由河北邯郸康业制药有限公司提供,样品编号:TS-200805,含量:1mg/粒、2mg/粒、5mg/粒,保存条件:低温避光。阳性对照品:贞芪扶正胶囊,样品批号:20070808,含量:0.35mg/粒,保存条件:低温避光。

1.2 试验动物

种属:新西兰白兔;数量:60只;性别:雌雄各半;体重范围:2.0～2.5kg;来源:河北省实验动物中心;动物合格证号:806060。

饲养条件:中央空调调控温度和湿度,在笼内饲养,每笼2只。温度20～25℃,相对湿度 40%～70%,控制光照明12h,暗12h。动物自由摄食及饮水。

1.3 实验方法

1.3.1 脾脏、胸腺器官重量系数测定 新西兰白兔试验前适应性饲养7d后开始试验,按性别、体重随机分为6组,每组10只,斯蒂芬牌伊力勉胶囊组分为低、高剂量组,分别口服给予斯蒂芬牌伊力勉胶囊5、10mg/kg,胎盘片组口服给予胎盘片150mg/kg,人胎盘组织液组肌肉注射人胎盘组织液0.1mL/kg,阳性对照组口服给予贞芪扶正胶囊1.25g生药/kg,对照组口服给予空胶囊,每天给药一次,连续7d。末次给药后次日称重处死,无菌条件下取胸腺、脾脏称重并计算出重量系数(脏器质量/ 体重)[4]。

1.3.2 单核细胞吞噬功能测定 参考小鼠碳粒廓清实验[5],分组及给药方法与1.3.1项相同,末次给药30min后静脉注射5mg/kg 中华牌墨汁,分别于注射后1、5min 眼眶取血,各20μL,分别加入2mL 0.1mol/L Na2CO3溶液,混匀后用紫外分光光度计于波长600nm检测OD值,计算廓清指数K(K=lg OD1-lg OD2/t2-t1)。

1.3.3 血清溶血素测定 同上分组及给药方法,给药第3天,兔腹腔注射20%绵羊红细胞(SRBC)0.6mL /只,于末次给药(第7天)后1h耳动脉取血2mL,2000rpm离心10min。取血清,生理盐水稀释500倍,加入绵羊红细胞稀释液以及110豚鼠血清稀释液,然后37℃水浴保温30min,冰浴终止反应,1500rpm离心5min,取上清液1mL加都氏试剂3mL,摇匀放置10min,于540nm波长比色读取吸光度值。按下列公式计算每只动物半数溶血值HC50。

HC50=(样品的吸光度值/SRBC半数溶血时的吸光度值)×稀释倍数

注:取5% SRBC 0.25mL加都氏试剂至4mL,比色读取吸光度值,即为SRBC半数溶血时的吸光度值。

1.3.4 统计学方法 试验结果经Instat(Ver3.0)统计软件包处理,经方差齐次性检验差异无显著性后,采用t检验进行组间比较。

2 结果

2.1 斯蒂芬牌伊力勉胶囊对兔免疫器官重量的影响

从表1可见,斯蒂芬牌伊力勉胶囊高低剂量组的脾脏、胸腺重量系数均明显高于对照组,尤其对脾脏影响更为明显。

2.2 斯蒂芬牌伊力勉胶囊对兔单核细胞吞噬功能的影响

从表2可见,斯蒂芬牌伊力勉胶囊高低剂量组碳廓清指数K均高于对照组,显示斯蒂芬牌伊力勉胶囊能够增强兔的单核巨噬细胞吞噬功能。

2.3 斯蒂芬牌伊力勉胶囊对兔血清半数溶血值的影响

与对照组相比,斯蒂芬牌伊力勉胶囊5mg/kg、10mg/kg连续给药7d均可显著升高兔血清半数溶血值,表明斯蒂芬牌伊力勉胶囊具有增强体液免疫作用,阳性对照贞芪扶正胶囊亦明显升高兔血清半数溶血值,见表3。

3 讨论

胎盘含有丰富的氨基酸、活性肽、激素等生理活性物质,早已是大家公认的机体免疫功能的调节剂和营养、美容保健品,从胎盘中提取的胎盘素在抗氧化和美容化妆品方面已经得到了广泛的应用[6]。随着现代分子生物学以及生物技术的发展,人们对于胎盘中发挥功效的活性分子的研究以及对于胎盘活性物质提取工艺的研究方兴未艾。

本实验结果表明,以胎盘为主要原料的斯蒂芬牌伊力勉胶囊增强了新西兰兔单核巨噬细胞的吞噬功能及胸腺、脾脏指数,并表现出一定剂量效应,提示斯蒂芬牌伊力勉胶囊对兔非特异性免疫有增强作用。与对照组相比,斯蒂芬牌伊力勉胶囊高低剂量组均显著升高了兔血清半数溶血值HC50,HC50越大表明抗体产生越多,体液免疫功能越强,由实验结果可见,斯蒂芬牌伊力勉胶囊对绵羊红细胞所致兔特异性抗体生成有明显促进作用,且其作用比常规胎盘片及人胎盘组织液分别提高兔血清半数溶血值8倍和9倍。

研究结果显示,斯蒂芬牌伊力勉胶囊对兔免疫功能有一定的促进作用,尤其增强了受试动物的特异性体液免疫功能,其作用效果优于常规胎盘片及人胎盘组织液(临床常用高剂量),可能是斯蒂芬牌伊力勉胶囊采取了更为先进的胎盘活性物质提取工艺,同时其采用的双层胶囊专利技术对于胎盘中有效物质的活性保存具有一定优越性。本研究对于将胎盘做为一种免疫促进剂的开发应用具有相当借鉴意义,其临床效果有待于进一步研究探讨。

[参考文献]

[1] 李黎. 胎盘活性因子基础研究及临床应用进展[J]. 医学研究通讯,1993,22(6):10-12.

[2] 陆晖,闫小梅,张双全. 羊胎盘活细胞素微量元素和氨基酸组成分析[J]. 南京师大学报(自然版),2001,24(1):79-82.

[3] 陈新霞,石根勇,吕中明,等. 羊胎素抗氧化作用的研究[J]. 中国生化药物杂志,2002,23(6):291-292.

[4] 李仪奎. 中药药理实验方法学[M]. 上海:海科学技术出版社,1991:155.

[5] Rittie A,Monboisse JC,Gorisse MC,et al. Malondialdehyde binding to proteins dramatically alter s fibroblast functions[J]. J Cell Physiol,2002, 191(2):227-236.

[6] 董泉洲,尚尔和,王小慧. 羊胎盘营养液的制备及其在化妆品中的应用[J]. 日用化学工业,1998,28(1):12-13.

(收稿日期:2010-02-23)

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