肺结核患者细胞免疫水平与肺功能的相关性研究

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【摘要】目的 通过对肺结核患者及健康对照者的细胞免疫水平和肺功能进行检测,观察肺结核患者不同程度的细胞免疫水平及肺功能状态,并将他们的细胞免疫水平及肺功能进行相关性分析。方法所有肺结核患者按病变程度分为重度、中度和轻度各25例。应用流式细胞仪检测75例各组肺结核患者和30例健康人群的外周血中CD4 、CD8及CD4 /CD8 值并进行比较;同时检测75例肺结核患者肺功能,进行各组别间比较，并与外周血中CD4 、CD8及CD4 /CD8 值进行相关性分析。结果 ①肺结核组与健康组比较,外周血中CD4 、CD8及CD4 /CD8 值3组数据均差异有统计学意义( P

【关键词】肺结核 T淋巴细胞亚群 CD8 T淋巴细胞 CD4 T淋巴细胞 肺功能

中图分类号：R521 文献标识码：B 文章编号：1005-0515（2011）5-060-03

The correlation study of lung function and cellular immunity in pulmonary tuberculosis patients

Li Meiqing Li DanWang Yu

The Third People’s Hospital of Yichang, Yichang,Hubei 443003, China

【Abstract】Objective To explore the correlation of lung and cellular immunity in different pulmonary tuberculosis patients. Methods The percentage of CD4, CD8 in peripheral blood of 75 pulmonary tuberculosis patients (severity 25 cases, moderate 25 cases, and mild 25 cases) and 30 health volunteer were analyzed by cytometry, meanwhile lung function of 75 pulmonary tuberculosis patients were measured. Results ①The percentage of CD4, CD8 and ratio of CD4/CD8 were significant different both between tuberculosis group and control group and among tuberculosis patients (severity, moderate, and mild) (P 0.05) ; ②FEV1, FEV1%, and MMEF% of severity and moderate tuberculosis patients were significant lower than those of mild tuberculosis patients and normal reference value; ③ In tuberculosis patients, FEV1%and MMEF% were significantly negative correlation of CD8 percentage (P

【Key words】pulmonary tuberculosis T lymphocyte subgroup CD8 T lymphocyte CD4 T lymphocyte; lung function

结核病的免疫是由T淋巴细胞所介导的细胞免疫反应。根据T淋巴细胞表面的分子不同特征可分为两个亚群,即CD4T淋巴细胞和CD8 T淋巴细胞,这两种细胞亚群的动态平衡可影响结核病的发生、发展和转归[1]。但T淋巴细胞是否与肺结核患者的肺功能之间具有相关性,目前国内外尚无报道。本实验是通过对肺结核患者及健康对照者的细胞免疫水平和肺功能进行检测,观察肺结核患者不同期别的细胞免疫水平及肺功能状态,并将其进行相关性分析。

1 资料与方法

1.1 材料 所选75例均为2007年6月至2009年6月以来我院住院患者，其中男42例，女28例。年龄17-57岁，平均年龄(37±20)岁。其诊断标准符合我国2002年肺结核诊断指南[2]：并排除严重的肺部感染、慢支、慢阻肺及全身结缔组织疾病等合并症和吸烟史，以尽可能减少其他因素对血清免疫水平和肺功能的影响。且对检测项目知情同意。

1.2 药品及试剂TR ITEST试剂、免洗溶血素均由美国BECTON D ICKINSON公司提供。

1.3 实验仪器 美国BECTON D ICKINSON公司的流式细胞仪( FACSCAL IBUR) ,由华中科技大学附属协和医院中心实验室提供; 美国产的台式(KOK0)肺功能仪,由宜昌市第三人民医院提供。

2 实验方法

2.1 研究对象分组按照以上研究对象共分四组。健康组:18～60岁的健康体检者30名; 所有肺结核患者按病变程度[3]分为重度肺结核组25例、中度肺结核组25例、轻度肺结核组25例。

2.2 临床资料的检测①外周血T淋巴细胞亚群的测定:采集实验者静脉血2 ml,乙二胺四乙酸( EDTA)抗凝,防振荡,采血后立即送检,提取淋巴细胞,将每份淋巴细胞悬液分入3支试管,应用三色荧光标记单克隆抗体CD4、CD8、工作液各20μl,分别加入上述三支用试管中,在室温下避光反应20min后, 用美国BECTON D ICKINSON 公司的流式细胞仪进行检测。用FACSMULTISET软件进行自动分析。

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肺功能测定：肺功能测定采用美国产的台式(KOK0)肺功能仪。所有试验对象肺功能包括第1秒用力呼气量、第1秒用力呼气量占预计值的百分比、最大用力呼气中段流量占预计值的百分比。

2.3 主要观察指标①肺结核组与健康组外周血T淋巴细胞亚群及肺功能比较; ②肺结核组间外周血T淋巴细胞亚群及肺功能比较;④肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群与肺功能的相关性。

2.4 统计学分析 计量数据用均值±标准差( x ±s)表示, 两组间均数差异比较采用t检验,多组间均数差异比较采用F检验, 用统计软件SPSS13.0分析处理,相关性处理采用直线相关分析。

3实验结果

3.1 肺结核组与健康组比较, 肺结核患者的细胞免疫水平及肺功能主要指标明显下降。详见表1。

3.2 肺结核患者各组间外周血CD4、CD8及CD4 /CD8 均值的比较随着肺结核严重程度的增加, CD4 百分数逐渐下降, CD8 百分数逐渐升高, CD4 /CD8 比值也逐渐降低。3个组别间比较,外周血中CD4 、CD8及CD4 /CD8 值3组数据均有差异统计学意义( P 0.05) 。

3.3肺结核患者FEV1 %、MMEF%与CD8 细胞百分比呈显著负相关( P < 0.05) ,与CD4 细胞百分比和CD4 /CD8 比值呈显著正相关( P < 0.05) 见表3。

表3肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群与肺功能的相关性(r)

4 讨论

肺结核主要的免疫保护机制是细胞免疫,在结核病免疫中起着重要作用[4]。T淋巴细胞是一个不均一的群体,存在许多功能和分化。抗原方面均不相同的亚群,通过分泌特殊的细胞因子,影响细胞介导免疫,调节体液免疫应答。淋巴细胞按其表面标志和功能不同,分为CD4 和CD8 两大亚群[5]。

CD4 淋巴细胞亚群中主要有迟发型超敏反应淋巴细胞和诱导辅淋巴细胞; CD8 淋巴细胞亚群中包括抑制性淋巴细胞和杀伤性淋巴细胞。据报道结核分枝杆菌可在单核吞噬细胞中生活,持续损伤和对抗巨噬细胞作用,CD+4 使T 细胞不断活化单核吞噬细胞获得免疫性,CD+8使T 细胞通过细胞毒作用特异性杀伤感染病原体的靶细胞和体内突变的细胞。因此,CD+4 和CD+8 T 细胞协同介导了机体抗结核分枝菌的保护性免疫[6]。

CD+8T细胞也是一异质性细胞群,参与抗结核免疫的主要有细胞毒T细胞和抑制性T细胞两类, T细胞介导的抗结核性保护性免疫反应是由CD+4T细胞活化巨噬细胞抗菌活性和由CD+8细胞毒T细胞以及CD+4溶解T细胞溶解或凋亡菌过载巨噬细胞等反应共同完成的。本实验通过对肺结核组与健康组外周血T淋巴细胞亚群检测,发现肺结核组的CD4百分数较健康组明显下降, CD8百分数较健康组明显上升, CD4 /CD8 比值较健康组明显下降,证明肺结核患者的细胞免疫水平明显下降。同时对不同期别肺结核患者外周血CD4、CD8及CD4 /CD8 均值的比较,发现随着肺结核严重程度的增加, CD4百分数逐渐下降, CD8 百分数逐渐升高, CD4 /CD8 比值也逐渐降低,且以上3组间变化差异有统计学意义，与文献报道一致[7-8]。

肺结核使肺通气换气功能受到严重损害,肺功能测定是评价肺患者肺功能损害和代偿功能分级的基本依据。在肺功能的各项指标中FEV1、FEV1 %、MMEF%均是反映通气功能情况的主要指标, FEV1 > 80%预计值为正常,正常FEV1 % > 80%， MMEF%> 80%。本实验通过对不同程度肺结核患者组间肺功能的比较,发现轻度肺结核组中FEV1、FEV1 %、MMEF%均在正常范围,提示气道通气功能正常,而中度肺结核组和重度肺结核组中FEV1、FEV1 % 、MMEF%明显低于正常值范围,并且与轻度肺结核组比较差异有统计学意义( P < 0.05) , 中度肺结核组和重度肺结核组间以上数值差异无统计学意义( P > 0.05 )，以上结果提示肺结核患者可能存在随着严重程度的增加肺功能的各项指标均有下降趋势,虽然本次实验中中度肺结核组和重度肺结核组间差异不明显,可能与样本量少有关。

结合以上数据,我们将肺结核患者外周血T淋巴细胞亚群与肺功能进行相关性分析, FEV1 %、MMEF%与CD8 细胞百分比呈显著负相关( P < 0.01) ,与CD4 细胞百分比和CD4 /CD8 比值呈显著正相关( P < 0.01)。结合以上分析,提示细胞免疫对肺结核肺通气换气功能有一定的影响。

国内外学者对肺结核患者的免疫细胞的变化进行了大量研究, 但对免疫细胞与肺功能关系的研究却未见报道。本研究结果显示,肺结核患者存在细胞免疫功能降低的改变,并可能影响其患者的肺功能。临床上治疗肺结核时,通过联合应用免疫增强剂治疗,提高肺结核患者的细胞免疫水平,有可能提高肺结核治疗的疗效,同时可提高肺结核患者的肺功能。其中具体机制有待深入研究。

参考文献

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[5] Janeway, Charles A, et al. [J] Immunobiology Shlomchik. GarlandScience, 2005.6(4):162-168.

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[8] 费晓峰,吴建鸿. 肺结核患者血清中IAP和T淋巴细胞亚群关系的研究[J]中国防痨杂志, 2003, (06) 245-247.

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