p53蛋白表达在直肠肿瘤中病理意义

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[摘要] 目的 研究p53蛋白在结直肠肿瘤中的表达及病理意义。 方法 采用免疫组织化学法检测p53在33例结直肠绒毛状腺癌、32例绒毛状腺瘤、15例非肿瘤黏膜组织中的表达。 结果 p53在结直肠绒毛状腺癌、绒毛状腺瘤、非肿瘤黏膜的阳性表达率分别为：75.7%（25/33）、59.4%（19/32）、13.3%（2/15）。p53蛋白表达强度：结直肠绒毛状腺癌＞绒毛状腺瘤＞非肿瘤黏膜（■从大至小），其中结直肠绒毛状腺癌和绒毛状腺瘤的95%可信限下界均高于非肿瘤的上界，差异有统计学意义。 结论 p53基因突变及其产物p53蛋白的检测，用于早期发现结直肠腺癌具有重要的病理诊断意义。

[关键词] p53；结直肠肿瘤；免疫组化；蛋白

[中图分类号] R735.3+7 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2012）07（b）-0118-02

Pathological significance of p53 protein expression in rectal cancer

LI Jinmiao ZHOU Guitai

Pathology Department of Tongcheng People′s Hospital in Hubei Province, Tongcheng 437400, China

[Abstract] Objective To study the pathological significance of p53 protein expression in rectal cancer. Methods Immunohistochemical techniques were used to detect the expression of p53 protein in 33 cases of colorectal papillary adenoma, 32 cases of villous adenoma and 15 cases of non-tumor mucosa tissue. Results The ratios of positive expression of p53 protein in colorectal papillary adenoma, villous adenoma and non-tumor mucosa were 75.7% (25/33), 59.4% (19/32) and 13.3% (2/15), respectively. The intensity order of the expression of p53 protein was colorectal papillary adenocarcinoma > villous adenomas > non-tumor mucosa (R from big to small). The lower limits of 95% confidence interval of R values in both colorectal papillary adenoma and villous adenoma were higher than the upper limit in non-tumor mucosa, and there were significant differences. Conclusion The detections of p53 gene mutation and p53 protein contribute to pathological diagnosis of early colorectal adenocarcinoma.

[Key words] p53; Colorectal neoplasms; Immunohistochemistry; Protein

自20世纪80年代中期以来，抑癌基因的重要作用得到了广泛研究和深入探讨。p53是大肠癌发生中最常变化的基因[1]，本文对p53蛋白在直肠肿瘤中的表达情况进行研究，以期进一步揭示p53蛋白在直肠肿瘤发生发展中的作用及意义。

1资料与方法

1.1 一般资料

收集通城县人民医院病理科2006～2011年手术及肠镜活检的部分标本，其中，结直肠绒毛状腺癌33例、结直肠绒毛状腺瘤32例，非肿瘤性黏膜15例，所有患者术前均未作放疗、化疗及免疫治疗。

1.2 免疫组化染色及方法

1.2.1 p53单克隆抗体，S-P免疫组化试剂盒均购自福州迈新公司。

1.2.2 组织化学检测：采用S-P(streptavidin-perosidase，链霉菌亲和素-过氧化物酶)免疫组化方法。步骤：（1）石蜡切片4 μm厚，常规脱蜡水化后，用PBS（即磷酸缓冲液）（pH=7.4）冲洗3次，每次5 min；（2）加50 μL过氧化酶阻断溶液，室温下孵育10 min；（3）PBS（pH=7.4）冲洗3次，每次5 min；（4）加50 μL非免疫动物血清，室温下孵育5 min，PBS冲洗一次；（5）加50 μL第一抗体，室温下孵育60 min；（6）PBS（pH=7.4）冲洗3次；（7）加生物素标记的第二抗体，室温下孵育10 min；（8）PBS（pH=7.4）冲洗3次，每次5 min；（9）加50 μL链亲和素-过氧化酶溶液，室温下孵育10 min；（10）PBS（pH=7.4）冲洗3次，每次5 min；（11）加2滴新鲜配制的DAB溶液显色；（12）自来水冲洗，苏木素复染，中性树胶封固。用PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.3 p53染色结果的判定

细胞核内出现棕黄色颗粒为染色阳性，认为p53阳性。如果非肿瘤细胞或核周围着色，不认为p53阳性。当少于10%的肿瘤细胞着色时，认为免疫组化结果阴性；当超过10%的肿瘤细胞着色时，认为免疫组化阳性。