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【摘要】 目的:研究抗survivin抗体和nse在不同临床分期肺癌血清中的表达及关系,以此来探讨抗Survivin抗体和NSE在肺癌诊断中的临床意义。方法 收集确诊肺癌血清标本55例,其中早期肺癌25例,中晚期肺癌30例;肺良性病变血清标本20例。全部标本的检测使用人抗Survivin抗体/生存蛋白(Surv Ab)酶联免疫分析试剂盒,酶联免疫吸附双抗体夹心法测定人血清中抗Survivin抗体的含量;NSE酶联免疫分析试剂盒,酶联免疫吸附双抗体夹心法测定人血清中NSE的含量。结果 肺癌组血清中抗Survivin抗体阳性率38.2(21/55), 明显高于肺良性病变组5.0(1/20)(P
【关键词】 不同临床分期;肺癌血清;抗Survivin抗体;NSE;联合检测
【中国分类号】 R236.4【文献标识码】 A【文章编号】 1044-5511(2012)02-0069-01
Survivin是新近发现的一种新的凋亡抑制蛋白(IAP),又叫生存素,1997年Ambrosini[1]等利用效应细胞蛋白酶受体1(EPR-1)cDNA在人基因组织库中筛选克隆出Survivin基因[2],Survivin蛋白的组织分布特征有明显的细胞选择性[3],它表达于胚胎和发育的胎儿组织,不见于终末分化的正常成人组织(胸腺和生殖腺除外),但在体内的分化组织、人类大多数肿瘤组织内有Survivin蛋白的表达[4,5]。该蛋白可被自身固有T细胞所识别,具有抗原性,血清中其抗体称为抗Survivin抗体[6]。神经元特异性烯醇化酶(Neuron Specific Enolase,NSE)[7]又称磷酸烯醇化酶,糖酵解途径中的关建梅,作用是催化2-磷酸甘油酸生成磷酸烯醇化式丙酮。它存在于神经组织和神经内分泌系统,当这些部位肿瘤时,NSE升高。目前,国内外在肺癌血清中联合检测抗Survivin抗体和NSE的研究尚少,以下来探讨其在不同临床分期肺癌血清中表达的意义及之间关系。
1 资料与方法
1.1一般资料:55例确诊肺癌血清标本,其中早期肺癌25例,中晚期肺癌30例;肺良性病变血清标本20例。
1.2实验试剂:人抗Surviivn抗体/生存蛋白(SurvAb)酶联免疫吸附试剂盒,NSE酶联免疫吸附试剂盒。
1.3检测方法:血清抗Survivin抗体浓度和NSE浓度测定采用ELISA法,严格按说明书实验步骤操作,450nm光波检测吸光度。
1.4 浓度计算:计算以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值,由标准曲线查出相应浓度,再乘以稀释倍数;或用标准的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程,将样品的OD值代入方程式,计算出样品的浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
1.5统计学分析:应用SPSS 17.0统计软件,计量资料以+s表示,采用t检验,计数资料采用X2检验,P
2 结果
2.1 表1抗Survivin抗体和NSE在不同临床分期肺癌血清中检测的结果
①与肺良性病变相比P
2.2 表2抗Survivin抗体和NSE不同临床分期肺癌血清中表达的阳性率
①与肺良性病变相比P0.05,③与早期肺癌组相比P
3 讨论
目前,Survivin的基因表达情况可以通过分子生物学、免疫组化、血清抗Survivin抗体等多种方法检测,但前两种方法由于操作复杂繁琐,不易在临床上推广,而血清学方法由于具有操作简单,重复性好,不需要蜡块等优点,在临床上已见报道。2000年Rohayem等首先报道了用ELISA法检测肺癌患者血清中的抗Survivin抗体,肺癌患者5l例,在其实验中,肺癌患者抗Survivin抗体阳性,阳性率为21.6%(11/51)。并且发现抗Survivin抗体在肺癌患者中有相当高的流行率,令人感兴趣的是在肺癌的细胞株中Survivin的表达水平较高。因此Survivin可以被认为是一种肺部肿瘤抗原。以高于对照组均值2个标准差作为肺癌抗体阳性的诊断标准。我们在本实验中,收集了55例肺癌患者血清,肺良性病变血清标本20例,早期与中晚期肺癌临床分类参照UICC97TNM标准。用酶联免疫吸附双抗体夹心法检测其血清中的抗Survivin抗体,其阳性率为38.2%(21/55),明显高于肺良性病变组5.0(1/20)(P
ELISA法检测血清中NSE有较高的灵敏性、特异性和准确度,从CARNEY等人首先将血清NSE用于小细胞肺癌的诊断以来,血清NSE测定是诊断SCLC的首选肿瘤标志物,但非小细胞肺癌NSE也表达。本实验中NSE在肺癌血清中阳性率36.4(20/55), 肺良性病变血清标本阳性率10.0(2/20),明显高于肺良性病变组(P
综述,抗Survivin抗体和NSE对中晚期肺癌诊断更有意义,对早期肺癌诊断也有一定意义,联合检测可以提高肺癌诊断的敏感性,对指导肺癌临床分期有一定意义;抗Survivin抗体与NSE在肺癌血清表达中没有相关性(P>0.05)。
参考文献
[1] Ambrosini G,Adida C,Sirugo G,et al.Induction of apoptosis and inhibition of cell proliferation by survivin gene targeting.Biol Chem,1998,273:11177-11182.
[2] Ambrosini G,Adida C,Altieri DC.A novel antiapoptosis gene,survivin,expressed in cancer and lymphoma.Nat Med,1997,3:917-921.
[3] Suzuki A,Ito T,Kawano H,et al.Survivin initiates procaspase 3/p21 complex formation as a result of interaction with Cdk4 to resist Fas mediated cell death.Oncogene,2000,19:1346-1353.
[4] Takahashi R,Deveraux Q,Tamm I,et al.A single BIR domain of XIAP sufficient for inhibiting caspases.Biol Chem,1998,273:7787-7790.
[5] Schmitz M,Diestelkoetter P,Weigle B,et al.Generation of survivinspecific CD8+ T effector cells by dendritic cells pulsed with protein or selected peptides.Cancer Res,2000,60:4845-4849.
[6] Rohayem J,Diestelkoetter P,Weigle B,et al.Antibody response to the tumor associated inhibitor of apoptosis protein survivin in cancer patients.Cancer Res,2000,60:1815-1817.
[7] 刘晨梅,侯敏,张连祥,等.肺癌患者血清和胸水中肿瘤标志物联合检测的意义[J].临床检验杂志,2005,23(2):150-151.
作者简介:王献(1982-),男,河南安阳人,在读硕士研究生,从事胸外科临床工作。