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[摘要] 目的:观察枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位对小鼠血管活性因子的影响。方法:小鼠给药10 d后,取血分离血浆,按照试剂盒说明采用酶联免疫法测定血栓素A2(TXA2)、前列腺素I2(PGI2)、组织型纤维溶酶激活物(t-PA)和内皮素1(ET-1)的含量。结果:给予枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位后,小鼠血浆TXA2的含量均降低,与空白组[(268.870±42.257)μg/L]相比,挥发油大剂量组[(224.258±35.479)μg/L、]中剂量组[(232.484±29.138)μg/L]比较,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),挥发油小剂量组[(244.645±36.687)μg/L]差异有统计学意义(P<0.05),而枫香脂乙酸乙酯部位差异均无统计学意义;血浆PGI2含量均升高,与空白组[(107.850±12.264)μg/L]比较,挥发油大剂量组[(117.900±6.676)μg/L]、中剂量组[(116.167±6.284)μg/L]差异有统计学意义(均P<0.05),而挥发油小剂量组和乙酸乙酯部位各剂量组均无统计学意义;血浆t-PA含量均降低,与空白组[(1 968.400±229.873)μg/L]比较,乙酸乙酯部位组大剂量组[(1 647.200±141.717)μg/L]、中剂量组[(1 748.000±198.017)μg/L]、小剂量组[(1 550.800±152.062)μg/L]差异均有统计学意义(均P<0.05),而枫香脂挥发油各剂量组均无统计学意义;血浆ET-1的含量均降低,但与空白组[(716.147±52.137)μg/L]比较,只有挥发油大剂量组[(665.321±32.012)μg/L]差异有统计学意义(P<0.05),而其他各剂量组均无统计学意义。结论:枫香脂“活血化瘀”功效可能与枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位对血管活性因子的调节作用有关,具体机制可能与改善血管内皮功能有一定联系,但有待进一步深入研究。
[关键词] 枫香脂;挥发油;血管活性因子;乙酸乙酯
[中图分类号] R931.6 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2011)12(a)-037-03
Effect of essential oil and ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris on vascular active factor of normal mice
CHENG Zaixing, CHEN Weilin, CHEN Xicheng, LIN Dan, CHEN Hong
College of Pharmacy, Fujian University of TCM, Fujian Province, Fuzhou 350108, China
[Abstract] Objective: To observe the effect of essential oil and ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris on vascular active factor of normal mice. Methods: The blood plasma was separated, then the contents of TXA2, PGI2, t-PA and ET were determined by using the enzyme-linked immunosorbent assay after normal mice were administered with essential oil and ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris within 10 days. Results: After normal mice were administered with the essential oil and the ethyl acetate extract of Resina Liquidambaris, the content of TXA2 in plasma of mice was decreased, with the remarkably significant difference (all P
[Key words] Resina Liquidambaris; Essential oil; Vascular active factor; Ethyl acetate
枫香脂为金缕梅科植物枫香树Liquidambar formosana Hance的干燥树脂,始载于《唐本草》,《中国药典》自1977年版开始收载。该药性味辛、苦、平,归脾、肺、肝经,有活血止痛、解毒、生肌、凉血之功效,用于吐血、咯血、衄血、金疮出血、一切痛疽疮毒及牙痛等症,在闽南地区有用枫香树皮炖肉食用预防和治疗寒湿痹症的传统。研究表明[1-3],枫香脂可能含有萜类、黄酮类、酚酸类、苯丙素类、挥发油等化学成分,有扩张冠状动脉和血管、增加血流量、抗心肌缺氧、改善血液流变性、抗凝血、抗血栓形成和血小板聚集等药理作用。但目前关于枫香脂“活血化瘀”的主要物质基础及作用机制的研究很少进行,为了进一步对枫香脂进行精制,提高其临床利用效果,本次实验研究其挥发油和乙酸乙酯提取部位对正常小鼠血管活性因子的影响,现报道如下:
1 仪器与试药
1.1 药物与试剂
枫香脂(购自福建莆田,经由福建中医药大学药学院鉴定教研室主任杨成梓副教授鉴定为金缕梅科植物枫香树Liquidambar formosana Hance的干燥树脂)、吐温-80(上海联试化工试剂有限公司,批号:20091027)、乙酸乙酯(上海久亿化学试剂有限公司,分析纯)、小鼠前列环素(PGI2)酶联免疫分析试剂盒、小鼠血栓素A2(TXA2)酶联免疫分析试剂盒、小鼠组织型纤维溶酶激活物(t-PA)酶联免疫分析试剂盒、小鼠内皮素1(ET-1)酶联免疫分析试剂盒(均购自上海劲马生物科技有限公司)。
1.2 实验动物
昆明种小鼠,雌雄各半,体重18~22 g,清洁级,购于上海斯莱克,饲养于福建中医药大学实验动物中心。
1.3 实验仪器
Model 680型酶标仪(Bio-Rad)、PYX-DHS-40X50-BS-Ⅱ恒温水浴培养箱(上海跃进医疗器械厂)、TDL-50B离心机(上海安亭科学仪器厂)等。
2 方法与结果
2.1 实验方法
将70只昆明小鼠随机分为7组:空白组、挥发油大剂量组、挥发油中剂量组、挥发油小剂量组、乙酸乙酯部位大剂量组、乙酸乙酯部位中剂量组、乙酸乙酯部位小剂量组,每组各10只,分别灌服5%吐温-80液,枫香脂挥发油(用5%吐温-80配制)4.00、2.00、1.00 ml/kg,枫香脂乙酸乙酯提取部位(用5%吐温-80配制)0.40、0.20、0.10 g/kg,灌胃体积为0.2 ml/10 g,每日灌胃1次。于灌胃第10天,给药2 h后眼球取血,分离血浆,按照试剂盒说明采用酶联免疫法测定TXA2、PGI2、t-PA和ET-1等。
2.2 统计学方法
数据分析采用SPSS 11.5 for windows统计软件,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,采用t检验。计数资料以率表示,采用χ2检验。组间比较用单因素方差分析。以P
2.3 实验结果
眼球取血,1%肝素抗凝,3 000 r/min离心,分离血浆,按照试剂盒说明采用酶联免疫法测定TXA2、PGI2、t-PA和ET-1的含量。结果显示,给予枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位后,小鼠血浆ET的含量均降低,但与空白组相比,只有挥发油大剂量组有统计学意义(P<0.05);血浆TXA2的含量也均降低,与空白组相比,挥发油大、中剂量组有高度统计学意义(P<0.01),挥发油小剂量组有统计学意义(P<0.05);血浆PGI2含量均升高,与空白组相比,挥发油大、中剂量组有统计学意义(P<0.05);血浆t-PA含量均降低,与空白组相比,乙酸乙酯部位组大、中、小剂量组均有统计学意义(P<0.05);血浆ET-1的含量均降低,但与空白组相比,只有挥发油大剂量组有统计学意义(P<0.05)。见表1。
3 讨论
血管活性因子对血管张力、凝血、纤溶的作用分为正性和负性、促进和拮抗两方面。在生理情况下,由于神经、体液和局部的正负反馈机制的内在调节,维持着两者的平衡。其中TXA2和PGI2均是花生四烯酸的主要代谢产物,TXA2主要功能为促进血管收缩和血小板聚集,PGI2主要功能为抗血小板聚集,舒张血管,尤其可使微血管舒张、局部血流量增加。PGI2和TXA2的平衡是维持正常血小板功能、血管张力以及保护内皮细胞免受损伤的重要环节,血浆TXA2/PGI2比例失调在微血管病变中起重要作用[4-5]。纤溶酶原激活系统是体内防止血栓形成的重要机制,其中心环节是PA系统将纤溶酶原转化成纤溶酶从而发挥纤溶作用。t-PA是人体血液中存在的两种纤溶酶原活化剂之一,对纤维蛋白有很强的亲和力,能在纤维蛋白上激活纤溶酶原。t-PA抗原浓度升高常常意味着其活性下降,也可造成一种血栓前高凝状态[6-7]。ET-1具有强大的收缩血管作用,可调节局部血管的紧张度,参与血压的调节;促进血管平滑肌细胞的增殖,调节心脏的内分泌和代谢功能[8-9]。现代研究认为,血瘀证病理改变与血管活性因子密切相关,血管内皮细胞合成多种血管活性物质,从小分子气体的一氧化氮(NO)到肽类大分子ET-1与缓激肽,对血管的舒缩功能与血液的流动性有不可替代的调节作用,对维持正常血液循环有重要的生理意义。
本次实验结果表明,枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位可以通过调节血管活性因子在体内的分泌,即减少缩血管物质ET-1、TXA2的分泌,促进扩血管成分PGI2的分泌,调节两者之间的比例,还能够降低t-PA的浓度,促进其活性升高,从而达到改善小鼠血流状态的作用等。因此,枫香脂“活血化瘀”功效与枫香脂挥发油和乙酸乙酯部位对血管活性因子的调节作用有关,具体机制可能与改善血管内皮功能有一定联系,但有待进一步深入研究。本次研究将为进一步研究枫香脂在心血管疾病、类风湿性关节炎等方面的药理作用及其活性物质奠定基础。
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(收稿日期:2011-06-28)