235U/238U'> 电感耦合等离子体质谱法分析小鼠组织中以及和DNA结合的贫铀浓度与235U/238U
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇235U/238U'> 电感耦合等离子体质谱法分析小鼠组织中以及和DNA结合的贫铀浓度与235U/238U范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
1 引 言
贫铀（Depleted uranium， DU）是天然铀提取235U之后的副产品，具有化学毒性和放射性[1]。进入体内的DU可以迁移、蓄积于人和动物组织中，形成永久性辐射源，对组织造成损伤[2]。体内的DU多以铀酰离子（UO2+2）的形式存在，与体液中酸反应，形成可透过生物膜的络合物，与dna结合造成DNA的断裂损伤[3]，引起基因突变，甚至致癌[4]。生物样本中的DU含量通常非常低。目前，测定铀含量的方法有能谱法[5]、中子活化法、激光荧光分析法[6]、γ谱法和原子吸收光谱（AAS）等。这些方法存在样品制备复杂、核素易损失和基体干扰严重等不足，不能满足生物样品中痕量元素的测定。电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）因其具有定量准确、检测快、灵敏度高、可进行多元素测定和同位素比值分析等优势，已应用于临床医学、生物医药和法医学等领域[7～9]，但是在分子生物学水平上应用ICP-MS进行痕量分析鲜有报道。
金属元素与生物大分子DNA的结合，是进行生物机能调节的关键因素，特别是在一些病理状态下， 一些具有放射性或化学毒性的元素与DNA发生结合、相互作用，引起分子结构改变、断裂和功能丧失等，这些损伤的严重程度与其结合毒性元素的量密切相关。通常的样品预处理过程可能引起DNA分子的构象和性质发生改变，结合的金属元素发生解离，无法与未结合元素进行区分，因此检测结果很难反映出真正作用于DNA分子的元素的量。本研究在对DNA进行提取、纯化的基础上，采用透析法消除了未结合元素的干扰，并将DNA溶于中性稀释剂中，尽可能保证DNA结构的稳定性，以此溶液进行检测，检测结果最大程度上体现了铀元素与DNA分子的结合程度，有助于进一步探讨DU与DNA的相互作用。DU中的235U的含量远低于天然铀，其放射性比活度也大大降低（
2.1 仪器与材料
7500ce型电感耦合等离子体质谱（ICP-MS，美国Agilent公司）； MARS5型微波消解系统（美国CEM公司）； Smart SpecTM Plus紫外分光光度计（美国BIO-RAD公司）；100 kD透析袋（美国Spectrum公司）。
贫铀屑（235U/238U=0.00431，核工业总公司）；铂标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心）；铀元素标准溶液（美国Agilent公司，235U/238U=0.00725）；组织基因组DNA提取试剂盒（北京原平皓）；10%水合氯醛；去离子水（≥18.2 MΩ·cm），其余试剂均为色谱纯。
清洁级，雄性BALB/c小鼠50只（体重18～22 g，军事医学科学院实验动物中心提供），温度：（22±2）℃，湿度：50%～65%，常规饲养。
2.2 实验方法
2.2.1 贫铀溶液的制备[10]取适量DU屑，加入少量浓HNO3加热溶解，用Na2CO3调至pH 7.0，用水稀释成铀浓度为40 mg/L的DU溶液，于4 ℃保存备用。吸取0.5 mL HNO3于10 mL去离子水中，用Na2CO3调至pH 7.0，去离子水定容至50 mL，制成对照组空白注射溶液，4 ℃保存备用。