一例猪流行性腹泻和猪繁殖与呼吸综合征猪圆环病毒2型混合感染的诊断

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摘 要：为诊断贵州省都匀市某猪场送检病料的感染类型，调查了其流行病学、临床症状和病理剖检特征，并采用多重PCR检测技术对其进行检测。结果表明，该猪场存在猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒2型及猪繁殖与呼吸综合征病毒的混合感染。

关键词：猪流行性腹泻病毒；猪圆环病毒2型；猪繁殖与呼吸综合征病毒

中图分类号：S852 文献标识码：A

引起猪腹泻疾的病因很多，其中猪流行性腹泻（PED）和猪传染性胃肠炎（TGE）引起的经济损失较为严重。猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒（PEDV）引起的一种猪的急性肠道感染传染病，主要表现为发热、厌食、呕吐、腹泻以及脱水等症状，各年龄段的猪对本病均易感染，其中对哺乳仔猪危害最严重，致死率高[2]；猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪的一种高度接触性传染病。

现今规模化猪场中多病原体混合感染越发普遍，据李春花等调查研究发现断奶前仔猪感染猪圆环病毒2型能够显著影响PEDV所引起的临床症状[4]，因此在诊断猪腹泻疾病的同时应注意诊断其他病原体的感染，才能更好的防治本病。本次检测通过的TGEV和PEDV多重RT-PCR方法对贵阳市某猪场疑似感染TGE或PED的病料进行了病毒核酸检测，并同时用已建立的猪伪狂犬病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪瘟病毒（CFSV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的多重PCR方法对其进行检测，确诊该猪场为PEDV、 PCV2和PRRSV的混合感染，现将结果报道如下。

1 发病情况和临诊症状

贵州省都匀市某猪场有存栏母猪约580头、总存栏猪3800多头。自2013年3月以来，大量仔猪4日龄左右出现水样腹泻，其中个别仔猪有呕吐症状，仔猪死亡率高达60%，常单窝整窝发病；母猪正常。

2 解剖病理变化

解剖后病理变化主见于肺脏、肾脏、肠道。其中肺脏主要呈现不同程度的间质性肺炎，肺表面可见明显的出血斑、部分肺组织发生实变；肾脏可见出血斑或密布点状出血，且失去原有形态而呈凹凸不规则状；胃内有大量未消化的凝乳块，十二指肠及空肠胀气、壁变薄呈透明状，肠系膜充血，肠系膜及腹股沟淋巴结肿大、出血呈深褐色。

3 实验室PCR诊断

应用建立的TGEV和PEDV多重RT-PCR以及PRV、PCV2、HCV和PRRSV的多重PCR检测技术，对送检病料进行快速检测。在TGEV和PEDV多重RT-PCR扩增出了669bp左右大小的特异性条带。与所预期的PEDV目的条带大小相符，无TGEV的相应条带；在PRV、PCV2、HCV和PRRSV的多重PCR扩增出了353bp和603bp左右大小的特异性条带，与所预期的PCV2和PRRSV的目的条带大小相符，无PRV和HCV的相应条带（见图1）。

4 防治措施

鉴于上述病毒性疫病使用抗生素和化学抗病毒药治疗基本无效，其防治重在饲养管理、疫苗注射、和增强猪自身免疫力等方面。

全场加强隔离和消毒，对外来车辆和人员进行严格消毒，防止交叉污染，对猪群的粪便应加强管理，可进行生物热发酵消毒，减少病毒传播，切断传播途径。同时，应注意加强猪舍的保温措施，保持猪舍干燥，可减少该病的发生。

提供标准的的配合饲料，确保各阶段年龄生长猪的营养需要，从而使猪体免疫系统正常，能够有利于猪体抵抗外来病原体的感染。因此，在该猪场饮水中加入补液盐和电解多维，以防仔猪脱水衰竭；同时，可加入长效土霉素或氟哌酸，以防止继发细菌感染。严禁饲喂发霉变质的饲料，饲料中的霉菌毒素是引发猪皮炎与肾炎综合征的主要原因之一[1]。

该猪场全场紧急接种猪传染性胃肠炎与猪流行性腹泻二联弱毒苗。母猪应加强PRRSV、PCV2等疫苗的免疫接种，同时注意监测疫苗免疫效果。

5 小结

结合临床症状、病料剖解及病原学检测结果，综合分析认为送检仔猪可能系因其在母体内已感染PRRSV、PCV2，致使肺脏、肾脏病变，出生后感染PEDV野毒，致使原本亚健康状态的仔猪经2～3d潜伏感染后，在4日龄左右出现严重腹泻，在共病因的作用下导致死亡率极高。

随着规模化猪场的发展，密集型饲养方式及猪群的跨区域流通导致猪群之间接触的几率增大，加快了疾病的传播，导致患病猪群出现混合感染现象。因此，在疫病的核酸诊断领域之中，多重PCR具有广泛深入的研究及应用，它具有特异性强、灵敏度高、检测时间短、成本低等优点[2]，而且同时能诊断多种病原，不仅减少了检测的经济成本，而且能够缩短检测的时间，为猪场的防控争取宝贵的时间。

参考文献

[1] 王东方，崔保安，陈红英，等. 猪圆环病毒病的PCR诊断与防制[J]. 中国畜牧兽医，2008（1）： 90-91.

[2] 刘志杰，曾智勇，汤德元，等. 猪繁殖障碍病毒性疫病六重PCR检测方法的建立及应用[J].畜牧兽医学报，2012（9）： 1429-1436.