酸碱度对人参皂苷提取率及其稳定性影响分析
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【摘要】 目的 考察酸碱度对人参皂苷浸渍提取及其稳定性的影响。方法 采用高效液相色谱法测定人参皂苷总含量，以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量为考察指标，选用不同酸碱度的乙醇浸渍提取法提取人参皂苷，在加速与常温条件下考察人参皂苷稳定性。结果 乙醇pH值为8.7时，人参皂苷提取率最高；人参制剂最稳定的pH值为5.8。结论 调节提取溶剂及制剂的酸碱度，可有效提高人参皂苷的稳定性。
【关键词】 人参皂苷；酸碱度；糖浆剂；浸渍提取
人参为五加科植物人参(Panax ginsenC.A.Mey)的干燥根，具有大补元气，固脱生津，安神的功效。近代医学研究表明［1，2］，人参可促进大脑对能量物质的利用，可以提高学习记忆能力，增强机体的免疫功能，且具有抗肿瘤，抗氧化等多种功能。人参的有效成份是人参皂苷，药理研究证明某些人参皂苷具有抗癌、抗心律失常等活性。
目前中药材提取方法多为水煎法［3］。但人参皂苷具有热不稳定，在高温中极易被破坏的性质，水煎法提取效率最低［4］，在乙醇溶液中有较好的溶解性，因此，采用乙醇溶液作为提取溶剂，能提高人参皂苷的提取率、确保药效。
因为人参皂苷Rb1在强酸和强碱条件下水解，人参总皂苷有明显减少。因此本试验着重考察浸渍法中溶剂酸碱度以及人参液体制剂的酸碱度，对人参皂苷提取率及稳定性的影响。
1 仪器与试药
粉碎机(贝利)；U3000高效液相色谱仪(美国戴安)；人参(电白县明康医药有限公司，ZG100601)，经众生药业检验室检验为Panax ginseng C. A. Mey.；人参皂苷Rg1对照品与人参皂苷Re对照品(中国药品生物制品检定所)；
D101型大孔吸附树脂(安徽三星树脂科技有限公司)；乙腈为色谱纯，乙醇、甲醇、磷酸均为分析纯，水为纯化水。
2 方法与结果
2.1 不同酸碱度溶剂浸渍提取人参皂苷
根据提取预试验结果，以浸渍乙醇溶液酸碱为试验因素(A)，选pH值为6.7、7.7、8.7、9.7的乙醇溶液进行浸渍提取试验。取人参120 g，打成中粉，加12倍量已用枸橼酸/NaOH调好酸碱度的30%乙醇溶液浸渍提取72 h，浸渍液滤过；药渣再加12倍量已调好酸碱度的30%乙醇溶液浸渍提取48 h，滤过；合并两次滤液，浓缩至720 ml，加水至1200 ml水沉4 h，滤过，滤液平分三份，至1000 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，精密移取本品溶液25 ml，加水50 ml，摇匀，通过D101型大孔树脂(内径1.5 cm，长15 cm)，用水250 ml洗脱，弃去水洗脱液，继用95%乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液75 ml，蒸干，残渣加甲醇溶解并移至5 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，用微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。
2.2 人参皂苷含量测定
参照文献［5］,采用高效液相测定法。
色谱条件及系统适用性试验：用十八烷基键合相硅胶为填充剂，流动相：乙腈0.05%磷酸溶液(20:80)，流速：1 ml/min;柱温：25℃，检测波长：203nm，理论塔板数安人参皂苷Re计算应不低于2500。
对照品溶液配制：精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Re对照品适量，分别加甲醇制成每1 ml中含0.4 mg、0.2 mg的溶液，即得。
测定法：分别精密吸取上述两种对照品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2.3 浸渍提取试验结果
试验以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re总含量为考察指标，制剂中的人参皂苷含量结果见表1。
试验制剂人参皂苷含量(μg/ml,%)
试验号浸渍乙醇酸碱度制剂人参皂苷含量(以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re总含量计)(μg/ml)平均(μg/ml)RSD(%)
116.72862822.1
126.7278
217.73053081.7
227.7312
318.73363401.7
328.7344
419.73073111.9
429.7315
2.4 人参皂苷稳定性试验
根据提取试验结果，选择最佳浸渍酸碱度(pH=8.7)提取、制备人参液体制剂，再平分为4份，将制剂的pH值用枸橼酸调为3.8、4.8、5.8、6.8。按药典
稳定性试验指导原则，以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re总含量，制剂的pH值为考查指标，分别进行加速试验［温度为(40±2)℃，相对湿度为(75±5)%］与长期试验(温度为25±2℃，相对湿度为60±10%)考察。
试验样品加速稳定性考察结果(μg/mg,pH)
试验号
0个月1个月2个月3个月6个月
μg/mlpHμg/mlpHμg/mlpHμg/mlpHμg/mlpH
13313.8603.20203.1393.0303.01
23314.82514.752064.701544.651024.60
33315.82665.602255.501715.381365.31
43316.82566.542156.251625.881085.60
试验样品长期稳定性考察结果
试验号
0个月3个月6个月9个月12个月
μg/mlpHμg/mlpHμg/mlpHμg/mlpHμg/mlpH
13313.82443.561483.37843.17183.01
23314.82954.762584.702294.642044.57
33315.83015.732725.652455.572405.46
43316.82986.702666.592396.352136.20
3 结果与讨论
3.1 采用浸渍法提取人参皂苷，以乙醇作为提取溶剂，选择不同乙醇酸碱度进行提取，结果pH值在8.7时，人参皂苷Rg1与人参皂苷Re的提取率最高。
3.2 人参液体制剂产品多为偏酸性，考虑液体制剂产品的口感与酸碱度要求，本试验选择弱酸性条件考察其稳定性。从表2与表3结果可知，在加速试验条件下与常温试验条件下，人参液体制剂最稳定的pH值为5.8。
参 考 文 献
［1］ Qingsong JIANG, Xienan HUANG, Guizhong YANG, et al. Inhibitory Effect of Ginsenoside Rbl on Calcineurin Signal Pathway in Cardiomyocyte Hypertrophy Induced by Prostaglandin. Acta Pharmacologica Sinica,2007,28(8):11491154.
［2］ Li SHEN, Jianzhong HAN, Chen LI, et al. Protective Effect of Ginsenoside Rgl on Glutamateinduced Lung Injury. Acta Pharmacologica Sinica,2007,28(3): 392397.
［3］ 李伯廷.植物药有效成分的提取与分离.太原:山两高校联合出版社,1993:262.
［4］ 闫光军,张宝江,徐道娟.几种常用人参提取工艺研究比较.山东医药工业, 2002,22(4):8.
［5］ 付桂香,赵世萍,范保全,孙蓉.高效液相色谱法测定人参五味子糖浆中人参Rg1和Re的含量.药物分析杂志,2004,24(2):206208.
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