血小板保存袋保存效果的评价

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【摘 要】目的：比较国产（对照袋），进口（实验袋）两种血小板保存袋对手工制备浓缩血小板的保存效果。方法：手工浓缩血小板无菌加入到2种保存袋于22℃保存，保存0、3、5、7d后分别取样检测血小板回收率、体外聚集活性、PH。结果：随保存时间的延长2种保存袋血小板回收率逐渐降低，但各保存袋之间无显著性差异（P >0.05）；保存7d时国产袋明显不如进口袋的保存效果，随保存时间延长PH均逐渐下降，血小板保存5d时各保存袋 pH无显著性差异（P>0.05）；保存7d时，国产保存袋pH（6.20 ±0.15）明显低于国外保存袋（6.75 ±0. 08） （P < 0. 05）。随保存时间的延长各保存袋中的血小板聚集率均下降迅速，但2种保存袋间无显著性差异（P >0.05）。结论：国产与进口血小板保存袋相比，血小板保存5d时各检测指标接近，2种保存袋保存效果基本一致；但保存7d时国产保存袋其pH明显不如进口保存袋保存效果。

【关键词】手工浓缩血小板；血小板回收率；ph值；比较

1 引言

本实验利用手工浓缩血小板无菌加入到2种保存袋于22℃保存，保存0、3、5、7d后分别取样检测血小板回收率、体外聚集活性、PH、来检测血小板活性，从而鉴定保存袋的效果。

血小板在低渗环境中使自身体积缩小的机制和其他的动物细胞一样， 通过产生一系列信息传导和生化反应， 降低血小板内部离子的浓度来维持血小板内的体积， 血小板内的这个反应依靠ATP 完成。

2 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 样品：手工浓缩血小板6袋，每袋由400ml全血分离，均取自血站，于22℃震荡仪上储存。进口血小板保存袋（实验袋），保存血小板7d。国产血小板保存袋（对照袋）。

2.1.2 仪器 ：低速离心机、微量移液器1.5m L Microtube、载玻片、盖玻片（荧光显微镜观察需用）、CD1200血细胞计数仪（美国ABBOTT公司）；pH211型pH计（意大利HANNA公司）；SC2000型血小板聚集仪（中国赛科希德公司）；LD400 酶标仪（贝克曼库尔特公司）。

2.2 方法

2. 2.1 浓缩血小板样本：手工浓缩血小板2例，每例由3袋手工浓缩血小板混合而成（约50ml/袋）， 均分在2种血小板保存袋中；每组分别于保存0、3、5、7d时取样进行血小板计数、pH、体外聚集活性。

2.2.2 检测指标

（1） 血小板计数：血小板稀释到（2. 0～3. 0） ×1011 /L，采用血细胞计数仪检测血小板数量。

（2） pH检测：用移液器吸取血小板悬液至pH计检测并记录。

（3） 血小板体外聚集活性检测：将血小板悬液浓度调整到（2. 0～3. 0） ×1011 /L、以PPP（贫血小板血浆）作空白对照，调节透光率100% ，取血小板悬液300μl，加入搅拌磁棒， 37℃预温，加入0.45mmol/L肾上腺素测定5min最大聚集率。

3 结果

3.1 血小板计数和聚集率的变化

4 讨论

本研究结果表明：国产与进口2种血小板保存袋，在保存血小板的过程中其血小板回收率、pH、体外聚集活性。保存7d时国产保存袋pH 明显低于进口保存袋，同时也低于国际标准（ 6. 0 ～7. 4 ）[1]。Holem[2]报道血小板pH < 6. 0 时，血小板功能会出现损伤，并发生不可逆的变化，导致功能全部丧失。我们以肾上腺素为诱导剂进行聚集试验，结果随着保存时间的延长其聚集率明显下降，与国外报道相似[3]。保存7d时聚集率下降为0d时的1. 26% ～6. 53% ，表明经保存后的血小板聚集功能几乎丧失。但有研究证明，虽然保存5d的浓缩血小板ADP诱导的聚集反应降至为0，然而加入新鲜血浆孵育后，聚集功能部分恢复[4]，这可能是由于新鲜血浆除提供基本能量外，还补充了某些血小板在保存中丧失了的未知成分。

综上所述，国产研发的血小板保存专用袋与进口生产的血小板保存专用袋相比，血小板保存5d时以上检测结果接近，保存效果基本一致。保存7d时国产保存袋其pH、指标不如进口保存袋。血小板聚集是血小板的一个主要功能。因此，进一步关注这些实验用于什么患者、什么临床情况下和什么样实验条件下运用将会很重要，进行测定时要尽量避免不良因素的影响，保证采集标本到检测的时间在有效时间内、合理使用试剂等，才能得到准确、可靠、经济的血小板功能实验检测结果。

参考文献：

[1] 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局. 中华人民共和国国家标准全血成分血质量要求. 北京：中国标准出版社， 2001：8 - 9.

[2] Holem S. Storage and quality assess ment of platelets. Vox Sang，1998， 74： 207 - 216.

[3] KoernerK， Sahlmen P， Zimmemann B， et al. In vitro p latet functionduring storage in three different addive solution. Vox Sang， 1994，67： 154 - 159.

[4] 成小玲，林武存. 血小板贮存损伤研究进展. 第三军医大学学报， 1999， 21： 15 - 16.