二陈汤对吗啡依赖小鼠位置偏爱效应的影响
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【摘要】 目的：探讨二陈汤对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱（CPP）的影响。方法：连续给予小鼠吗啡（9 mg/kg，sc，7 d），使小鼠产生显著的条件性位置偏爱效应。将小鼠随机分为正常对照组、吗啡组、二陈汤低剂量、中剂量、高剂量五组，正常对照组注射等体积生理盐水，吗啡组注射吗啡，二陈汤组注射吗啡，同时给予三种不同剂量的二陈汤灌胃，并且检测对小鼠的奖赏效应或厌恶效应。结果：吗啡组小鼠在伴药箱中停留的时间明显延长，二陈汤可抑制吗啡引起的小鼠位置偏爱的形成。结论：二陈汤能在一定程度上抑制吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱效应。
【关键词】 二陈汤； 吗啡； 条件性位置偏爱
Effect of ErchenTang of
中医痰病学术，是具有重要的探索价值和广泛的应用前景的学术宝库，是中医药治疗多种疑难杂病的优势、特色所在。目前关于痰证的研究多扎根于临床，缺乏必要的动物实验研究，关于痰证的本质研究还比较少。因此，研制出合理的痰证动物模型可以为揭示痰证的本质提供一个基础平台。本课题组从中医体质角度探讨复吸的发病机制，先期调查发现（国家自然基金项目，课题编号30973718），当机体存在痰病理产物和阳虚、血热等病理变化时，易引起“毒瘾”复发，而其中又以痰最为突出，笔者认为，“毒瘾”的缠绵难除特性可能与“痰”有关，而此痰有其特异性，是“ 顽痰”，“顽痰”是吸毒人群“毒瘾”缠绵难除的特性[1]。由此，笔者思考：成瘾动物模型是否也具有痰证缠绵难除病理特点呢？因此，笔者采用国际公认的条件性位置偏爱（CPP）小鼠模型[2-6]，以经典燥湿化痰方反证治疗，验证我们这一假想，从而进一步探索研制痰证动物模型。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 昆明种小鼠，雄性，体重18～22 g，由福建中医药大学实验动物中心提供。所有小鼠饲养条件：清洁级动物房、单笼、照明12 h/d，室温（22±2）℃，相对湿度为30%～40%，喂常规饲料，自由进食饮水。
1.1.2 药品 盐酸吗啡粉，购自青海制药厂有限公司，规格：1 g，批号：20111101，用生理盐水配成所需要的浓度。
1.1.3 药物准备 二陈汤按重量比加8倍量水浸泡半小时，文火煎煮2次，第1次30 min，第2次30 min，合并2次水煎液，3000 r/m离心15 min，倒出上清液，70 ℃恒温水浴，浓缩至每毫升药液含生药0.27 g，高压灭菌后4 ℃冰箱储存备用。
1.1.4 设备 条件性位置偏爱箱根据文献制作：箱子由两个正方体组成，中间有一可活动的隔板，将隔板抽起后，小鼠可在两个箱子之间自由活动。箱子的一侧用油漆涂成黑色，用柔软毛毯将底板底面制成粗糙面，另一侧用油漆涂成白色，用玻璃底板制成光滑面，使整个偏爱箱具有明显不同的视觉和触觉[7]。
1.2 方法
1.2.1 建立吗啡依赖CPP小鼠模型及其消退和诱导复发 在安静环境的条件下，采用条件位置偏爱箱建立吗啡依赖 CPP及其消退和诱导复发。在实验开始之前，将小鼠放入条件位置偏爱箱中适应环境，小鼠可在箱内自由活动，上下午各1 h，共7 d[8]。
1.2.2 预测试阶段 在条件位置偏爱箱内，测定每只小鼠在白箱的停留时间，1次/d，连续3 d，最后取平均值，以小鼠偏爱的白箱作为伴药箱进行实验，检测白箱停留时间：测试小鼠60 min内在白箱中的停留时间。
1.2.3 训练阶段 建立吗啡精神依赖模型，每天9AM时给予吗啡（9 mg/kg，sc），连续7 d，注射吗啡后将小鼠立即放入白箱（伴药箱），在箱内停留60 min，每天5PM皮下注射等容积生理盐水后放入黑箱（非伴药箱），亦在箱内停留60 min。7 d之后停用吗啡，测定停用吗啡后的第1、2、3天小鼠在白箱停留时间[9]。
1.2.4 停药期 从停用吗啡算起连续15 d，每天将小鼠放入条件位置偏爱箱中自由活动，每天60 min。
1.2.5 动物分组及给药 检测二陈汤位置偏爱效应时，将正常小鼠随机分成正常对照组、二陈汤低剂量、中剂量、高剂量共四组，每组10只，正常对照组皮下注射生理盐水，二陈汤组按4 mL/kg的剂量分别灌胃给药，各组用药5 d，每天2次（9AM，5PM）第6天测定各组小鼠在白箱中的停留时间；检测二陈汤对CPP小鼠影响时，将小鼠随机分为吗啡组、正常对照组、二陈汤低剂量、中剂量、高剂量共5组，每组10只，吗啡组皮下注射吗啡，正常对照组给予皮下注射氯化钠注射液，二陈汤组则按4 mL/kg的剂量分别灌胃给药，各组用药5 d，每天2次（9AM，5PM），灌胃后30 min注射吗啡，第6天开始停用吗啡，将小鼠放入条件位置偏爱箱中自由活动，第20天给予吗啡组及二陈汤组皮下注射氢化可的松5 mg/kg，15 min后将小鼠放入条件位置偏爱箱，测定其在白箱中停留的时间。
1.3 统计学处理 采用SPSS 15.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验，以P
2 结果
2.1 二陈汤位置偏爱效应检测结果 各组小鼠分别测得在白箱中停留时间，二陈汤各剂量组与对照组比较差异均无统计学意义（P>0.05）；与其各自给药前比较差异也无统计学意义（P>0.05），说明二陈汤无奖赏效应或厌恶效应，见表1。
2.2 二陈汤对吗啡引起的位置偏爱效应的影响 正常对照组小鼠在白箱停留时间为（522±38）s，吗啡组为（683±47）s，吗啡组小鼠在白箱停留时间明显长于正常对照组，比较差异有统计学意义（P