PRRSV+CSFV+PCV2+HPS混感病例的病理学研究

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摘要：从PCR鉴定为“PRRSV+CSFV+PCV-2+HPS”混合感染的7份猪只病例中选取病变较典型脾、肺、肝以及淋巴结等组织，肉眼观察其剖检病变之后，制成病理切片，在显微镜下观察其病理变化，并将观察结果与PCR鉴定结果相对照。结果显示：“PRRSV+CSFV+PCV-2+HPS”混合感染的7份病例无论是在剖检还是在镜下都具有相似的病变并且与PCR鉴定基本相符；7份病例的病变与其他猪呼吸道疾病引起的病变有很大的共性。可见病理学研究，为我们诊断猪群疫病提供了诊断方向和必不可少的依据，但却不是唯一的依据，更多的时候还要通过临床诊断和实验室诊断。

关键词：混感病例；病理；研究

中图分类号：Ｓ８５８.２８文献标识码：Ａ

随着养猪业的不断发展，猪场的疫病也变得日渐多元化和复杂化，而猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪瘟（CSF）以及猪圆环病毒病依然是危害猪场最为严重的几类疫病之一。PRRS是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）所致的猪的种病毒性传染病，以妊娠母猪的繁殖障碍及各种年龄猪特别是仔猪的呼吸道疾病为特征［１］，近年来已成为危害我国养猪业最严重的疾病，且疫情有逐年增长的趋势［２］。猪圆环病毒病是由猪圆环病毒2型（PCV2）引起的以断奶仔猪多系统衰竭综合征和猪皮炎肾病综合征为代表的多种疾病的总称。这两类疾病在猪场中广泛存在，给养猪业带来巨大的经济损失［３］。CSF是由猪瘟病毒（CSFV）引起猪的一种急性、发热性、接触性传染病，其特征为发病急、高热稽留和毛细血管带变性，传染性强、病死率高［４］。临床上PRRSV与PCV2共感染普遍存在，共感染率高达83%［５］，且病症远较单感染严重。与此同时，副猪嗜血杆菌作为猪呼吸道综合征（porcine　respiramry　disease　comprex，PRDC）主要的继发性感染的细菌病原，近年来引起的发病率越来越高［６］，特别是在PRRSV和PCV2感染后，几乎总是伴随着副猪嗜血杆菌（HPS）的感染［７，８］。

１材料与方法

１.１切片材料采集

从PCR鉴定为“PRRSV+CSFV+PCV-2+HPS”混合感染的病例中选取病变较典型脾、肺、肝以及淋巴结等组织。

１.２主要试剂及仪器

运用的主要仪器有显微镜、包埋机、病理组织漂烘仪、脱水机、石蜡切片机和电热恒温箱等。而主要试剂则为10%福尔马林溶液、伊红染液、苏木素染色液、二甲苯以及各种浓度酒精。

１.３病理切片的制备及观察

切取病变与健康组织的交界处，大小以3～5mm×3～5mm×10～15mm为宜。切取组织块后迅速投入到10%的福尔马林固定液中，经固定至少24h后，再经冲洗脱水透明浸蜡包埋切片贴片烤片脱蜡复水染色脱水透明封藏等一系列过程，制成病理切片，在显微镜下观察组织细胞的病变。

２结果

２.１剖检病理变化

剖检可见弥漫性间质性肺炎以及淋巴结的广泛肿大，肺出血、硬变（不能萎缩的橡皮肺橡）和花斑样病变（斑驳状到褐色），肝肿大出血、淋巴结、肾、膀胱、喉头有出血点，脾脏有梗死灶。

２.２镜检病理变化

２.２.１肺部病理变化

支气管管腔内有数量不等的纤维素渗出液和以嗜中性粒细胞为主的各种炎症细胞，在其周围、肺小叶间质和肺泡壁见浆液性渗出（见图１）和嗜中性粒细胞、少量的淋巴细胞浸润。肺泡上皮细胞活化增殖，大量巨噬细胞和成纤维细胞增生；肺泡壁和肺泡腔内出血，有含铁黄素颗粒沉着（图２）。

２.２.２脾脏病理变化

脾小体内淋巴细胞变性坏死，核溶解、破碎，生发中心变小或消失，内见有少量红细胞和增生网状细胞（图５）。脾小梁结构疏松，间质水肿，细胞变性。脾脏被膜结缔组织水肿、增厚，有纤维素渗出和血管扩张充血、出血，并有大量嗜中性粒细胞浸润和少量单核细胞。红髓区淋巴细胞减少，嗜中性粒细胞浸润和大量红细胞及含铁血黄素颗粒沉着（图３）。网状细胞活化增殖，红髓内见有少许巨细胞。

图３红髓区淋巴细胞减少，嗜中性粒细胞浸润和大量红细胞及含铁血黄素颗粒沉着（×４０）

２.２.３肝脏病理变化

肝实质细胞发生严重颗粒变性甚至空泡变性（图４），有的细胞质完全溶解成泡状，核浓缩或溶解。肝血窦内大量散在的含铁血黄素颗粒沉着，有的区域见有粉红色的浆液渗出及局灶性中性粒细胞聚集（形成小脓肿）。肝小叶中央静脉扩张充血，周围水肿，有嗜中性粒细胞和淋巴细胞。

２.２.４淋巴结病理变化

淋巴小结内淋巴细胞变性、坏死，网状细胞增生，生发中心结构消失，淋巴窦、髓质窦内水肿，有散在嗜中性粒细胞浸润和大量的巨噬细胞增生（如图５）。

３讨论

3.1病原选择

是选取了7份“prrsv+csfv+pcv2+hps”四重感染的病料制作成病理切片，这是因为这几类病原不但包含了细菌性病原和病毒性病原，而且这几类病原在猪群疫病别是引起猪群呼吸道症状的疫病中是最常发的，也是最有代表性的。同时由这

几类病原引起的病理变化会相对复杂，尤其是它们发生混合感染的时候。我们希望通过这些病理图片我们能找到引发广西区猪群疫病特别是引起猪群呼吸道症状的疫病的主要病原的普遍性的病变。

3.2通过观察发现

7份病例无论是在剖检还是在镜下都具有相似的病变并且与PCR鉴定基本相符。如CSFV引发组织内出血时，视野中可见含有大量的含铁血黄素沉淀；而PRRSV与PCV-2混合感染时则表现为间质性肺炎和弥漫性卡他性肺炎，坏死性脾炎，肝实质细胞变性和局灶性坏死，淋巴结生发中心结构消失，淋巴小结内淋巴细胞变性、坏死等等。这些都为我们诊断提供了诊断方向和必不可少的依据。

3.3因为有许多病原引发的病变是相似的

如PRRSV、PRV、PCV-2和CSFV都能引起肺部病变；猪附红细胞体（E-suis）和CSFV都能引起组织内出血；细菌性病原均引起嗜中性粒细胞增高等。所以病理只能为疾病诊断提供方向，作为诊断的一种辅助手段，而非确诊手段，要想确诊最终还是要通过病原的检测，甚至于病原的分离鉴定。所以我们在诊断猪群疫病时，不能光靠看病理变化，更多的时候还要通过临床诊断和实验室诊断。

参考文献

［１］杨汉春．猪繁殖与呼吸综合征综述［Ｊ］.猪业科学，2006（05）：19-20.

［２］蔡宝祥，姜平.我国PRRS诊断技术与疫苗研究进展［Ｊ］.畜牧与兽医，2007，39（08）：1-4.

［３］李燕华，郭鑫，杨汉春，等.猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪圆环病毒2型共感染猪组织中猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原的分布［Ｊ］.中国兽医杂志，2009，45（01）：9-12.

［４］Moennig　V.Introduction　to　classical　swine　fever：virus［Ｊ］．disease　and　control　policy　Veterinary　Microbiology，2000，73（02-03）：93-102.

［５］Welleuherg　G，J，Stockhofe-Zurwieden　N，Boersma　W　J，et　al.The　presence　of　co-infections　in　pigs　with　clinical　signs　of　PMWS　in　The　Nether　lauds：a　case-control　study［Ｊ］.Res　Vet　Sci，2004，77：177-184.