网织红细胞及其荧光强度检测的临床意义

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[摘要] 目的 探讨流式细胞检测结合核酸荧光染色技术在网织红细胞(Ret)及其荧光强度分析中的临床应用价值。方法 应用Sysmex XT――2000i全自动血液分析仪分析不同类型贫血患者的网织红细胞和荧光强度的变化。结果 130例贫血患者与30例正常人群比较,其Ret 绝对值及其Ret百分比有不同程度的升高、轻度降低或显著降低;荧光强度的变化差异较大,表现为低荧光强度网织红细胞比率(IFR)降低,幼稚网织红细胞比率(IRF)、中荧光强度网织红细胞比率(MFR)和高荧光强度网织红细胞比率(HFR)升高,差异均有统计学意义(P

[关键词] 贫血; 网织红细胞计数; 荧光强度; 临床应用

[中图分类号] R446.113 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)09-66-02

网织红细胞(Ret)是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间尚未成熟的红细胞,其胞质内存留多少不等的嗜碱物质RNA,其RNA含量越多,Ret越不成熟,反之亦然。通过使用核酸荧光染料多聚亚甲基可对细胞胞浆中的核酸物质(RNA)进行染色,越不成熟的Ret其荧光越强,反之,成熟Ret荧光极少或最弱,故将Ret分成高荧光强度网织红细胞(HFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)、低荧光强度网织红细胞(LFR)三部分。IRF定义为中、高荧光强度区域内Ret百分数之和(MFR+HFR),为不成熟Ret比例,可更灵敏的反映骨髓造血系统的状况。

我院使用的具有全自动网织红细胞计数、荧光强度自动化分析及成熟度分类功能的Sysmex X T-2000i 血细胞分析仪,广泛用于临床血液常规标本的检测,为临床提供了大量的分析参数和研究参数,现将网织红细胞及其光强度分析的临床应用情况报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象

2009年 1～11月本院住院患者均为首诊并未做过输血及抗贫血治疗。慢性肾功能衰竭患者共20例,男11例,女 9例,年龄45～79岁;失血性贫血30例,男19例,女11例,年龄23～68岁;缺铁性贫血30例,男13例,女17例,年龄32～73岁;肿瘤性贫血30例,男19例,女11例,年龄42～86岁;再生障碍性贫血20例,男10例,女10例,年龄10～70岁;对照组30例为我院健康体检合格者,其中男 15例,女15例,年龄 20～55岁。

1.2 仪器与试剂

Sysmex XT-2000i全自动血液分析仪及Sysmex XT-2000i全部配套试剂。

1.3 检测方法

所有标本均为空腹静脉血2mL,采用专业真空采血管(EDT A-K2)抗凝并充分混匀,于4h内完成分析。

1.4 质量控制

Sysmex XT-2000i专用配套的低值、中值、高值全血质控物作为室内质控品,各检测数据均在规定的靶值范围内。

1.5 统计学处理

分组统计各项检测指标的均值和标准差(χ±s),并作t检验(采用SPSS10.0统计软件进行分析)。

2 结果

见表1。

3 讨论

Sysmex XT――2000i血液分析仪采用流式细胞术加核酸荧光染色方法测量网织红细胞内的RNA含量,其中前向散射光(FSC)测量细胞体积,侧向散射光(SSC)测量细胞内含物,侧向荧光测细胞内RNA含量[1]。根据网织红细胞内RNA与试剂中的荧光染料(多聚亚甲基)结合后发出的荧光强度将网织红细胞分为低荧光Ret(LFR)、中荧光Ret(MFR)、高荧光 Ret(HFR),同时计算出未成熟Ret的比率(IRF),以显示Ret的成熟程度。越是幼稚的Ret其细胞内RNA含量越多,故仪器所测得的荧光越强,HFR其胞浆中残留的RNA最多,显示最强的荧光,为较幼稚的Ret;LFR其胞浆中残留的RNA最少,其荧光强度最弱,为接近成熟的Ret;MFR为介于两者之间的Ret。

正常生理情况下,MFR、HFR水平较低,在造血受到刺激时,大量较为幼稚的Ret从骨髓释放到外周血中,使MFR、HFR含量显著增高,因此MFR、HFR更能真实的反应红细胞生成的开始。IRF为MFR与HFR之和可总体反应骨髓红系造血状况,研究表明,红系增生是粒系多核细胞恢复的早期和敏感指标,首先出现增加的是网织红细胞内MFR群,而后是HFR群,其变化的顺序基本是MFR+HFR,多核细胞,Ret绝对值。骨髓移植后8～9d,HFR增高是最早出现的骨髓造血功能恢复的敏感指标,其后网织红细胞上升(约20d)、分叶核粒细胞上升(约46d)[2]。

本组结果表明,除再生障碍性贫血Ret绝对值和百分比显著低于健康对照组(P

本统计结果显示,各贫血组Ret绝对值与对照组比较差别无统计学意义(P>0.05),而Ret百分比、MFR%、HFR%、IRF%增高,LFR%降低,与健康对照组比较差别有统计学意义(P

综上所述,网织红细胞荧光强度分析是骨髓造血系统抑制和恢复较敏感的指标,可作为某些贫血诊断和鉴别诊断的初筛指标,特别是MFR、HFR、IRF参数比网织红细胞更敏感,这些幼稚的网织红细胞参数的变化是反应骨髓红系造血水平的关键参数,对判断和监测骨髓的损伤程度和预后以及贫血疗效观察具有重要的临床意义。

[参考文献]

[1] 张时民,李晓京. 网织红细胞检测技术的进展和临床应用[J]. 中国医疗器械信息,2007,13(6):17.

[2] 李晓京,张时民. 网织红细胞的测定和临床应用[J]. 中国医刊,2007,42(3):65.

[3] 张素芬,李鉴峰. 网织红细胞计数、绝对值、网织细胞指数的临床意义[J]. 中国实用内科杂志,2002,22(1):13.

[4] 门剑龙. 网织红细胞鉴别慢性病贫血与缺铁性贫血的价值[J]. 天津医药,2003,31(12):794.

[5] 从玉隆,乐家新. 现代血细胞分析技术与临床[M]. 北京:人民军医出版社,2005:101.

(收稿日期:2010-01-19)