不同品种玫瑰花多糖含量测定

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摘要：目的测定不同品种玫瑰花多糖的含量，观察不同品种玫瑰花多糖含量的差异，为玫瑰花的临床用药和质量控制提供科学依据。方法以葡萄糖为对照品，采用硫酸，蒽酮比色法测定玫瑰花可溶性多糖和粗多糖的含量。结果不同品种玫瑰花可溶性多糖和粗多糖的含量差异显著。结论测定方法操作简单，重现性好，结果准确，可用于玫瑰花多糖的含量测定。

关键词：玫瑰花；多糖；含量测定

中图分类号：R284.12　文献标识码：A　文章编号：1672-979X(2011)11-0432-03

玫瑰花为蔷薇科植物玫瑰Rosa rugosa Thunb，的干燥花蕾，具有活血行气、开窍化瘀、疏肝醒脾的功效。玫瑰花中所含成分复杂，含有多酚类、黄酮类、多糖类、氨基酸类等多种化学成分。药理学研究表明玫瑰花提取物具有抗菌、抗氧化、抗肿瘤、利胆等多种药理作用[3-4]。多糖是其发挥药效物质学基础之一。本研究采用硫酸-蒽酮比色法测定不同产地玫瑰花可溶性多糖和粗多糖的含量，为玫瑰花的临床应用和质量控制提供科学依据。

1　材料、仪器与试剂

1.1材料

玫瑰花材料采集地区见表1，经山东中医药大学彭艳丽鉴定为蔷薇科植物玫瑰(Rosa rugosa Thumb.)的干燥花蕾。采收时间2009年5月，加工方法为60℃烘干。

1.2仪器

UV-3010紫外分光光度计(上海精密科学仪器公司)；KQ-250E型超声振荡清洗仪(昆山超声仪器公司)。

1.3试剂

浓硫酸(分析纯，莱阳康德)；无水乙醇(分析纯，天津富宇)；浓盐酸(分析纯，莱阳康德)；葸酮(分析纯，上海展云)；葡萄糖(分析纯，天津广成)；蒸馏水自制。

2　方法与结果

2.1试剂的配制

2.1.1对照品溶液的制备精密称取105℃干燥至恒重的无水葡萄糖标准品100 mg，置于50 mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释定容至刻度，摇匀，即得。

2.1.2供试品溶液的制备

2.1.2.1可溶性糖供试品的制备精密称取玫瑰花样品粉末(过4号筛)0.5 g，置于100 mL三角瓶，精密加入80％乙醇20 mL，称定质量，浸泡30 min，超声30 min，室温放置，补足失重，过滤于50 mL容量瓶中，药渣重复提取一次，合并滤液定容，备用。

2.1.2.2粗多糖供试品的制备取提取可溶性糖后的药渣，水浴(70℃)蒸干，精密加入2％盐酸20 mL，沸水浴提取1 h，放冷，过滤于50 mL容量瓶中，药渣重复提取一次，合并滤液定容，备用。

2.2测定波长的选择

取约3 mL对照品溶液，稀释至10 mL，精密取1.0 mL于干燥洁净试管中，精密加入显色剂5.0 mL，混合均匀；另精密取蒸馏水1.0 mL，同法操作为空白对照。然后沸水浴加热10 min，冷却，400～800 nm扫描测试，结果表明对照品溶液的最大吸收波长为625 mm。

2.3标准曲线的绘制

精密吸取对照品溶液0.25，1.25，2.50，3.75，5.00 mL分别置／k50 mL容量瓶，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。照“2.2”项下操作，625 nm处测定吸光度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程为：y=0.005x+0.053 39，r=0.9997(n=5)，线性范围为10~200μg／mL。

2.4精密度

取2.1.1项下对照品溶液，1.0 h在625 nm连续测定5次吸光度，吸光度值为0.322，0.323，0.322，0.322，0.324，RSD=0.277％。结果表明精密度良好。

2.5稳定性

精密吸取新鲜配制玫瑰花(传统玫瑰花)可溶性多糖提取液1.0 mL，按“2.2”项下操作，分别于0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4 h测定吸光度，结果RSD=0.254 0／0，结果表明本方法测定的样品在4h内稳定。

2.6重复性

取玫瑰花(传统玫瑰花)样品共5份，各0.5 g，按照供试品制备方法制备玫瑰花可溶性多糖溶液，并测定其吸光度。结果RSD=1.58％，表明试验重复性良好。

2.7加样回收

取己测知含量的样品6份，加入对照品，按2，3项操作，测定吸光度并计算回收率，结果见表2。

2.8样品含量测定

不同品种玫瑰花药材供试品溶液，按2.3项下操作，测定吸光度值，并根据工作曲线计算不同品种玫瑰花药材的可溶性多糖和粗多糖的含量，结果表明不同品种玫瑰花可溶性多糖和粗多糖的含量有显著性差异。结果见表3。

由表2可见，可溶性多糖的含量，定陶大红花含量最高，传统玫瑰含量最低。粗多糖的含量，苦水玫瑰含量最高，定陶大红花最低。总多糖含量，定陶大红花最高，传统玫瑰最低。

3　结论

本研究建立了对玫瑰花多糖含量测定方法，此方法简单，快捷，准确。玫瑰花作为药典收载品种，未有多糖含量测定方面的文献报道，本研究探索了硫酸一蒽酮法测定不同品种玫瑰花的多糖含量，旨在为玫瑰花药材的临床用药和质量评价提供科学依据。不同品种玫瑰花多糖含量差异较大，可溶性多糖、粗多糖最高含量均是最低含量的2～3倍。

参考文献

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