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抗核抗体检测对诊断系统性红斑狼疮的临床应用

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【摘要】 目的 探讨抗核抗体检测诊断系统性红斑狼疮患者的临床意义。方法 对75例系统性红斑狼疮、系统性硬皮病(SSc)18例,多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)3例、类风湿关节炎(RA)28例和健康对照组46例采用欧蒙试剂运用间接免疫荧光法检测其ANA。结果 ①75例SLE患者中有70例阳性,阳性率为93.3%,18例SSc 患者中有8例阳性,阳性率为44.4%。3例PM/DM患者中有1例阳性,阳性率为333.3%,28例RA患者中有9例阳性,阳性率为32.1%。健康对照组只有3例阳性。SLE组与对照组比较,经χ2检验,χ2=79.179,P

【关键词】抗核抗体;系统性红斑狼疮;间接免疫荧光法

系统性红斑稂疮是一种自身免疫性结缔组织病 由于体内有大量致病性自身抗体和免疫复合物,造成组织损伤,临床可以出现各个系统和脏器损害的症状。因此寻找高敏感性、高特异性的自身抗体对SLE的早期诊断、早期治疗有重要的意义。结果显示ANA在SLE患者诊断中的重要意义。现将我们对124例各种自身免疫病患者及46例健康体检者检测结果分析报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料 选取2007年1月至6月在南昌大学第二附属医院门诊及住院患者124例,其中系统性红斑狼疮(SLE)患者75例,女69例,男6例,年龄17~78岁,平均(35±10)岁;诊断均符合1997年美国风湿病学会修订的SLE分标准[1]。系统性硬皮病(SSc)18例,多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)3例,类风湿关节炎(RA)28例。对照组为南昌大学第二附属医院体检科健康体检者46例作为对照组,其中女37例,男9例,年龄14~56岁,平均(28±10)岁。

1.2 方法、试剂与仪器

1.2.1 标本的收集 所有的被检标本均为空腹采不抗凝血2~3 ml, 2500r/min离心15 min分离血清,-20℃保存待检。

1.2.2 抗核抗体试剂 采用欧蒙医学实验诊断有限公司产生的间接免疫荧光试剂。应用间接免疫荧光法检测,抗核抗体采用Hep-2细胞及猴肝组织复合片。方法是检查加样板,将生物载片恢复至室温,稀释血清(1:100),设定阴,阳性对照和质控,加25 μl稀释后血清至加样板的每一反应区上(注意不要有气泡),再将生物载片有生物薄片的一面朝下,盖在加样板的凹槽里,室温(18~25℃)温育30 min。用PBS吐温缓冲液冲洗, 然后将20 μlFITC标记的抗例IgG(荧光二抗)加至反应区上, 温育30 min, 用PBS吐温缓冲液冲洗,最后封片镜检。

1.3 结果判定 荧光显微镜下观察阴性、阳性对照,并区别阳性和非特异假阳性的荧光模型,有明显可以辨认的黄绿色特异性荧光模型,则该待测血清标本的ANA阳性;否则为ANA阴性。

1.4 统计方法 数据分析均采用SPSS 13.0软件进行统计分析,数据均以均数±标准差(x±s)表示,计数资料采用χ2检验。

2 结果

2.1 75例SLE患者中有70例阳性,阳性率为93.3%,18例SSc 患者中有8例阳性,阳性率为44.4%。3例PM/DM患者中有1例阳性,阳性率为33.3%,28例RA患者中有9例阳性,阳性率为32.1%。健康对照组有1例阳性。结果见表1。

3 讨论

系统性红斑稂疮是一种自身免疫性结缔组织病,由于体内有大量致病性自身抗体和免疫复合物,造成组织损伤,临床可以出现各个系统和脏器损害的症状。在我国本病患病率为1/1 000,以女性多见,尤其是20~40岁的育龄女性。因此寻找高敏感性、高特异性的自身抗体对SLE的早期诊断、早期治疗有重要的意义。

ANA是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分作为靶抗原的自身抗体的总称。ANA的性质主要是IgG,也有IgM、IgA和IgD,其无器官和种属特异性,故该类抗体可与所有动物的细胞核发生反应。ANA在未治疗的SLE患者中的滴度较高,在大多数自身免疫性疾病中均可呈阳性,如SLE,RA,SSc等。Horak等[2]则认为ANA可作为SLE早期诊断的标记性抗体。另外也有文献认为ANA可有助于早期诊断SLE,它在抗ds-DNA抗体和抗组蛋白抗体出现之前即可检测到[3]。

本研究中结果显示ANA在SLE患者中阳性率为93.3%,明显高于其他风湿病组,说明其在SLE诊断中的重要意义。

ANA在SLE患者的敏感性为93.3%,特异性为93.5%;阳性预测值和阴性预测值分别为95.9%与89.6%。与文献[4,5]报道基本一致,说明ANA在疾病的诊断中可以弥补其他抗体的不足.特别是对抗dsDNA抗体阴性的SLE患者,诊断更有意义。

大多数学者[6]认为,ANA与SLE的疾病活动性密切相关 。其中处于活动期的SLE其ANA阳性可达到100%。

综上所述,本研究结果显示ANA对SLE诊断敏感性高,特异性强,可作为判断SLE活动的一种新的特异性抗体。

参考文献

1 Hochberg MC.Updating the American College of Rheumatology revised criteria for the classification of systemi c lupus erythe-matus.Arthritis Rheum,1997,40:1725.

2 Horak P,Soudlav V,Hermanovo Z,et al.Clinical utlity of selected disease activity markers in patients with systemi c lupus cry-thematosus.Clin Rheumatol,2001,20:337-344.

3 Amoura Z,Chabre H,Bach JF,et al.The appearance of antiuneleosome antibodies precedes that of anti-double-stranded DNA and anti histones in mufine lu-pus.Rev Med Interne,1993,14(10):980.

4 苏茵,韩蕾,栗占国,等.抗核小体抗体测定在系统性红斑狼疮诊断中的意义.中华风湿病学杂志,2003,7:474-477.

5 许珂,李小峰,胡学芳,等.系统性红斑狼疮血清抗核小体抗体水平及意义的探讨.中华风湿病学杂志,2005,9:72-76.

6 Flora Pg,Gregory CD.Recognition of apoptoic ceUs by human macrophages: inhibition by monocyte/macmphage specific mono-clonal antibody.Eur J Innnunol,1994,24:2625-2632.