胶体金法与酶联免疫法联合检测HBsAg的结果比较

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇胶体金法与酶联免疫法联合检测HBsAg的结果比较范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

[摘要] 目的 探讨基层医院HBsAg的有效检测方法。 方法 采用胶体金法（GIA）与酶联免疫法（EIA）对18 638例血清标本同时进行HBsAg检测，并且对结果进行对比分析。 结果 18 638例标本中有1例HBsAg EIA阴性而GIA阳性；13例HBsAg EIA阳性或OD值为临界值的样本，GIA结果为阴性；其余的标本EIA和GIA对于HBsAg阴性及阳性的标本检测结果一致。 结论 两种方法对HBsAg检测的特异性相近。两种方法若联合检测应用于临床，可提高检测结果的准确性。

[关键词] 胶体金法；酶联免疫法；hbsag；联合检测

[中图分类号] R512.6+2 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721（2013）06（c）-0094-02

Compared results of colloidal gold method and enzyme linked immunosorbent assay in HBsAg

ZHANG Xiaofei

Department of Blood Transfusion，People's Hospital of Dancheng County in Henan Province，Dancheng 477150，China

[Abstract] Objective To explore the effective methods to test the HBsAg in primary hospital. Methods The level of serum HBsAg in 18 638 patients were tested by colloidal gold method （GIA） and enzyme linked immunosorbent assay （EIA），and the results between two methods were compared and analyzed. Results One case were negative of GIA and postive of EIA in 18 638 cases，13 cases were postive of GIA and negative of EIA，and all others were agreed with the results detected by GIA and EIA. Conclusion The specificity of GIA and EIA in testing the level of serum HBsAg is similar，and the union between GIA and EIA in testing serum HBsAg can improve the veracity of testing results.

[Key words] Colloidal gold antibody；Enzyme linked immunosorbent assay；HbsAg；Joint detection

随着社会的进步及科技的发展，人们生活水平提高的同时也伴随着对自身健康的重视也越来越高，HBsAg的检测也早已成为人们的日常体检、门诊常规检查项目，但由于受检测方法的限制，常出现HBsAg检测的假阳性和假阴性现象[1]。为提高HBsAg检测结果的准确性，防范发生医疗纠纷，本科从2009年开始对来本院进行HBsAg检测的患者先用胶体金法（colloidal gold method，GIA）初检，然后再用酶联免疫法（enzyme linked immunosorbent assay，EIA）复检，两者结果一致时发报告，两者结果不相符时再用EIA复检。结果发现有1例GIA阳性而EIA阴性，13例GIA阴性而EIA为阳性的标本，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源

2012年1～12月本院门诊及住院患者18 638例，年龄0～92岁，采集静脉血6 ml，离心待检。

1.2 试剂

HBsAg GIA试剂由蓝十字生物药业（北京）有限公司生产，EIA试剂由郑州安图绿科生物工程有限公司和万泰（北京）生物药业股份有限公司及上海科华生物工程股份有限公司生产；HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb试剂均由上海科华生物工程股份有限公司生产；所有试剂均在有效期内使用。

1.3 仪器

酶标仪：雷勃MK3；洗板机：雷勃MK3。

1.4 方法

GIA与EIA均严格按照说明书进行操作。对于初检标本先用GIA进行检测，然后再选用一个厂家的酶联免疫试剂进行复检，EIA检测以酶标仪读数（S/CO值）为准。①对于GIA阳性的标本再用EIA复检（S/CO值>1.0即EIA为阳性）也若为阳性，则报告阳性结果；若为阴性者，则再选用同一厂家和另一不同厂家的酶联免疫试剂做双孔复检，两种试剂均重复为阳性者则报告阳性；反之，建议做中和确认试验或PCR检测HBV-DNA来报结果。②对于S/CO值介于0.5～1.0的标本，选用两种酶联免疫试剂做双孔复检，两种试剂均重复为阳性者则报告阳性；反之，建议做中和确认试验或PCR检测HBV-DNA来报结果。③对于GIA阴性和EIA S/CO值

1.5 结果判断

EIA的检测结果以酶标分析仪判断结果为准，S/CO值≥1为阳性，S/CO值

2 结果

18 638例标本中，用GIA法检测HBsAg其中1526例阳性，EIA法检测HBsAg有1538例阳性。其中1例HBsAg EIA阴性而GIA阳性，13例HBsAg EIA（S/CO值≥1.0）为阳性而GIA结果为阴性。通过对18 638例标本GIA与EIA两种方法检测HBsAg的结果比较发现，GIA对HBsAg低滴度标本检测的敏感性较EIA差。因此不宜用GIA对EIA检测结果显色较浅及OD值为临界值的样本进行复检，对于此类标本，仍采用不同厂家的试剂进行EIA复检，以及HBV-DNA检测得到确认。对于显色较深的标本用GIA复检较为方便。

对1例HBsAg EIA阴性而GIA阳性，其中，HBsAb（+）、HBeAg（+）、HBeAb（-）、HBcAb（-）、HBV-DNA（-）。13例HBsAg EIA为阳性而GIA结果为阴性的标本，再用两种酶联免疫试剂做双孔HBsAg复检以及进行HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、HBV-DAN检测（表1、2）。

表1 18 638例标本GIA与EIA检验结果的比较

表2 13例HBsAg EIA为阳性或OD值为临界值的标本检测结果

3 讨论

我国是肝炎病毒的携带者和感染者的高发区，肝炎病毒已成为危害我国国民健康的一个重要因素。因此简单、方便、实用、快速的肝炎病毒检测方法一直是人们所追求及期盼的。目前，EIA具有高敏感、特异、技术成熟等优点，是国内外临床实验室测定HBV血清标志物最常用的检测方法[2]。尽管EIA的灵敏度和特异性比较高，但其操作过程较繁琐，检测时间太长，单个检测不便，血液样本的处理、操作中加样、孵育、洗板、比色判读、质控的好坏、试剂盒的质量等影响结果的误差因素较多，以及“钩状效应”导致发生的假阴性结果和使用国产试剂时，存在的灰区问题并且需要特定的检测设备和相关的检测人员，这也使EIA在临床上的应用具有一定的局限性。有资料证明[3]，在我国的乙型肝炎病毒感染人群中，血液中某些因子或药物的干扰，造成标本出现用酶联免疫试剂检测S/CO值介于0.5～1.0及酶联免疫试剂阳性而胶体金试剂阴性者[4]；部分血清HBsAg蛋白的决定簇结构突变，造成不同的HBsAg试剂对突变株的检测能力不同，这些不同可能造成不一致的检测结果。对于用酶联免疫试剂检测S/CO值介于0.5～1.0的标本及酶联免疫试剂阳性而胶体金试剂阴性者，通过两种酶联免疫试剂盒的双孔复检核对，HBsAg检测的准确性大大提高[5]。

20世纪80年代末发展起来的GIA具有简便、快捷、无需特殊设备、结果易于判断，既可用于批量检测，也可用于单份测定，检测标本可用血清或血浆也可用全血等优点。但是通过用GIA和EIA对HBsAg的检测结果对比，发现GIA的敏感性较EIA差，存在假阴性结果，和孔庆飞等[6]的报道相符。在临床实际工作中，采用GIA检测HBsAg只能作为初筛，对假阳性标本应用EIA复查，避免假阳性报告，但对假阴性标本，易造成漏检[7]。因此，对高危人群也应用EIA法进行复检，以降低漏检率。因此，建议临床医师对患者的检验结果进行汇总分析时，要全面考虑，结合临床，将EIA检测HBsAg作为最终检测结果，GIA法作为参考。对于一些疑难特殊的标本可作HBsAg中和确认试验得到可靠结果[8]。在本次试验中1例HBsAg EIA阴性而GIA阳性，双孔复检还为阴性，但HBV-DNA为阳性；13例HBsAg EIA为阳性或OD值为临界值而GIA结果为阴性的标本，通过双孔复检出12例阳性，中和确认结果12例阳性，两者检测结果基本相符。

综上所述，GIA和EIA在对乙型肝炎病毒HBsAg的检测中具有相似的临床检测效果。这两种方法各有各的特点，EIA由于结果稳定，技术可靠，运用于临床检测时间较长且成本低廉，适用于临床确诊及大批量检查；GIA由于其检测周期短和单个测定的优点，可适用于医院急诊手术、急症等方面的检查。通过笔者在实际的检验工作中发现，若把GIA与EIA协同检测应用于临床，将对乙型肝炎患者的早期发现及预防控制以及对于医护人员的自身防护有极其重要的参考价值和意义。另在指导临床用药、临床治疗的同时也可大大降低由检验结果出现的误差所产生的医患纠纷，对缓解目前紧张的医患关系具有较深远的社会意义。

[参考文献]

[1] 陈宏伟.两种方法检测HBsAg假阳性和假阴性影响因素的探讨[J].华北煤炭医学院学报，2006，8（5）：641.

[2] Buseri F，Seiyaboh E，Jeremiah ZJ.Surveying infections among pregnant women in the niger delta，Nigeria[J]. Glob Infect Dis，2010，2（3）：203-211.

[3] 杨萍.乙型肝炎病毒编码HBsAg区基因突变对免疫检测的影响[J].中华检验医学杂志，2005，28（7）：687-689.

[4] 张金凤，刘春娃.溶血标本对酶联免疫法检测HBsAg的影响[J].中国当代医药，2011，18（7）：92.

[5] 王克成，周国芳，常秋月.酶联免疫法和胶体金法测定HBsAg的比较[J].中国现代医生，2010，48（5）：94-95.

[6] 孔庆飞，班立芳，王勇鸣.酶联免疫法和发光免疫法测定乙肝病毒标志物比较[J].中国现代医生，2010，48（9）：65，67.

[7] 赵晓利.胶体金与酶联免疫法检测乙型肝炎表面抗原效果对比研究[J].吉林医学，2012，33（21）：4517-4518.

[8] 龚光卫.酶联免疫法与血清乳胶层析法对乙肝两对半结果的影响分析[J].中国中医药咨讯，2011，3（6）：345.

（收稿日期：2013-03-28 本文编辑：郭静娟）