构树叶利尿活性研究
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本文为鄂州大学科研基金资助项目,项目编号:B200873002作者简介:吴世成,鄂州大学医学院讲师,一直从事药学教育。
【摘要】目的:研究构树叶利尿作用的物质基础。方法:采用大鼠代谢笼法。结果:构树叶乙醇提取物高剂量组(0.12mg・g-1)、中剂量组(0.06mg・g-1)、水提物组、氢氯噻嗪组(0.006mg・g-1)均有利尿作用。通过实验者尿中Na+、K+的测定,发现乙醇提物的利尿效果不及双氢氯噻嗪,但利尿的作用机制二者均为促进排钠利尿,同时也可增加排钾的作用。结论:构树叶有非常明显的利尿活性。
【关键词】构树叶;利尿;SD大鼠;排钠;排钾
doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.09.010文章编号:1006-1959(2010)-09-2307-02
构叶为桑科植物构树Broussonetiapapyrifera(L)vent.的叶。构树别名褚树、沙纸树、谷木、谷浆树、谷桑等。构叶性味甘凉,无毒。功用主治:凉血,利水。治通身水肿,治小儿赤白痢,治吐血、血崩、外伤出血等[1]。据本草考证:构树的果实、树叶、枝条、茎皮部乳汁和根皮均可入药,有利尿、补肾、健胃、消炎、凉血止血之功效[2]。其有效成分现知者有黄酮类、生物碱、木脂素、香豆素、萜、挥发油、脂肪酸、脂、氨基酸、矿物质及其他类化合物[3]。国内有其具有促进学习、改善记忆作用,抗血小板凝聚,抑制芳香化酶,抑制类脂氧化和血管平滑肌增殖,抑制蛋白酪氨酸磷酸酶1B,抑制酪氨酸酶,抗菌,抑制心房收缩力和钙拮抗等作用[4],但是关于其利尿的药理作用则尚未见有研究报告,为此我们对构叶利尿药理效应作了初步探索。
1.实验部分
1.1试药、仪器:构树叶为十月份采自鄂州的小山上,阴干。6400型火焰分光光度计(上海安锐)。ZH-B6型大小鼠代谢笼,淮北正华生物仪器有限公司。pHS-3C型精密pH计,上海雷磁仪器厂。XD-685全自动电解质仪,购自上海迅达公司。EYELA旋转蒸发仪,上海爱朗仪器有限公司。DSI-930BK+-Na+-Cl-分析仪,上海迅达医疗仪器公司;氢氯噻嗪(南通制药厂),氢氯噻嗪片,25mg,西南药业股份有限公司;95%乙醇,国药集团化学试剂有限公司;蒸馏水,实验室自制;氯化钠,昆明市宇斯药业有限责任公司。
1.2实验动物:成年SD大鼠(体重280±10g),雄性,质量,清洁级,购自同济大学医学院实验动物中心,标准鼠笼饲养,光照周期12/12h,相对湿度45%-50%,环境温度22℃-25℃。
1.3构树叶活性部位的提取与制备:取药材适量粉碎,过40目筛,用4倍体积的80%乙醇回流提取4次,提取液过滤后回收溶剂至干,提取物用0.9%NaCl溶液混悬,制成生药含量0.4mg/ml的给药溶液;再取药材适量粉碎,过40目筛,4倍体积的水煎煮4次,提取液浓缩至干,提取物用0.9%NaCl溶液混悬,制成生药含量0.4mg/ml的给药溶液。阳性对照药氢氯噻嗪,配成0.2mg/ml的0.9%NaCl溶液。
1.3.1构树叶水溶性部分的制备:称取构树叶饮片,常法加水煎煮3次,合并煎液,减压浓缩至1:1(生药1mg・ml-1),即得。
1.3.2构树叶脂溶性部分的制备:称取构树叶,加入95%乙醇,仔细研磨成1mg・ml-1的混悬液。
1.4利尿实验的方法与结果:
1.4.1构树叶的不同提取物对SD鼠利尿试验对大鼠尿量的影响:取48只SD大鼠,随机分为6组,每组8只,包括构树叶乙醇提取物高剂量组(0.12mg・g-1)、中剂量组(0.06mg・g-1)、低剂量组(0.02mg・g-1)、水提物组、氢氯噻嗪组(0.006mg・g-1)和对照组(生理盐水)。实验动物实验前24h禁食不禁水,均于给药前1h按5ml・kg-1体重灌胃38℃的生理盐水,作水负荷。给药前轻压大鼠的下腹部,以排尽膀胱中的尿液,再按0.02ml・g-1体重分别静注6组试验对象。给药后,立即将大鼠分别放入代谢笼内,收集其尿液,记录给药后4h内各组大鼠平均排尿量。同时测定4h内Na+、K+、Cl-的排出量[5-6]。
1.4.2实验数据进行方差分析,SPSS11.5软件统计,结果以-x±s表示。
1.5利尿实验的结果:
1.5.1构树叶对水负荷大鼠尿液离子含量的影响:以4h内排出离子的量(mg)计算大鼠尿液中的Na+、K+、Cl-离子含量。与空白组相比,给药氢氯噻嗪组4h内排出的Na+、K+、Cl-最多,差异有统计学意义(P
表2构树叶提取物对大鼠尿液中Na+、K+、Cl-含量的影响(x±s,n=8,mg/4h)
构树叶对水负荷大鼠尿液离子含量的影响。
与空白对照组比较,给予阳性对照药氢氯噻嗪的大鼠,在4h内排尿量显著增加(P
表4构树叶不同提取物对大鼠尿量的影响(n=8)
同对照组比较P
经t检验,乙醇提物低剂量组、对照(生理盐水)有显著性差异(P0.05),均有明显的利尿作用。
1.5.2统计学方法分析:实验数据进行方差分析,SPSS11.5软件统计,结果以-x±s表示。经统计软件SPSS10.0 for Windows分析,乙醇提物高剂量组、乙醇提物中剂量组、水提物组、氢氯噻嗪组组间差异不显著,即四组利尿效果无显著性差异,但醇提物低剂量组有显著性差异,这里有可能是决定利尿的活性物质水溶性和脂溶性都很好,也可能是有多种成分决定了其利尿活性,其中既有脂溶性成分,也有水溶性成分,至于到底是何种结果,有待以后的研究进行证实。
1.5.3尿中Na+、K+的测定:尿液中Na+、K+经火焰激发后,可发出特异的光谱。钠波长为589nm,钾波长为767nm,溶液中金属离子浓度越高,发射光谱愈强。火焰光度计利用光电管及检流计测定光的强度,被测离子的浓度与检流计读数成正比。测定尿钠时,精密吸取0.2ml尿样,加9.8ml去离子水;测定尿钾时,精密吸取0.5ml尿样,加9.5ml去离子水。检测稀释后的尿样并计算。尿样中浓度=C0×AX/A0×稀释倍数。式中,C0为标准液中Na+、K+的浓度,A0为标准液的读数,AX为尿样的读数。由尿中浓度的计算可知,乙醇提物的利尿效果不及双氢氯噻嗪,但利尿的作用机制二者均为促进排钠利尿,同时也可增加排钾的作用。
2.讨论
从结果可以看出,构树叶醇提物、水提物均有利尿作用。乙醇提物高剂量组、乙醇提物中剂量组、水提物组、氢氯噻嗪组组间差异不显著,即四组利尿效果无显著性差异,但醇提物低剂量组有显著性差异。通过实验者尿中Na+、K+的测定,发现乙醇提物的利尿效果不及双氢氯噻嗪,但利尿的作用机制二者均为促进排钠利尿,同时也可增加排钾的作用。至于构树叶中到底何种成分是导致其提取物具有利尿作用,有待于进一步的实验去确定。
参考文献
[1]全国中草药汇编编写组:《全国中草药汇编》(下册).人民卫生出版社,1978:363.
[2]秦路平,杨庆柱,辛海量.构树的本草考证及其药用价值[J].药学实践杂志,1999,17(4):254-255.
[3]冯卫生,李红伟,郑晓珂.构树化学成分的研究进展[J].中国新药杂志,2008,17(4):272-278.
[4]渠桂荣,张倩,李彩丽.构树的药理与临床作用研究述略[J].中医药学刊,2003,21(11):1810-1811.
[5]沙春方,洪静宜.三类离子电极法测定血清钾、钠、氯离子结果比较[J].河北医学,1999,5(7):92-93.
[6]黄爱军,施洋,顾光煜.常见阴离子对血清氯离子选择性电极法测定的影响[J].实用医技杂志,2003,10(10):1118-1119.