利胆汤对大鼠利胆作用的实验研究

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇利胆汤对大鼠利胆作用的实验研究范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

[摘要] 目的 观察利胆汤对Wistar大鼠的利胆作用。 方法 Wistar大鼠50只，每组10只，随机分为0.9%氯化钠组、胆宁片组[0.54 g/（kg·d）]、利胆汤低剂量组[6 g/（kg·d）]、中剂量组[12 g/（kg·d）]、高剂量组[24 g/（kg·d）]。各组均采用灌胃给药3 d后，测量胆总管引流后1、2、3、4 h各组的胆汁量，检测胆汁中总胆汁酸、总胆固醇和总胆红素的含量。 结果 利胆汤三个剂量组在不同时间段上的胆汁流量均比0.9%氯化钠组明显增加（P < 0.01），以高剂量组[24 g/（kg·d）]胆汁流量最多，较其他两个剂量组差异有统计学意义（P < 0.05）。胆宁片组和利胆汤三个剂量组，在各时间段均能增加总胆汁酸的含量和降低胆汁中的胆固醇和胆红素的含量，与0.9%氯化钠组相比，差异均有统计学意义（P < 0.05），但三个剂量组间胆汁成分含量差异无统计学意义（P > 0.05）。 结论 利胆汤三个剂量组对Wistar大鼠都有明显的利胆作用，明显增加胆汁中胆汁酸含量，降低胆固醇和胆红素的含量，以高剂量组作用最为明显，但三个剂量组间胆汁成分含量差异不明显。

[关键词] 利胆汤；利胆作用；总胆汁酸；总胆固醇；总胆红素

[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）12（b）-0021-03

胆结石是胆囊结石、胆总管结石、肝内胆管结石的总称，是外科临床上的常见病、多发病，其发病率有逐年上升的趋势。目前西医治疗多采用手术方法，但由于手术存在风险和并发症， 多数患者不愿接受或不能耐受手术治疗，而西药保守治疗的副作用较大且价格贵。近年来，中药治疗胆石症取得较好的疗效，具有副作用小、价格低廉等优点。利胆汤是北京中医药大学附属北京市中西医结合医院临床治疗胆石症的有效验方，经多年临床观察证实，对肝胆气滞型和肝胆湿热型胆囊结石均有较好的临床疗效[1]。本实验进一步观察利胆汤对Wistar大鼠的胆汁分泌量及胆汁中总胆汁酸（TBA）、总胆固醇（TC）和总胆红素（TB）含量的影响，探讨利胆汤的利胆作用，从转化医学角度为临床应用利胆汤治疗胆囊炎、胆石症提供理论依据。

1 仪器与试药

1.1 动物

选用雄性Wistar大鼠50只，SPF级，体重（260±20）g，由维通利华实验动物中心提供。

1.2 试剂和药品

利胆汤（组方：柴胡10 g，茵陈10 g，枳实10 g，木香10 g，金钱草10 g，白芍15 g，炙甘草10 g，厚朴10 g，大黄6 g，乌药10 g，川芎10 g）浓煎至生药含量1.2、2.4、4.8 g/mL，4℃保存备用，以上中药浓煎剂均由北京市中西医结合医院药剂科提供；胆宁片（规格：100#×0.36 g）批号：20120618，由上海和黄药业有限公司生产；TBA试剂盒，批号：20110822；TB试剂盒，批号：20110822；TC试剂盒，批号：20110822，均由上海华氏亚太生物制药有限公司提供。

1.3 仪器

日立7180全自动生化分析仪。

2 方法与结果

2.1 造模与给药

取Wistar大鼠50只，随机分成5组，即0.9%氯化钠组、胆宁片组[0.54 g/（kg·d）]、利胆汤低剂量组[6 g/（kg·d）]、中剂量组[12 g/（kg·d）]、高剂量组[24 g/（kg·d）]，每组各10只。各组均采用灌胃给药3 d后，实验前12 h禁食。实验时，大鼠用10%水合氯醛4 mL/kg腹腔注射麻醉后，仰卧固定于动物手术板上，于上腹部正中约3 cm切口，打开腹腔，在十二指肠降部肠系膜中找到白色透明韧性胆管，先分离出十二指肠端的胆管约2 cm，再向肝脏方向插入直径0.7 mm密闭式静脉留置针，结扎固定密闭式静脉留置针，拔出针芯，可见针管内有淡黄色胆汁流出，用1.0 mL离心管收集胆汁。待手术大鼠模型稳定20 min后，开始收集胆汁，每1小时收集1次，共收集4 h，并记录流量。

2.2 观察指标及测定

2.2.1 胆汁分泌量 各组分别于0～1 h、> 1～2 h，> 2～3 h，> 3～4 h共4个时间段收集胆汁，用注射器吸出全部胆汁，计量体积[5]。

2.2.2 胆汁生化测定 采用化学氧化法测定胆汁中TB；采用酶比色法测定TC含量；采用酶循环法测定TBA含量。

2.3 统计学方法

采用统计软件SPSS 17.0对实验数据进行分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，组间比较用单因素方差分析，采用t检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2.4 结果

2.4.1 利胆汤对大鼠胆汁流量的影响 利胆汤各剂量组在各个时间段的胆汁流量均高于0.9%氯化钠组，表明利胆汤能显著增加大鼠胆汁流量（P < 0.01），以高剂量组胆汁流量最多，较其他两个剂量组差异有统计学意义（P < 0.05）；胆宁片组明显增加大鼠胆汁流量（P < 0.01），效果低于利胆汤高剂量组。见表1。

2.4.2 利胆汤对大鼠胆汁成分的影响 与0.9%氯化钠溶液组比较，利胆汤高、中、低剂量组和胆宁片组，在不同的时间点上均可使TBA含量显著增加（P < 0.05）；利胆汤高、中、低剂量组和胆宁片组，在不同的时间点上均可使TC和TB含量显著降低（P < 0.01）；以高剂量组作用最为明显，但三个剂量组间胆汁成分含量差异不明显（P > 0.05）。表明利胆汤能增加胆汁中胆汁酸的含量，降低胆汁中胆固醇及胆红素的含量。见表2。

3 讨论

胆结石主要包括胆固醇结石和胆色素结石，其形成机制与胆汁成分的变化密切相关[6]。结石的形成包括胆汁成分的析出、沉淀、成核及积聚增长等基本过程。胆固醇结石的主要成分为胆固醇、胆汁酸和卵磷脂等，其形成机制为：①胆汁中的胆固醇过饱和；②胆固醇在胆汁中成核呈结晶状沉淀；③结晶体聚集和融合，遍布于胆囊壁的黏液、凝胶里，导致胆囊排空受损从而有利于胆固醇结石形成。总的来说，各种原因导致胆汁成分改变，是形成胆固醇结石的根本原因，胆固醇过饱和是胆固醇结石的必要条件。胆色素结石的主要成分为胆红素、少量钙盐和有机物（细菌、虫卵或上皮细胞）等，其形成机制，大多数人认为是由于胆汁中不溶性胆红素含量增加，钙盐过饱和，二者沉淀积聚形成胆红素结石。胆汁酸在胆汁中绝大部分以胆汁酸盐的形式存在，是重要的防石因素，胆汁酸的合成是以胆固醇为原料在肝细胞内进行、研究证实，当合成分泌到胆汁中的胆汁酸量减少，胆固醇分泌增加时，胆汁内胆固醇呈超饱和状态，易于结石的形成，因此胆汁中胆汁酸含量的相对和绝对降低是胆固醇结石形成的重要原因之一。利胆汤由柴胡、茵陈、枳实、木香、金钱草、白芍、炙甘草、厚朴、大黄、乌药和川芎等组成，具有利胆、行气止痛、清利湿热等功效[7]，柴胡解郁，茵陈、金钱草清热利湿、退黄消石，枳实、厚朴化痰散痞、下气除满，木香、乌药理气、顺气止痛，大黄清热泻火、降腑通肠，白芍、川芎柔肝止痛、活血行气，炙甘草调和诸药。临床观察发现利胆汤对肝胆湿热型胆囊结石、胆囊炎有明显疗效，可改善患者的临床症状，尤其是右胁肋和右上腹的疼痛伴舌苔黄腻者[8]。

本实验通过经Wistar大鼠胆总管插管，观察胆汁流量和检测胆汁中的化学成分为判断药物作用效果的指标[9-14]来研究利胆汤的利胆作用，得到了较好的利胆效果。实验结果显示，利胆汤具有较强的利胆作用，即增加胆汁流量和调节胆汁成分。从胆总管收集胆汁可反映胆汁的分泌与排泄量的变化。胆汁分泌及排放的多少与肝脏功能有关，本实验结果显示利胆汤能促进胆汁的分泌，提示其具有利胆作用。从胆汁成分的检测结果分析，本研究还发现，利胆汤能够促进胆汁酸的分泌，降低胆汁中TC和TB的含量，推测该药可能通过其利胆作用达到防治胆结石的作用。其利胆的机制可能有以下两方面原因：第一，利胆汤可以直接影响肝脏胆红素和胆固醇的合成和分泌，以降低胆汁中胆红素和胆固醇的含量；第二，利胆汤明显增加胆汁中胆汁酸的含量，可能与促进肝脏胆固醇向胆汁酸的转化有关。

综上分析， 利胆汤对Wistar大鼠有明显的利胆作用，并能够明显增加胆汁中胆汁酸含量，降低胆固醇和胆红素的含量，由此推测该药可能具有防治胆结石的作用，其机制具有进一步深入研究的价值。

[参考文献]

[1] 张晨光，封光男，李月廷，等.利胆汤治疗胆囊结石胆囊炎66例临床观察[J].医学综述，2011，17（8）：1270.

[2] 董培良，王和平，王建明，等.肝复康滴丸对大鼠利胆作用的实验研究[J].中国药师，2007，10（9）：848-849.

[3] 卫生部合理用药专家委员会.中国医师药师临床用药指南[M].重庆：重庆出版集团重庆出版社，2009：780.

[4] 徐叔云.药理实验方法学[M].3版.北京：人民卫生出版社，2006：1319.

[5] 姜志坑，瞿琼，周文豪，等.金钱对座合剂治疗胆石症的实验研究[J].中国中医药科技，2007，14（5）：339-340.

[6] 蔡端.胆石成因研究近况[J].国外医学：外科学分册，1981，8（2）：89.

[7] 张晨光，李月廷.中医药在胆结石预防和治疗中的应用[J].医学综述，2009，15（13）：2023-2026.

[8] 张晨光，封光男，李月廷，等.利胆汤对慢性胆囊炎湿热证舌苔的影响及临床观察[J].医学综述，2012，18（24）：4254-4255.

[9] 吴勃岩，高明，梁颖，等.利胆排石汤利胆作用的实验研究[J].中医药信息，2008，25（1）：71-73.

[10] 徐雪钰，魏萍，于珊，等.灵五颗粒利胆作用的实验研究[J].药学学报，2011，27（4）：328-330.

[11] 刘银花，梁利球，胡宗礼，等.溪黄草与虎杖煎剂利胆作用的实验研究[J].时珍国医国药，2009，20（7）：1626-1627.

[12] 张俊威，许庆瑞，姚琳，等.胆石消胶囊消石利胆作用的实验研究[J].中国中西医结合消化杂志，2012，20（8）：359-361.

[13] 张妙红，邓青，曾贵荣，等.肝康片利胆作用的实验研究[J].中医药导报，2012，18（1）：60-61.

[14] 葛军涛，李龙，魏延栋，等.哺乳期BALB/c小鼠胆道梗阻模型的探索[J].中国实验动物学报，2013，21（4）：35-37.

（收稿日期：2013-10-23 本文编辑：卫 轲）