血清VEGF水平与冠状动脉病变程度的临床研究

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中图分类号:R54 文献标识码 :A 文章编号:1009_816X(2010)04_0257_02

DOI:10.3969/j.issn.1009_816X.2010.04.02The Correlation between Serum Level of Vascular Endothelial Growth Fa ctor and Severity of Coronary Artery Stenosis.SUN Lin, ZHANG Ge, BAI Wen_wei, et al. Depar tment of cardiology, the 2nd Affiliated Hospital of Kunming Medical College, Yun nan 650101, China

[Abstract] ObjectiveTo study the correlation between serum level of vascularendothelial growth factor (VEGF) and severity of coronary artery stenosis.MethodsThis study included 114 patients with coronary haert disease (CHD group) and92 hearthy people (control group). The serum VEGF level was measured by ABC_ELI SA in all cases and was compared with the severity of coronary artery stenosi s. Results The level of VEGF in CHD group was significantly higher than that i n control group (141.17±19.94pg/ml Vs 17.73±6.45pg/ml, P

[Key words] VEGF; Coronary heart disease; Coronary artery le sion

冠心病严重威胁着人类的健康,国内外研究证实血管内皮细胞生长因子(vascular endothe lial growth factor, VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth fact or, bFGF)有强烈的促血管新生作用,能促进缺血心肌侧枝血管明显增加,在冠心病的治疗 方面有广阔的临床应用前景。

正常人血清中仅存在极低水平的vegf及bFGF,在病理情况下特别是在缺血缺氧时VEGF、bFGF 及其受体表达成倍增加,研究发现血清bFGF水平能在一定程度上反映冠状动脉病变程度[1] ,但血清VEGF水平与冠脉病变程度的关系尚不清楚,本研究通过测定冠心病患者血清VEGF的 浓度,并与冠脉造影结果进行对比分析,研究血清VEGF水平与冠状动脉病变程度的关系,探 讨在无外源性VEGF影响下,血清VEGF水平是否能成为反映冠脉病变程度的指标之一。

1 资料和方法

1.1 一般资料:选择临床符合WHO关于冠心病的诊断标准,冠脉造影证实有一支以上主要 冠状动脉狭窄≥50%的患者。排除标准:合并肿瘤、肝病、出血、感染,近期重大外伤及 手术史。冠心病组:114例,其中男75例,女39例,年龄52～67(60.7±11.6)岁。 冠心病合并原发性高血压患者32例,合并糖尿病患者22例,合并阻塞性呼吸睡眠暂停综合征 (OSAS)8例,同时合并高血压和糖尿病14例。对照组:92例,均为体检健康者,其中男60 例,女32例,年龄50～68(59.7±10.5)岁。两组性别、年龄无统计学差异,P> 0.05。

1.2 方法:所有研究对象空腹抽静脉血2ml,抗凝后分离血清,置于-20℃低温冰箱保存。V EG F试剂盒购于深圳晶美生物有限公司。采用双抗体夹心ABC_ELISA法测定血清VEGF的浓度。双 抗体夹心ABC_ELISA法原理如下:分别用抗人VEGF单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的V EGF与单抗结合,加入生物素化的抗人VEGF抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化 物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入酶底物OPD,出现黄色,加终止液硫酸,颜色 变深,在492nm处测OD值,VEGF浓度与OD值成正比,通过绘制标准曲线求出标本中的VEGF浓 度。

标准曲线绘制:以标准品VEGF 500、250、125、62、31、16、8、0pg/ml的OD值在半对数纸 上作图,画出标准曲线。根据样品OD值在该曲线图上查出相应VEGF含量。

1.3 统计学处理:所有数据采用统计程序包SPSS 10.0进行处理,计量资料应用均数±标 准 差(x-±s)表示,采用方差分析和均数 间两两比较的方法,两样本均数的比较采用t检验,以P

2 结果

2.1 冠心病组和对照组血清VEGF水平比较:见表1。

2.2 冠心病组单支、双支及三支血管病变患者血清VEGF水平比较:见表2。

2.3 冠心病合并原发性高血压患者,合并糖尿病患者,合并阻塞性呼吸睡眠暂停综合征( OSAS),同时合并高血压和糖尿病患者血清VEGF水平比较:见表3。

3 讨论

血管内皮细胞生长因子(VEGF)又称为血管通透因 子(vascular permeability factor, VPF)。VEGF的基因结构为交替剪接的8个外显子和7 个内含子组成,根据mRNA不同的剪切方式,编码VEGF的四种不同形式的蛋白质,分别由121 、165、185、206个氨基酸组成,因此VEGF有四种亚型:VEGF121、VEGF165、VEGF185、VEGF 206[2],大多情况下,以VEGF165表达为主。

VEGF的特异受体属于酪氨酸激酶受体家族,包括fms样酪氨酸激酶_1(FLT_1)和激酶结构域受 体/胎肝激酶_1(KDR/FLK_1),这两种受体主要分布在内皮细胞中。VEGF与受体结合特异作用 于内皮细胞,具有强烈的促血管内皮增殖作用,在体内显示有强大的促血管新生作用。VEGF 促血管形成机制:①促进血管内皮细胞的增殖;②促进内皮细胞的迁移;③促进具有降解基 底膜作用的蛋白激酶的释放;④促进内皮细胞形成管腔[3]。

冠心病患者由于冠状动脉发生不同程度的狭窄,导致心肌缺血缺氧,刺激VEGF分泌增加。本 研究结果显示冠心病患者血清VEGF水平明显高于健康者。冠心病并发高血压和(或)糖尿病 对血清VEGF水平并无直接影响,并发OSAS组血清VEGF水平升高,但与其他组比较无统计学差 异,分析可能与病例数较少有关。本研究结果显示血清中VEGF水平能较好反映心肌缺血程度 及其与冠状动脉病变程度的关系,冠脉狭窄程度越重,病变累及的血管越多,血清VEGF水平 越高,为临床了解心肌缺血程度和冠状动脉病变程度提供了一定的依据。

参考文献

[1]左明鲜,孙林,张戈,等.血清bFGF水平与冠状动脉病变程度的关系[J]. 中国心血管病研究,2008,6(4):252-253.

[2]Tischer E, Mitchell R, Hartman T, et al. The human gene for vascular endoth elial growth factor[J]. J Biol Chem,1991,266(18):I1947-1954.

[3]Schott RJ, Morrow LA. Growth factors and angiogenesis[J]. Cardiovasc Res ,1993,27(7):1155-1161.