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抗核抗体的检测及临床意义

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摘要 实验室的检查对自身免疫诊断是极其重要的,其中抗核抗体常常被用来肯定诊断疾病的条件之一,并且证明抗核抗体与某些疾病的致病机制有关。抗核抗体(ANA)是泛指一类具有抗各种核成分的抗体,它是一种自身抗体。

关键词 抗核抗体 分类意义 检测方法

ANA主要是LgM、LgA、LgD和LgE,它们因致病的不同而分布不同,ANA可以和不同来源的细胞核起反应,而无器官和种属特异性,它们除存在血清中,也可以存在其他的体液如滑膜液、胸水和尿液中,且可通过胎盘。

ANA的分类及临床意义

由于核抗原的不同,有多种不同的ANA。

抗白抗体:抗白抗体也称DNA抗体,核抗原是有DNA和组蛋白组成,该核抗原又有不溶性和可溶性两个部分,可分别产生相应的抗体,不溶性DNA抗体通常不完全被DNA或组蛋白所吸收,它是形成LE细胞的因子,可溶性可以存在于各种关节炎患者的滑液中,其相应抗体出现与RA患者的滑膜液中。

抗DNA抗体:抗DNA抗体包括两大类,即抗天然DNA(nDNA)抗体,或称抗双链DNA(dsDNA)抗体及抗变性(dDNA)抗体,或称抗单链(ssDNA)抗体。前者对SLE患者有较高的特异性,70%~90%活动期待SLE患者该抗体阳性,且效价较高并与疾病病情有关,后者可见于多种疾病中,无特异性。

抗ENA抗体:抗ENA抗体也称抗可提取的核抗原抗体,可以分为提取的核抗原(ENA),此抗原经盐水和磷酸缓冲液处理,易从胞核中提取出来,且不含DNA。近年研究表明,ENA可分为十几种,这里仅介绍6种主要的ENA及相应的抗体:①抗核糖白抗体(RNP),RNP抗原对核糖核酸酶敏感,抗RNP抗体多见于混合性结缔组织病,且高效价的抗RNA抗体对混合性结缔组织有诊断意义,而低效价的抗RNP抗体可在SLE患者中发现。②抗Sm抗体:该抗体可与可溶性糖蛋白起反应,抗原系非核酸糖蛋白。它对Dnase及Rnase不敏感,但经过碘酸盐及胰蛋白酶处理后可被水解。抗Sm抗体是SLE的特异性标志之一,阳性率30%~45%,在其他疾病中罕有阳性,它可能是SLE对一种回忆性抗体,故在非活动期亦可检出。如将抗dsDNA和Sm抗体同时检测,可提高SLE的诊断率。③抗SS-A抗体:被发现于干燥综合征(SS)的“A”抗原后而命名,主要见于SS,但也可见于其他自身免疫疾病如SLE中。④抗SS-B抗体:SS-B抗原从小牛胸腺及小牛和鼠肝提取,可被胰蛋白酶、轻度加热或改变溶液PH而破坏。13% SLE及30%SS患者有抗SS-B抗体。⑤抗SCL-70抗体:SCL-70抗原是拓扑异构酶I,它可使超螺旋DNA成为双链DNA,该抗体可影响DNA的复制。多见于PSS,是PSS标志性抗体。⑥抗PM-I抗体:抗原亦小牛胸腺核提取物,是多发性肌炎的特异性抗体。⑦抗组蛋白抗体(AHA)组蛋白是一种碱性蛋白质,含有稍高量的赖氨酸及精氨酸,目前已发现组蛋白抗原可分5个亚单位,即组蛋白亚单位H、H2A、H2B、H3、H4,抗组蛋白抗体及其抗亚单位抗体见于SLE及药物诱发的LE。SLE患者血清中抗组蛋白亚单位抗体检出率顺序为:抗2B、抗H1、抗H3、抗2A、及抗H4,以抗H2B和H1为主,并于SLE活动性有关。

抗核抗体的测定方法

由于ANA的复杂性和多样性,故测定方法繁多,目前ANA常用的方法有免疫荧光法、放射免疫法、酶联免疫吸附法、对流免疫电泳、免疫印迹法等。

免疫荧光法:1957年Frion首先应用免疫荧光法检测ANA,ANA的主要荧光核型分为四种核型对临床诊断有一定的参考价值。SLE患者常出现周边型、均质型或混合型。斑点型多见于混合型结缔组织病,而硬皮病多见于核仁型,周边型对SLE有较高的特异性。

同位素法可分为Farr法及放射免疫分析法,临床上常用Farr法。其特点是重复性好,可定量,以绝对单位表示测定结果;测定过程中抗原、抗体之间在液相中进行反应,反应完全、充分;其缺点是只能测高亲和力抗体。

酶联免疫吸附法:ELISA可用于大批量标本测定,目前被广泛应用。其特点是:无放射性同位素污染;不受非DNA结合蛋白影响;可测定不同型别的抗体;高、低亲和力抗体被同时测定。

总之,检测ANA无论用什么方法,主要因考虑两个方面,一是抗体的效价,二是抗体的型别,并且临床因将测定结果与疾病情况综合考虑,全面分析,对病情作出客观的判断。

参考文献

1 张孝骞.免疫学.上海:上海科学技出版社,1989.

2 沈玉清,等.临床免疫学.长春:吉林科技出版社,1987.

3 武建国.实用临床免疫学检验.南京:江苏科学技术出版社,1990.

4 杨延彬,尹学年.实用免疫学.长春:长春出版社,1994.