9种果实、种子类补益中药的核苷类成分分析

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摘要：目的：分析9种果实、种子类补益中药（枸杞子、大枣、桑椹、覆盆子、菟丝子、龙眼肉、核桃仁、五味子、韭菜子）中的核苷类成分。方法：采用高效液相色谱法，对9种补益中药的核苷成分进行测定、分析。结果：9种中药都含有大量的尿苷；只有大枣中含有环磷酸腺苷。所有药材中，桑椹中的核苷类成分含量最高，且远高于其他药材。结论：在9种果实、种子类补益中药中，普遍存在着核苷类成分，因植物基源的不同，核苷类成分的含量、组分也有所不同。核苷类成分的生物活性与药材的补益功效有着一定相关性，因此可将核苷类成分作为评价药材质量的一项指标。

关键词：核苷类成分；补益中药；高效液相色谱法

补益中药能纠正气血阴阳虚损、不足的病理状态，它是补虚扶正的一类药物[1]。据现代医学研究显示[2]，补益中药中含有的核苷类、氨基酸类、糖类、无机元素等水溶性成分，在药物补益功效中发挥着重要作用。核苷类成分，是生物细胞生存所必须的一类物质，其能调节免疫功能和中枢神经、促进脑细胞代谢等。日常生活中的食品添加剂、保健品、药品中都广泛应用到了核苷类成分[3]。本研究应用HPLC（高效液相色谱法），对9种果实、种子类补益中药：枸杞子、大枣、桑椹、覆盆子、菟丝子、龙眼肉、核桃仁、五味子、韭菜子中的核苷类成分进行了测定、分析，现报道如下。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

试验仪器：美国Waters 2695型高效液相色谱仪、Waters 2998型二极管阵列检测仪、Empower2色谱工作站；昆山市超声仪器有限公司的KQ-500B型超声波清洗机（150W）；北京赛多利斯BT 125D型电子天平；上海安亭GL-16G-Ⅱ型离心机；南京EPED纯水器。

试药：Sigma公司提供的尿嘧啶、胸苷、胞苷，纯度为98%；中国药品生物制品检定所提供的鸟嘌呤、尿苷、肌苷、鸟苷、腺嘌呤、环磷酸腺苷、腺苷。用以测定各成分含量使用。

实验药材均由中医药权威专家鉴定。

1.2 方法

采用高效液相色谱法，对9种补益中药的核苷成分进行测定。

色谱条件：250mm×4.6mm的C18色谱柱（5μm）。流动相：10mmol/L甲醇（A）+乙酸铵（B），梯度洗脱0～6min 1%A；6～15min（1～4%A）；15～25min（4～8%A）；25～60min（8～20%A）；60～68min（20～98%A）；68～77min（98%A）；77～79min（98%～1%A）。流量为0.5ml/min、柱温为30℃、波长为26nm、进样量为10μl。

制备混合对照品溶液及供试品溶液后，分别对药材的各项成分：尿嘧啶、鸟嘌呤、腺嘌呤、环磷酸腺苷、胞苷、肌苷、鸟苷、胸苷、腺苷、尿苷）进行测定。

2 结果

9种补益中药的核苷类成分测定结果，详见表1。由表1可知，9种中药都含有大量的鸟苷；只有大枣中含有环磷酸腺苷。所有药材中，桑椹中的核苷类成分含量最高，且远高于其他药材。

3 讨论

由于植物基源的不同，所以各类药材的核苷类成分及其含量有着显著差异。在本研究中，所测试的样品包含了各个演化阶段的植物类群的9种植物的药用部位，虽然样本数量较小，但测得的核苷类组分以及含量仍然有着较大差异，这表明了植物类群中的核苷类成分分布具有局限性、间断性特点[4]。

药材的补益功效与核苷类成分的生物活性有着一定相关性。本研究所选药材，均具有明确的中医临床功效，是为日常应用较多的补益中药。研究结果中，所有药材中都含有大量的尿苷成分，尿苷具有抗病毒、抗癌、增强抗体水平等作用。枸杞子、大枣、桑椹、龙眼肉中所含有的腺嘌呤，能促进白细胞增生，可有效防治放化疗所致的白细胞减少症。尿嘧啶在桑椹和龙眼肉中的含量最多，它是药材发挥补血、养血功效的重要物质基础。覆盆子、五味子、核桃仁、韭菜子、菟丝子中都含有腺苷，腺苷可对肾脏血流进行调节，控制肾素水平，还能对肾小球反馈系统加以调节，其与这些药物的补肾功效有一定关联。

在本研究中，分别对各种提取溶剂，包括浓度分别为10%、20%、30%、40%、50%的甲醇和纯水进行了比较，最终发现核苷类成分在纯水中的溶出率最高。将超声提取和加热提取进行比较，发现核苷类成分在超声方法下的提取量更高，所以最终采用了超声提取法。比较不同超声提取时间（30min、40min、50min）下的核苷类成分提取量，发现40min的提取量最高。故本次研究在纯水中采用了超声提取法进行提取（提取时间为40min）。

总之，在9种果实、种子类补益中药中，普遍存在着核苷类成分，因植物基源的不同，核苷类成分的含量、组分也有所不同。核苷类成分的生物活性与药材的补益功效有着一定相关性，因此可将核苷类成分作为评价药材质量的一项指标。

参考文献：

[1]孔德平，钱大玮，郭盛，段金廒. 9种果实、种子类补益中药的核苷类成分分析[J]. 中国实验方剂学杂志，2011，04：98-101.

[2]张元杰，钱正明，陈肖家，杨丰庆，李绍平. HPLC法同时测定补益中药中尿苷、腺嘌呤、鸟苷和腺苷的含量[J]. 药物分析杂志，2010，01：33-36.

[3]曹琰，严辉，段金廒，钱大玮，宋秉生，郭盛，何子清. 不同产地当归药材核苷类成分的分析[J]. 药物分析杂志，2010，11：2026-2030.

[4]李中桂，郭小华，曹丽萍，王新雨. 10个产地核桃仁中核苷类成分的含量测定[J]. 中国实验方剂学杂志，2013，10：145-148.