酶联免疫吸附法检测丙肝抗体假阳性一例分析

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【摘要】目的酶联免疫吸附法（ELISA）检测丙型肝炎病毒（HCV）抗体出现一例假阳性的原因分析。方法对一例用ELISA法测定HCV抗体阳性的标本进行HVC-RNA确证试验。结果ELISA法测该例HCV抗阳性的标本，用核酸扩增荧光基因法检测HCV-RNA为阴性。结论影响ELISA检测HCV抗体因素较多，因此，实验室对疑为HCV假阳性的标本应进行HCV-RNA检测。

【关键词】ELISA；HCV-RNA；HCV；假阳性

1资料与方法

2009年我院一住院患者检测HCV抗体阳性的标本。

2仪器与试剂

仪器Biocell2010自动酶联免疫检测仪判读结果，HCV抗体酶联免疫试剂盒由郑州安图生物有限公司和上海科华生物技术有限公司提供。DA-7600核酸扩增实时荧光基因分析仪。试剂：HCV-RNA测定试剂为达安基因股份有限公司产品。

3方法

将一例由郑州安图生物有限公司提供试剂盒ELISA法检测HCV抗体阳性而上海科华生物技术有限公司提供试剂盒ELISA法检测HCV抗体弱阳性的标本，用核酸扩增荧光基因法进行HCV-RNA检测。

4结果

对ELISA法检测丙肝抗体出现阳性或弱阳性的标本用核酸扩增荧光基因法进行HCV-RNA检测，结果为阴性。

5讨论

目前临床诊断丙型肝炎病毒（HCV）感染的方法主要是检测患者血清中HCV抗体，酶联免疫吸附法是临床进行HCV诊断的主要方法之一[1]，因其灵敏度高、特异性强、价格适宜，适于临床筛查试验，但影响试验因素较多，ELISA试验可能导致假阳性的结果，临床实验室应对HCV抗体弱阳性结果查找原因。

在实验中可能导致ELISA法假阳性的原因有以下几点：①标本质量：如标本溶血、贮存时间过长被细菌污染和标本凝固不全加样时吸到红细胞。②试剂盒质量：试剂盒的抗原不纯、酶结合物纯度低等。③操作质量：加样时间过长、恒温箱孵育时间过长、试剂溅出孔外等。④洗板：孔与孔之间液体交叉污染、洗板针堵塞、洗液量不足、洗板次数少等。

因此，实验室对弱阳性的标本要用不同厂家的试剂进行复查，对可疑标本的应进行HCV-RNA测定，以确保结果的可靠性。通过该例标本的检测，为给临床提供更准确可靠的结果，建议临床实验室人员在工作中应做到：①做好质控、阴性、阳性对照实验；②保证实验仪器的正常运转；③采用合格的血清标本；④加试剂时不要滴出孔外；⑤严格控制孵育时间，但适当延长反应时间，可提高阳性标本特别是弱阳性的检出率，对阴性标本无明显影响[2]；⑥使用同批号的试剂；⑦严格按试剂盒说明书进行操作。

参考文献

[1]洪秀华.临床微生物学检验[M].北京：中国医药科技出版社，2004：385.

[2]于洋，周诚，祁自柏，等.丙型肝炎病毒抗体诊断试剂的质量检测[J].中国生物制品杂志，2003，16（2）：108.