正交试验法优选椿白皮多酚提取工艺的研究

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇正交试验法优选椿白皮多酚提取工艺的研究范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

椿白皮为楝科植物香椿树皮或根皮的韧皮部,异名为香椿皮,春颠皮。椿白皮味苦涩、具有除热、燥湿、涩肠、止血及杀虫等功效,可治久泻、久痢、肠风便血崩漏带下、遗精、白浊、疳积、蛔虫以及疮癣等疾病[1]。目前的研究较少见[2-5]。椿白皮中含有丰富的多酚类成。植物多酚在抗诱变、抗肿瘤、抗病毒、抗微生物、抗衰老和抗氧化等很多方面常具有良好的/:请记住我站域名/作用[6]。

本文以正交试验法对椿白皮多酚提取工艺进行研究,为今后椿白皮的利用开发提供参考。

1 材料与仪器

1.1 试验材料 椿白皮Toona sinensis(A.Juss.) Roem采于贵州省兴义市郊,采收后自然晾干,粉碎。

1.2 试验试剂 没食子酸对照品(中国药品生物制品检定所);福林酚试剂(上海荔达生物科技有限公司);碳酸钠等试剂均为分析纯。

1.3 试验仪器 Sartorius BS 210S电子天平(赛多利斯);Thermo Scientific Evolution 201型紫外分光光度计(美国热电赛默飞世尔科技公司)。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备 精确称取没食子酸对照品0.02 g于100 mL容量瓶中,以70%乙醇定容至刻度,作为对照品溶液(0.2 mg/mL)。

2.2 标准曲线的建立 准确量取上述没食子酸对照品原液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL置于25 mL容量瓶中,70%乙醇定容,得系列梯度浓度的没食子酸对照溶液。精确吸取梯度浓度溶液各1 mL,以70%乙醇为空白对照,向各梯度对照液及空白对照中平行加入纯化水5 mL、福林酚试剂1 mL、10%碳酸钠溶液3 mL,室温下混匀放置2 h,757 nm波长测定吸光度,以对照品浓度为横坐标,吸光值为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程为y=10.915x+0.001 9,相关系数R=0.999 6。说明在0~0.048 mg/mL范围内没食子酸浓度与吸光度线性关系良好。

2.3 样品溶液的制备 椿白皮粉末先以石油醚脱脂,挥干溶剂准确称取1.0 g放入锥形瓶中,用乙醇浸泡0.5 h后超声提取,提取液转移至50 mL容量瓶中定容。取该提取液1 mL于100 mL容量瓶中,用70%定容至刻度,得到样品待测液。

2.4 样品的测定 精密移取1.0 mL样品,按对照品从“平行加入5 mL纯化水”起同法测定吸光度,计算提取率。

2.5 单因素试验 采用乙醇溶液作为提取液,用超声法处理样品,以椿白皮多酚提取率为指标分别考察提取时间、提取温度、乙醇浓度、料液比诸因素。

2.5.1 乙醇浓度对提取率的影响 取干燥粉碎椿白皮5份,每份1.00 g,分别置于40%、50%、60%、70%、80%乙醇溶液中,超声温度20 ℃,料液比1:20,提取1 h,计算椿白皮多酚得率分别为13.3%、14.7%、15.6%、14.9%、14.2%,结果表明60%乙醇为最佳浓度。 2.5.2 料液比对提取率的影响 取干燥粉碎椿白皮5份,每份1.00 g,分别置于料液比为1:20、1:25、1:30、1:35、1:40的60%乙醇溶液中,超声温度20 ℃,提取1 h,计算椿白皮多酚得率分别为14.5%、15.3%、15.6%、16.1%、15.7%,结果表明乙醇浓度1:30为最佳。

2.5.3 提取时间对提取率的影响 取干燥粉碎椿白皮5份,每份1.00 g,分别置于料液比1:30,乙醇浓度60%的乙醇中,超声温度20 ℃,分别提取0.5 h,1 h,1.5 h,2 h,2.5 h,计算椿白皮多酚得率分别为14.2%,14.9%,15.3%,15.0%,14.3%,结果表明提取时间1.5 h为最佳。

2.5.4 提取温度对提取率的影响 取干燥粉碎椿白皮5份,每份1.00 g,分别置于料液比1:30,乙醇浓度60%的乙醇中,分别提取温度为20 ℃,30℃,40 ℃,50 ℃,60 ℃,提取1.5 h,计算椿白皮多酚得率分别为14.2%、14.6%、15.0%、14.2%、13.5%,结果表明提取温度为40 ℃最佳。

2.6 正交试验 通过单因素试验结果,能大致推测出各提取条件较好水平,进一步以正交试验确定最佳提取工艺。 正交试验因素水平见表1,选用L9(34)正交试验表安排实验。 表1 正交试验因素和水平 因素水平 A乙醇浓度(%) B料液比 C提取时间(h) D提取温度(℃) 1 50 1:20 1 30 2 60 1:30 1.5 40 3 70 1:40 2 50

2.7 正交试验结果 由L9(34)正交试验表安排实验,9次试验提取率依次为12.7%、14.8%、15.2%、14.9%、15.5%、15.3%、13.4%、16.0%、15.1%。 椿白皮中多酚最佳提取工艺条件为A2B2C2D3,即乙醇浓度为60%,料液比为1:30,提取时间1.5 h,提取温度50 ℃。