针刺对肥胖大鼠脑干中缝核群单胺类神经递质作用的研究
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国家自然科学基金资助项目(39270838)
(1.南京总医院中医科，江苏210002；2.南京中医药大学)
[GK2!2]［摘 要］ 方法：用自制高热量饲料喂养刚断乳SD雄性大鼠造成肥胖模型。观察针刺对肥胖大鼠脑干中缝核群单胺类神经递质水平的影响。
结果：肥胖组较正常组中缝核群组织中色胺酸(Tryp)、5羟引哚乙酸(5HIAA)含量升高，5羟色胺(5HT)及5HT/5HIAA水平低下。针刺在取得减肥疗效的同时，还可以升高中缝核群组织中5HT及5HT/5HIAA水平，降低Tryp、5HIAA含量，针刺前后各组多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)水平均无显著变化。结论：针刺对中缝核群5HT及其代谢的良性调整作用可能是针刺减肥的因素之一。
［主题词］ 肥胖症/针灸疗法；中缝核/针灸效应；脑干/针灸效应；血清素/分析；羟基吲哚乙酸/分析
EffectsofAcupunctureonMonoamineNeurotransmittersinRapheNucleiintheratofObesity
WeiQunli1,LiuZhicheng
2(1.DepartmentofTCM,NanjingGeneralHospitalofNanjingMilitaryRegion,J
iangsu210002,China;2.NanjingUniversityofTCM)
［Abstract］ Purpose
Effectofacupunctureonmonoamineneurotransmittersinraphenucleiintheob
esiticmodelratwhichwasestablishedbyfeedinghighcaloricforageinthewea
nedSDmalerat.Results Thelevelsoftryptophan(Tryp)and5
hydroxyindoleaceticacid(5HIAA)increased,and5hydroxytryptamine(5
HT)leveland5HT/5HIAAratiodecreasedintheraphenu
cleioftheobesitygroupascomparedwithth
enormalgroup;andacupuncturecouldproduceweightreduction,atthesametim
e,itcouldincrease5HTleveland5HT/5
HIAAratioanddecreasecontentsofTrypand5
HIAA,butdidnotchangelevelsofdopamineandnoradrenaline.Conclusi
on Benignregulativeactionofacupunctureon5
HTanditsmetabolitesintheraphenucleiispossiblyoneoffactorsofacupunct
ureforweightreduction.
［KeyWords］
Obesity/acupther;RapheNuclei/acupeff;BrainStem/acupeff;Serotonin/an
al;Hydroxyindoleaceticacid/anal
为进一步认识中枢神经系统在肥胖病发生机制中的作用，及针刺对肥胖机体中枢神经系统的作用，笔者观察了实验性肥胖大鼠脑干中缝核群组织中单胺类神经递质水平及针刺后的变化，旨在揭示针刺减肥过程中针刺对肥胖机体中枢神经系统的作用机理。
1 材料与方法
1.1 实验动物
刚断乳SD雄性大鼠，体重50～60g，由实验动物中心提供。模型制备及实验分组：按文献［1］将刚断乳SD雄性大鼠随机分为2组，第1组用普通鼠饲料喂养，第2组用自制高热量饲料喂养。所有大鼠在造模期间自由摄食和饮水，饲料和水每日更换1次。喂养3个月后，以高热量饲料喂养SD雄性大鼠体重超过同时期普通饲料喂养大鼠平均体重的20%，作为单纯性肥胖病胃肠实热型肥胖大鼠，简称肥胖大鼠。将肥胖大鼠随机分为肥胖对照组(简称对照组)15只，不做任何治疗；针刺治疗组(简称针刺组)14只，给予针刺治疗。同时以普通鼠饲料喂养15只作为正常对照组(简称正常组)。
1.2 实验方法
实验期间各组大鼠均用普通鼠饲料喂养，自由摄食和饮水。3组大鼠均放入大鼠固定器中每日10min，连续14天。针刺组大鼠第15天开始治疗，连续治疗12天。其它2组操作同前14天，放入大鼠固定器中每日10min，连续12天，不予任何处理。
针刺方法：将大鼠放入固定器中，常规消毒"后三里"(相当足三里穴)和"内庭"穴，左右轮换，取36号美容针灸针(0.19mm×10mm)分别刺入4mm和2mm，"后三里"采用平补平泻手法运针1min，"内庭"用捻转泻法运针30s，然后接通电针仪(6805Ⅲ型，福建省医疗器械厂生产)，频率为10Hz，强度为1.5V的连续波，每次治疗10min，每日1次，连续12天。
1.3 检测方法
观察实验前后大鼠的摄食量、体重、体长和Lee氏指数(3体重(g)体长(cm)×103，体长：鼻至尾尖)等。实验结束后，置大鼠空腹过夜，次日上午断头处死，迅速分离心包、腹股沟和肾周脂肪，分别称重，记录重量。立即将分离的脑组织置于液氮中保存。
测定前取出脑组织置于冰盘上，按照包氏脑立体定位方法［2］前缘以四叠体前缘为界，后缘以小脑后缘为界切除，分离去小脑，然后以正中线为基准左右旁开0.45mm，重直切取中缝核群组织，称重后制成组织匀浆。中缝核群组织中Tryp，5HT，5HIAA，DA，NE含量等用荧光分光光度法测定［3］。
2 结果
2.1 针刺对肥胖大鼠摄食量的影响(见图1)
图1表明，针刺组大鼠摄食量下降，且明显低于对照组而接近正常组，表明针刺有降低肥胖大鼠摄食量的作用。
2.2 针刺对肥胖指标及脂肪量的影响(见表1、表2)
表1、表2显示，对照组肥胖指标及脂肪量均明显高于正常组(P均＜0.01)，说明造模成功。针刺组肥胖指标及脂肪量均显著低于对照组(均P＜0.01)，说明针刺有肯定的减肥作用。
2.3 针刺对中缝核群5HT代谢的影响(见表3、表4)
表3、表4显示，对照组Tryp，5HIAA均高于正常组(均P＜0.05)，5HT，5HT/5HIAA低于正常组(P＜0.001)。针刺组与对照组比较Tryp，5HIAA水平下降(均P＜0.05)，5HT及5HT/5HIAA水平回升(均P＜0.05)。说明针刺有调整肥胖大鼠中缝核群5HT代谢的作用。
2.4 针刺对中缝核群儿茶酚胺含量的影响(见表5)
注：各组间比较P＞0.05
表5显示，对照组、针刺组、正常组差异均无显著意义(P＞0.05)。说明针刺对中缝核群儿茶酚胺含量无影响。
3 讨论
脑干中缝核群是参与动物摄食行为的重要部位［4～6］。中缝核群通过其神经元与下丘脑饥饿中枢(LHA)和饱觉中枢(VMH)的联系对动物摄食行为产生影响。Stricker［4］认为5HT与NE对LHA的影响是相互制约的，即5HT含量的下降或NE的升高都可导致动物摄食行为增强，食欲亢进。Kruk［5］研究发现VMH兴奋与下丘脑5HT含量增高有关。本项目的前期研究结果证实肥胖大鼠LHA组织中NE含量升高，5HT水平低下，VMH放电频率降低。已知中枢5HT能神经元主要来自于中缝核群，且其神经元支配区域又以下丘脑最为丰富［6］。本实验结果肥胖大鼠中缝核群5HT含量和5HT/5HIAA水平降低，而其前体Tryp、代谢产物5HIAA水平升高，可能由于中缝核群功能的紊乱通过5HT能神经元影响了LHA，从而使大鼠摄食行为增强。说明中缝核群功能失调导致饥饿中枢功能紊乱可能是引起大鼠肥胖的重要原因之一。
针刺治疗后，5HT含量和5HT/5HIAA回升，代谢率提高，可能通过影响VMH功能而抑制了大鼠的摄食活动，减少了能量的摄入，从而实现了减肥效应。
本研究通过对肥胖大鼠中缝核群单胺类神经递质水平的观察及针刺对其影响，提示肥胖大鼠中缝核群功能失调可能是肥胖的重要发病环节，针刺对中缝核群功能的良性调整作用可能是针刺实现减肥效应的一个重要因素。
4 参考文献
1 刘志诚，孙凤岷，韩燕，等.针刺治疗单纯性肥胖症的实验研究.针刺研究，1998；23(1)：69
2 包新民，舒斯云.大鼠脑立体定位图谱.北京：人民卫生出版社，1991：59
3 陈奇.中药药理研究方法学.北京：人民卫生出版社，1993：903
4 StrikerEM.HandbookofBehavioralNeurobiology.Lthed.NewYorkPlenum,1989:329
5 KrukZL.Dopamineand5hydroxytryptamineInhibitintheFeedinginRets.NewBiol,1973；24(6):52
6 韩济生，吕国蔚，任麟孙，等.神经科学原理.北京：北京医科大学出版社：1999：519
(收稿日期：20010522，齐淑兰发稿)