黄柏及其炮制品对小鼠及大鼠胃肠功能的影响

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇黄柏及其炮制品对小鼠及大鼠胃肠功能的影响范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

摘 要：目的：研究黄柏及其不同炮制品对小鼠及大鼠胃肠功能的影响。方法：以黄柏及其不同炮制品的提取物灌胃，观察小鼠胃排空及小肠推进情况；观察不同药物对大鼠的胃液分泌情况的影响，用滴定法对大鼠的胃液的总酸度进行测定，用改良Mett氏法对大鼠的胃蛋白酶活性进行测定。结果：各给药组用药后小鼠胃排空能力下降；与生品组相比，其它各给药组的胃残留率皆有所下降，有显著性差异；但酒炙组和蜜炙组的胃肠推进率与空白组相比则没有显著性差异。与空白组比较，各给药组均能抑制大鼠胃液分泌，增加胃液的pH值，降低总酸度及总酸排出量，胃蛋白酶活性下降，差异显著；但酒炙组和蜜炙组对胃液量分泌的变化影响不显著。结论：在对动物胃肠运动和功能方面，黄柏及其不同炮制品并未明显的体现“酒炙治上，蜜炙治中，盐炙治下”的理论。

关键词：黄柏；胃肠功能；苦寒；胃蛋白酶

中图分类号：R285

文献标识码：A

文章编号：1673-7717(2008)03-0499-03

Effects on Mice and Rats' Gastrointestinal Frnction of Phellodendron Amurense and Its Different Processed Products

LIAN Lian，JIA Tian-zhu

(Liaoning Universary of Tradition Chinese Medecine，Dalian 116600，Liaoning，China)

Abstract：Objective：To study the Effects of mice and rats' gastrointestinal frnction on Phellodendron amurense and its different processed products.Methods：Decoction of Phellodendron amurense and its different processed products were fed to mice and rats，to observe the gastric emptying and gastrointestinal movement of mice；To determined the gasteic juice's acidity of rats by Titration，and the pepsin was measuerd by Mett's method. Result：After feeding with these different decoction， the gastric emptying descend .Compared with Phellodendron amurense group，the the amount of remnant in the stomach of the mouse were all obviously decreased.But wine group and honey group had no obviously difference. Compared with normal group，the other group can restrain gastric juice secretion，increase pH of gastric juice， obviously decrease acidity and and gastric acid secretion as well as the activity of pepsin.But the wine group and honey group had no obviously influnce on the account of gasteic iuice of rats.Conclusion：On the way of gastrointestinal movement and function， Phellodendron amurense and its different processed products had no obvious difference on"Processing with wine can cure upside，with honey cure central section and with salt cure underside".

Keywords：phellodendron amurense；gastrointestinal fruction；bitter-cold；pepsin

黄柏为芸香科植物黄檗Phellodendron amurense Rupr.或黄皮树Phellodendron chinenseSchneid.的干燥树皮。本品苦、寒。归肾、膀胱经。具有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮之效。黄柏始载于《神农本草经》，列为上品。已经有2000多年的药用历史，为中医传统的清热泻火药。中医传统理论历来有“苦寒药伤脾胃”之说，认为过量或久服苦寒药可致患者纳呆、呕吐、恶心、脘痞及乏力等[1]。传统的炮制理论认为黄柏“生品苦寒，酒炙治上，蜜炙治中，盐炙治下”。本实验拟从药物对小鼠及大鼠胃肠功能方面的影响说明黄柏及其不同炮制品在苦寒药效学方面的差异。

1 实验材料

1.1 药物

黄柏购自四川省药材公司，经辽宁中医药大学药用植物教研室王冰教授鉴定为芸香科植物黄皮树Phellodendron chinense Schneid.干燥树皮。

酒黄柏：每100g黄柏用20mL黄酒。蜜黄柏：每100g黄柏用20g炼蜜，加适量水稀释。盐黄柏：每100g黄柏丝用2g盐，用15mL水溶解。上述辅料喷入(或拌入)后，均闷润1h后炮制。

炮制条件：取上述各样品(清炒品直接取黄柏丝)各100g待锅预热至150℃投药，在140～150℃炒6min，即可。

水煎液制备：取各炮制品，加水煎煮2次，合并滤液，浓缩成每1mL相当于生药1g。放入冰箱中备用。

1.2 动物

昆明种小鼠，雄性，体重(24±2)g；SD大鼠，雌雄各半，体重180～200g。随机分组。以上动物均由大连医科大学实验动物中心提供。实验动物环境：清洁级。许可证号：SCXK(辽)2002-0002。

1.3 器材及试剂

直尺，手术剪，手术刀，手术镊，缝合线，注射器，电子天平，止血钳，滴定管，精密pH试纸(pH0.5～5.0)，离心机等。

麻醉用乙醚，酚酞指示剂，0.01mol/LNaOH滴定液，0.05mol/L盐酸溶液等。

半固体营养糊的制备[2]：取10g羧甲基纤维素钠(CMC)，溶于250mL蒸馏水中，分别加入 16g奶粉、8g糖、8g淀粉和2g活性炭末，搅拌均匀。配制成300mL约300g的黑色半固体糊状物。冰箱冷藏，用时恢复至室温。

1.4 统计学分析

计量数据均以±s表示，进行方差分析检验。

2 实验方法

2.1 黄柏及其不同炮制品对小鼠胃排空和小肠推进运动的影响[3]

取小鼠72只，随机分为6组，即生品组、酒炙组、蜜炙组、盐炙组和清炒组，另设空白对照组，每组12只。每组以20mL/(kg・d)剂量灌胃，空白组灌同体积的生理盐水。每天1次，连续8天。给药后每2天称1 次体重；观察并记录给药后动物的精神状况及一般行为变化。末次给药后禁食18h，每只鼠灌营养性半固体糊1mL。20min后脱臼处死小鼠，开腹，结扎胃贲门和幽门，取胃，用滤纸拭干后称全重。然后沿胃大弯剪开胃体，用生理盐水洗净内容物后拭干，称净重，计算胃内容物残留率(%)，判断胃排空情况。同时迅速取出小肠，轻轻剥离肠系膜后不加牵引将小肠平铺于白纸上，测量幽门至回盲部的小肠全长及幽门至黑色半固体糊前沿的距离，计算胃肠推进率(%)。

2.2 黄柏及其不同炮制品对大鼠胃液分泌的影响[2]

取大鼠36只，随机分为6组，每组6只。分组与给药剂量同上。每天灌胃1次，连续5天。末次给药后禁食24h(不禁水)。在乙醚麻醉下，将大鼠固定于手术台上，剪去腹部的毛，沿腹部正中线剪开小口，轻轻找到胃，结扎幽门，再由十二指肠给药1次，缝合腹壁切口，2h后拆线打开腹腔结扎贲门，摘取全胃，用滤纸擦净血迹，沿大弯侧剪开胃腔，倾出胃内容物，收集于刻度离心管中，记录胃液量，以精密pH试纸测胃内容物pH值，以2500r/min速度离心15min。

2.2.1胃液总酸度及总酸排出量的测定 取上清液1mL，加入蒸馏水5mL混匀，加入酚酞指示剂2滴，用NaOH滴定液(0.01 mol/ L)滴定，同时不断摇动，至红色消失， 继续滴定直至微红色不退为止， 记录所消耗的NaOH 溶液的总毫升数，计算胃液总酸度及1h总酸排出量。

总酸度(mmol/L)=耗去的NaOH溶液量(mL)×10

1h总酸排出量(mmol/h)=总酸度×胃液量/2

2.2.2 胃蛋白酶活性测定(改良Mett氏法)[4] 取内径为1mm的毛细玻璃管截成10cm长。洗净烘干，取适量鸡蛋清，充分搅匀后用2层纱布过滤。将毛细玻璃管利用虹吸作用灌满蛋清(内无气泡)后，置85 ℃恒温水浴中使蛋清凝固，制成蛋白管。冷却后，用石蜡将毛细管两端封固，置冰箱中备用。取上述大鼠胃上清液1mL至具塞试管中，加入0.05mol/L盐酸溶液15mL摇匀。每管中放入蛋白毛细管2根，塞好瓶口，于37℃的恒温箱培养24h后，取出毛细管，用游标卡尺测量毛细管两端透明部分的长度(mm)，求4端透明长度的平均值，计算胃蛋白酶活性。

胃蛋白酶活性(kU/L)=平均值2×16。

3 结 果

3.1 黄柏及不同炮制品对小鼠胃排空和小肠推进运动的影响

3.1.1 对动物一般情况及体重的影响 见表1。

6组动物给药后，动物普遍有少动，嗜睡，精神差的现象。其中黄柏生品组的动物有稀便现象。给药4天后生品组有2只动物死亡，解剖后发现死亡动物有严重的胃肠胀气现象。除空白组外，盐炙组体重仍继续增长，但较空白组缓慢；其余各药物组动物在给药4天后，则在已增长体重的基础上出现逐渐下降的现象，差异有显著性，特别是生品组，体重下降明显。但与生品组比较，蜜炙组和盐炙组体重则明显增加，有显著性差异。

3.1.2对胃排空及胃肠推进的影响 见表2。

根据结果可以看出，各组的胃残留率均较空白对照组高，统计学比较有显著性差异，表明各给药组用药后胃排空能力下降；与生品组相比，其它各给药组的胃残留率皆有所下降，并有显著性差异，表明黄柏的炮制品对小鼠的胃肠的刺激作用较生品小。各组给药第8 天后进行胃肠推进试验，结果表明：各组的胃肠推进率均较正常对照组有不同程度降低；但酒炙组和蜜炙组的胃肠推进率与空白组相比则没有显著性差异。与生品组比较，酒炙组、蜜炙组和盐炙组的胃肠推进率增加，差异有统计学意义；但清炒组的胃肠推进率与生品组比较则无显著性差异。

3.2 黄柏及其不同炮制品对大鼠胃液分泌的影响

见表3。

从表3可看出，与空白组比较，各给药组均能抑制胃液分泌，增加胃液的pH值，总酸度及总酸排出量均有不同程度的降低，胃蛋白酶活性下降，差异显著；但酒炙组和蜜炙组对胃液量分泌的变化影响不显著。与生品组相比较，各给药组的胃液pH值变化不明显；总酸度、总酸排出量及胃蛋白酶活性增加，差异性显著，但清炒组的胃蛋白酶活性则变化不明显。

4 讨 论

①黄柏为中医传统的清热泻火药，已经有2000多年的药用历史。历代医家在临床应用中十分重视对黄柏的炮制，记载和保存了炮制黄柏的丰富经验。黄柏的炮制最早见于晋代葛洪的《肘后备急方》，要求“细锉”后用。其后，各代医学文献均有论述。自晋代以来大量的医药文献中，计有净制、切制、蜜制、酒制、盐制、炭制、乳汁制、童便制等近20种炮制方法。李时珍在《本草纲目》中曰“黄柏生用苦寒，酒炙治上，蜜炙治中，盐炙治下……”2005年版《中华人民共和国药典》收载了盐制和炭制的方法。《中药大辞典》[2]除了收载上述两种炮制方法外，还有“酒制”的炮制方法。其它的各炮制方法现已不太常用。

②酒性味甘辛，大热。一般认为，药物经酒炮制后，能缓合药物的苦寒之性，免伤脾胃阳气，并可借酒升提之力引药上行；并有利于药物有效成分的溶出率。食盐性味咸寒，盐可引药下行，增强疗效，并增强药物滋阴降火的作用。蜂蜜性味甘平，入肺、脾、大肠经。有健胃和中、甘缓益脾的作用。

③现论认为“苦寒伤脾胃”的临床症状一般表现为食欲不振、消化不良、胃动力缺乏及胃肠功能紊乱等。胃液是消化道的重要的消化液，由胃黏膜中的壁细胞、主细胞和黏液细胞分泌，其主要成份是胃酸、胃蛋白酶、黏液以及钠和钾的氯化物等。通常我们所说的胃酸指的是游离酸即盐酸。胃内的盐酸有许多作用，其中之一就是激活胃蛋白酶原，使之转变为有活性的胃蛋白酶，并为胃蛋白酶的作用提供必要的酸性环境；而胃蛋白酶则能水解食物中的蛋白质，起到促进消化的作用[4]。

④从本文的实验结果可看出，生品组与空白组相比，小鼠体重增加缓慢，胃残留率升高，胃肠推进率下降，对大鼠的胃液分泌有较大影响，表现为胃液分泌量减少，胃液pH值降低，总酸度、总酸排出量及胃蛋白酶活性显著下降，似乎验证了黄柏“苦寒伤脾胃”的理论。而各给药组与空白组相比，其各种作用均出现了不同程度的缓合。蜜炙组和盐炙组对小鼠体重的影响与空白组相比，影响不大，认为蜂蜜具有营养作用，而小鼠食用盐以后，需要饮入更多的水以维持身体的等渗点。在胃残留率和小肠推进的实验中，蜜炙、酒炙和盐炙组与生品组相比，均表现出了明显的缓合作用。在对大鼠胃液分泌作用的影响实验中，蜜炙组与生品组相比，缓合作用最为明显。盐炙组也表现出了较明显的缓合作用，清炒组次之。黄柏中主要含有小檗碱等成分[5]，现代的炮制理论认为，黄柏经炮制后，小檗碱的含量呈下降趋势[6]，并认为小檗碱为黄柏“苦寒”作用的物质基础。从本实验的结果来看，也验证了此理论。但在对动物胃肠运动方面，并未体现“酒炙治上，蜜炙治中，盐炙治下”的理论。在以后的研究中，将会结合黄柏炮制前后化学成分的变化，对黄柏炮制的原理及炮制工艺进行研究。为临床用药提供理论基础，保证临床用药的安全和有效。

参考文献

[1]李希新. 对苦寒药伤胃的理论探讨[J].中国中药杂志，2001，26(11) ：792-794.

[2] 陈奇.中药药理研究方法学[M].2版.北京：人民卫生出版社，2006：437-440.

[3] 段长农，程宜福. 小鼠半固体法加活性炭测定胃排空[J].皖南医学院学报，2002，21(3)：184 -185.

[4] 闵琛，许春娣，奚容平，等。獐乳对大鼠小肠推进及胃酸、胃蛋白酶分泌影响的实验研究[J].中国儿童保健杂志，2005，13(5)：419-421.

[5] 《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社，1999：3775-3776.

[6] 崔九成，王，李锁红，等.黄柏的炮制研究[J].陕西中医学院学报，1999，22(5)：54.