糖肝消对糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠瘦素和肿瘤坏死因子―α的影响

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摘要：目的 观察糖肝消对糖尿病合并非酒精性脂肪肝大鼠瘦素、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响，并探讨其作用机制。方法 随机将60只正常雄性Wistar大鼠分为正常组、模型组、二甲双胍组和糖肝消高、中、低剂量组，每组10只。实验前适应性喂养3 d，腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型，继续高糖高脂饲料喂养8周，随机取3只糖尿病大鼠进行形态学观察，符合非酒精性脂肪肝（NAFLD）病理学改变，证实NAFLD模型制作成功。分别用糖肝消和二甲双胍灌胃，连续给药8周。观察治疗前后大鼠空腹血糖（FPG）、胰岛素（INS）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、瘦素、TNF-α的变化。结果 与模型组比较，糖肝消组及二甲双胍组大鼠FPG、INS、HOMA-IR、瘦素、TNF-α均明显降低（P0.05），糖肝消高剂量组上述指标均明显降低（P

关键词：糖肝消；糖尿病；非酒精性脂肪肝；瘦素；肿瘤坏死因子-α；大鼠

1.3 主要仪器

瘦素试剂盒（中国人民总医院科技开发中心放免所），胰岛素放射免疫分析药盒（上海瑞齐生物科技有限公司），TNF-α试剂盒（上海博研生物科技有限公司），稳豪型血糖仪及配套血糖试纸（美国强生公司），低温冰箱（青岛海尔集团有限公司），OLYMPUS AU2700全自动生化分析仪。

1.4 造模与分组

将60只健康Wistar大鼠根据随机数字表随机分为正常组、模型组、二甲双胍组及糖肝消高、中、低剂量组，每组10只。除正常组，其余5组大鼠分别按65 mg/kg体质量腹腔注射STZ，72 h后取尾静脉采血测血糖≥16.7 mol/L，确定建模成功纳入本实验。正常组予标准饲料喂养，其余5组均予高脂饲料（基础饲料、炼猪油、胆固醇粉、胆酸钠粉按87.5%、10.0%、2.0%、0.5%混合而成）喂养8周后，随机选取3只糖尿病大鼠进行形态学观察，符合NAFLD病理学改变[2]，证实NAFLD模型制作成功。

1.5 给药

据人和动物间按体表面积折算等效剂量比值，换算出糖肝消低、中、高剂量组每日分别给予糖肝消颗粒（将糖肝消颗粒用蒸馏水溶解为适当浓度悬浊液）1.80、4.37、8.16 g/mL。二甲双胍组每日给予二甲双胍粉末蒸馏水悬浊液69.16 mg/kg。正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃，连续8周。

1.6 标本采集

实验完全结束，大鼠禁食12～14 h，禁水2 h后，称重，以戊巴比妥钠（40 mg/kg体质量）腹腔麻醉，经腹主动脉取血20 mL，30 min内分离血清，置-70 ℃冰箱保存备用。

1.7 检测指标

应用全自动生化分析仪检测空腹血糖（FBG），计算胰岛素抵抗指数[（HOMA-IR）=（FBG×FINS）÷22.5]；采用放射免疫法，按试剂盒说明书检测空腹胰岛素（INS）、瘦素和TNF-α。

1.8 统计学方法

采用SPSS16.0统计软件进行分析。所有计量资料均用―x±s表示，多组间比较采用方差分析，组间两两比较用q检验。P

2 结果

2.1 一般情况

实验过程中除正常组外，其余4组大鼠均有死亡情况，其中模型组死亡2只，糖肝消中、高剂量组各死亡1只，低剂量组死亡2只，二甲双胍组死亡1只，最终进入结果分析大鼠53只。正常组大鼠体质量呈进行性增长，饮食、饮水正常，反应敏捷，眼光有神，毛发有光泽，粪便呈麦粒样，尿量正常。模型组大鼠腹腔注射STZ后，出现明显的多饮多尿现象，并逐渐出现精神萎靡，反应迟钝，眼光呆滞，毛发无光泽，粪便有时不成形。二甲双胍组及糖肝消中、高剂量组多饮多尿减轻，精神好转，但糖肝消低剂量组上述症状无明显改善。分析死亡原因可能与高血糖引起的酮症酸中毒及严重感染有关。

2.2 糖肝消对空腹血糖、胰岛素和胰岛素抵抗的影响

与正常组比较，各组大鼠FBG、FINS及HOMA-IR明显升高（P