醒脑静注射液对高血氨大鼠空间学习记忆能力的影响
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇醒脑静注射液对高血氨大鼠空间学习记忆能力的影响范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
（1.温州医学院附属第二医院感染中医病区，浙江 温州 325000； 2.温州医学院附属第一医院，浙江 温州 325000）
摘 要：目的：探讨醒脑静注射液对高血氨大鼠空间学习记忆功能的影响。方法：清洁级雄性SD大鼠30只，随机分为3组：A组 （正常对照组，n10）,B组（高血氨模型组，n10），C组（醒脑静治疗组，n10），Morris水迷宫观察动物空间学习记忆的变化。结果：与正常对照组比较，高血氨模型组及醒脑静治疗组大鼠血氨水平明显升高；但与高血氨模型组相比，醒脑静治疗组大鼠寻找障台的平均逃避潜伏期、游泳总距离均缩短。结论：醒脑静一定程度上改善了高血氨大鼠空间学习记忆能力。
关键词：醒脑静；血氨；水迷宫；学习记忆
中图分类号：R285.5文献标识码：A文章编号：1673-7717（2011）03-0585-03
Effect of Xingnaojing on Spatial Learning-and-Memory Ability
in Rats with Higher level Blood Ammonia
PAN Chen-wei1, PAN Zhen-zhen2,CHEN Yong-ping2，LIN Shi-yi1,ZHUGE Lu1,JIN Ling-xiang1
（1.2nd Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000,Zhejiang,China;
2.First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000,Zhejiang,China）
Abstract:Objective: To investigate Effect of Xingnaojing injection on spatial learning-and-Memory ability in rats with Higher level Blood ammonia. Methods:Thirty clean-grade SD （Sprague Dawley） male rats was divided into three groups randomly: A group （normal control, n10） andB group （Higher level Blood ammonia model, n10）and C group （treated by Xingnaojing injection, n10）.Then the rats were observed on variation of spatial learning-and-Memory through Morris water maze.Results:Compared with rats of normal control group, the ones in two other groups had higer level blood ammonia obviously; And compared with rats of Higher level Blood ammonia model groop, the ones treated by Xingnaojing show evidently improved performance of the test. Conclusion:Xingnaojing injection could improve spatial learning-and-Memory ability in rats with Higher level Blood ammonia.省略。
氨中毒学说在肝性脑病的发生机理中占有重要地位［1］，大量研究已明确其对中枢神经系统具有毒性作用［2］，其中包括导致空间学习记忆能力的下降［3］。醒脑静在临床上应用于肝性脑病患者具有缩短昏迷时间、促进清醒的作用［4］，但是醒脑静对肝性脑病患者的认知功能是否也有改善作用鲜见文献报道。本实验通过建立能反映肝性脑病部分特征的大鼠高血氨模型［3］，观察醒脑静对大鼠空间学习记忆的影响，为寻找改善肝性脑病患者空间学习记忆能力的方法提供实验依据。现报道如下。
1 材料和方法
1.1 主要材料 氯化铵（无锡市民丰试剂厂，批号：20070901）临前用生理盐水配制成5%溶液。醒脑静注射液（无锡山禾药业股份有限公司生产，批号：070403）。
1.2 动物分组与喂养 SD大鼠30只由温州医学院动物中心提供（许可证号：SCXK 浙2005-0019），体重200～240g，随机分为A组（正常对照组10只）和B组（高血氨模型组10只）C组（醒脑静治疗组10只）。所有大鼠均在室温恒定（20～25℃）及灯光昼夜节律控制（8：00～20：00）下清洁级喂养，自由进食、进水。
1.3 实验方法 A组：腹腔内注射生理盐水0.5mL/100g1次，1h后腹腔内再次注射生理盐水0.5mL/100g。B组：5%氯化铵按0.5mL/100g的剂量腹腔内注射，1h后腹腔内再次注射生理盐水0.5mL/100g，每周前4天每天1次。C组：在氯化铵溶液注射1h后腹腔注射醒脑静注射液0.1mL/100g。各组均为每周前4天给药，连续4周。于给药后1h 进行训练。
1.4 Morris水迷宫设置 Morris水迷宫由一直径130cm，高50cm的圆形水池组成，水深30cm，水温（25±1）℃。池壁上标有东南西北4个入水点,它们将水池等分为4个象限将水池分成4个象限,分别称SW、NW、SE及N E象限，在NW象限中央离池壁33cm处放置站台（直径为9cm,高29cm的圆形透明平台），浸没于水下2cm。水池周围贴有丰富的参照线索供大鼠用来定位平台。迷宫上方装有摄像头，大鼠行程可被记录下来。训练期间迷宫外参照物保持不变。
1.5 Morris水迷宫实验 实验前各组大鼠称量体重。实验共进行5天，第1天让大鼠自由游泳2min；从第2天起，每天分上、下午两段,每段训练4次，大鼠面向池壁按顺序从4个入水点点放入池中，观察大鼠寻找并爬上平台情况。每次大鼠到达平台后，在平台上休息30s。第5天最后一次训练，记录大鼠寻找并爬上平台的路线图、所需时间（潜伏期）。如果在120s内大鼠仍未能找到平台，则将其引导到平台，潜伏期记为120s。各统计数据由上海吉量软件自动分析生成。学习记忆成绩用两个参数反映：平均逃避潜伏期（mean escape latency）和游泳总距离（swim path distance）。
1.6 血游离氨的测定 行为实验后,大鼠经用10%水合氯醛（4mL/kg）腹腔麻醉，经下腔静脉采血，血标本肝素抗凝，放入EP管中加盖，低温离心5min，取血浆经强生VITRO S350生化分析仪测定血氨含量。
1.7 统计学处理 全部数据经SPSS 13.0统计软件进行分析,实验数据均以（±s）表示，经正态性检验后，两组比较采用方差分析，检验显著水平为P
2 结 果
2.1 大体观察 各实验组大鼠试验前后体重和增加体重差异无显著性，且在Morris水迷宫内游泳姿势基本正常。
2.2 各组大鼠血氨水平的比较 与A组比较，B组、C组大鼠血氨水平明显升高（P
表1两组大鼠的血氨水平（±s）
注：“*”与A组比，P
2.3 各组大鼠空间学习记忆参数的比较 与A组比较，B组大鼠在Morris水迷宫空间学习记忆能力下降：平均逃避潜伏期延长（P
表2 各组的平均逃避潜伏期和平均游泳总路程（±s）
注：“*”与A组比，P
3 讨 论
脑细胞对氨极敏感，氨对中枢神经系统的毒性作用主要是干扰脑的能量代谢，引起高能磷酸化合物浓度降低。血氨过高一方面抑制丙酮酸脱氢酶活性，从而影响乙酰辅酶A的生成，干扰脑中三羧酸循环；另一方面氨在大脑的去毒过程中需消耗大量的α酮戊二酸和谷氨酸，而α酮戊二酸是三羧酸循环中的重要中间产物，缺少则使大脑细胞的能量供应不足，以致不能维持正常功能；谷氨酸是大脑的重要兴奋性神经递质，缺少则大脑抑制增加。新近研究认为氨的毒性还体现在它直接作用于神经膜，可引起突触后抑制［5］。本实验中，大鼠高血氨模型通过多次经腹腔注射小剂量氯化铵建立，使得氨经腹腔血管吸收，超过肝脏的代谢能力，从而使得血氨升高，如表1所示：与正常对照组比较，其他两组大鼠血氨水平明显升高。但同时大鼠基本活动能力无明显影响，结果也显示了高血氨大鼠在Morris水迷宫内游泳姿势基本正常，使之更好地为之后的水迷宫行为检测做准备。
学习是神经系统接受环境的变化而获得新行为习惯的过程，记忆是学习后经验的储存和保持。目前学习记忆的动物模型基本包括两个方面：一是防御性回避学习，包括梭箱、爬杆、电击等；二是辨别性学习，包括各类迷宫。本实验采用的Morris水迷宫有其明显的优越性，它将防御性回避作为驱动力，同时又充分发挥其辨别性学习的能动性［6］。并结合特定的迷宫及摄像系统、正确的训练程序和专用的统计软件，使学习记忆实验研究的观测较全面，同时测量精度较好，在此基础上对高血氨影响学习记忆行为的研究有一定的意义。在本实验中，高血氨模型组大鼠逃避潜伏期及搜索距离均较正常对照组明显延长，表明大鼠出现空间学习记忆能力下降。通过该试验表明，高血氨大鼠血氨水平显著升高与其表现出的学习记忆功能下降具有十分密切的关系，可能与氨对神经系统毒性作用有关。
对于肝性脑病患者，血氨升高导致大脑代谢及神经功能紊乱，产生微循环障碍，不仅影响学习认知等功能，引起意识错乱、行为失常等，并且常伴有头痛、头晕等一系列神经功能障碍症状。从中医角度看，肝性脑病为阴阳失调，气机逆乱，痰浊瘀热扰乱心神所致。病至此阶段，一般病程较久，久病则入络，该疾病均存在一定程度的血脉不畅、血络瘀滞状态。醒脑静注射液，主要成分为麝香、冰片、郁金、栀子等，其中麝香辛温香窜、辟秽通络、活血散瘀；冰片气味芳香，与麝香一同辛香走串，善于透过血脑屏障，开窍醒神，泄浊排毒；郁金辛苦寒，善于行气活血，清心解郁，并能利胆退黄，尤宜于治疗肝性脑病神志、精神改变；栀子苦寒，善清三焦火毒从小便而解。四药合用，以开窍醒脑，安神定志，清热解毒，活血行气。药理研究表明，醒脑静有效成分易于通过血脑屏障，直接作用于神经细胞而发挥作用，并且抑制炎症反应和炎症介质的释放，以及清除氧自由基，从而保护组织细胞［7-8］。因此，醒脑静在肝性脑病的临床治疗中对于改善头痛头晕、认知障碍等症状方面起到了较好的疗效。在醒脑静改善记忆方面，有研究使用醒脑静治疗乙醇所致记忆障碍的大鼠，结果提示醒脑静对大鼠的记忆功能确有改善作用；更有学者提出，醒脑静不仅可能对中枢胆碱能系统有一定影响而促进记忆功能,但更主要的是通过对脑组织的保护作用而防止各种因素所造成的记忆损害［9-10］。
在本试验中，经醒脑静治疗的高血氨大鼠平均逃避潜伏期缩短（P
通过本试验，证实了醒脑静在一定程度上改善了大鼠的空间学习记忆能力，其内在分子机制有待进一步深入探讨。
参考文献
［1］ 王宇明. 肝性脑病的定义、命名和诊断［J］. 中华肝脏病杂志,2004 ,12 （5） :305-306.
［2］ Hindfelt B, Plum F, Duffy TE. Effect of acute ammonia intoxication on cerebral metabolism in rats with portacavalshunts［J］. J Clin Invest,1977,55:386-396.
［3］ 潘陈为，潘珍珍，金玲湘，等.血氨升高对大鼠空间学习记忆能力的影响［J］.温州医学院学报，2009，39（5）: 462-463.
［4］ 张波.醒脑静注射液治疗肝性脑病疗效观察［J］.中国中医急症，2006,15（4）:384.
［5］ Watabe AM, Carlisle HJ, O'Dell TJ.Postsynaptic induction and presynaptic expression of group 1 mGluR-dependent LTD in the hippocampal CA1 region［J］. J Neurophysiol，2002,87（3）:1395-403.
［6］ Gozal D, Daniel JM, Dohanich GP. Behavioral and Anatomical Correlates of Chronic Episodic Hypoxia during Sleep in the Rat ［J］. J Neuroscience , 2001, 21（7）:24422450.
［7］ 齐文杰，任爱民，张淑文，等.血清促炎、抗炎因子在急性感染患者中的动态变化及中药干预的影响［J］.中国中西医结合杂志，2000,20（11）:824-827.
［8］ 陈庆明.醒脑静注射液药理基础与临床应用［J］.中国中西医结合急救杂志，1999,6（4）: 191-192.
［9］ 周红宇,胡国新,胡爱萍，等.醒脑静注射液对乙醇所致记忆功能障碍的影响 ［J］.中国临床药理学与治疗学，2004, 9 （1）: 10-111.
［10］ 〖ZK（〗周红字,胡国新,林丹，等.醒脑静注射液促记忆作用的研究［J］.中药药理与临床，2003,19 （3）: 32-33.