PTEN蛋白和P在喉癌中的表达及意义

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[摘要]目的：通过对pten、P16在喉癌中表达的检测，探讨它们与喉癌不同的病理分级和临床分期的关系，及两者的相关性，从而对临床工作起一定的指导作用。方法：用免疫组织化学检测40例喉癌石蜡标本和10例喉部正常黏膜中PTEN和P16蛋白的表达，并分析上述指标与喉癌病理分期和临床分期的关系及两者在喉癌表达的相关性。结果：PTEN在喉癌中的异常表达率为62.5％，对照组中阳性表达率为100％，差异有显著意义（P

[关键词]喉癌；PTEN；P16；免疫组化

[Abstract] Objective:To observe the expression and clinical significance of PTEN and P16 protein in tissues of laryngeal carcinoma .Methods To investigate the expression of PTEN and P16 protein in 40 Laryngeal carcinoma by immunohistochemistry method(PV9000).Ten polyp of vocal cord served as control Results The positive expression rate of PTEN and P16 respectively was 62.5％、62.5％in Laryngeal carcinoma,100％、0.00％ in comparative group and the statistical difference was significant.(P

[Key words] Laryngeal carcinoma;PTEN;P16;immunohistochemistry

癌基因的激活和抑癌基因的失活在肿瘤的发生、发展中期重要作用。PTEN是一个具有双特异的磷酸酯酶活性的抑癌基因，在人体内的多种肿瘤发生和发展密切，其在喉癌中的表达研究不多，而与P16的表达关系尚未见报道。P16基因是一种新型的抑癌基因，目前在多种肿瘤细胞体系中，发现75％的细胞有P16基因的缺失和突变，预示P16基因在肿瘤的发生和发展中起重要作用。本实验旨在通过检测PTEN、P16蛋白在喉癌中的表达，探讨其与喉癌临床特征的关系，及两者的相关性。

1.材料与方法

1.1临床资料收集潍坊人民医院2005年-2010年手术治疗的不同分期、分级的喉癌患者40例，均为首次手术，经病理证实为鳞状细胞癌，术前均没进行放疗和化疗，取癌灶中心组织经10％中性甲醛固定，常规石蜡包埋，4微米厚切片，并取10例后正常粘膜作对照。40例中，男性35例，女5例；年龄39岁-76岁，声门上型9例，声门型31例；临床分期按2002年美国联合会（AJCC）分期方案进行，其中TNM10例，TNM8例，TNM4例，病理学分级：高分化鳞状细胞癌，中分化鳞状细胞癌，低分化鳞状细胞癌。全部患者行手术治疗，喉全切，喉扩大全切，喉部分别切除，颈清扫术，经病理证实有淋巴转移。

1.2材料P-V9000试剂盒、鼠抗人PTEN单克隆抗体、鼠抗人P16抗体，均为北京中山生物技术公司提供

1.3方法P16和PTEN检测采用免疫组织化学P-V9000法

1.4阳性染色判定结果切片均在显微镜下观察，组织未着色者0分，黄色1分，棕黄色2分，黄褐色3分。阳性细胞所占比例的评定标准：阳性细胞数

1.5统计学处理所得的数据，应用spss16.0统计学软件进行分析。

2.结果

2.1PTEN在喉癌的表达PTEN蛋白阳性染色产物主要定位于细胞核，成弥漫性黄色至黄褐色颗粒，PTEN在喉癌中的表达率为62.5％，对照组中阳性表达率为100.00％，差异有显著意义（P

PTEN的表达在喉鳞状细胞癌患者的不同病理分级（G1，G2，G3）.临床分期（1-23-4）及有无颈淋巴结转移组间差异均有显著性（P均

2.2P16在喉癌中的表达P16蛋白阳性染色产物主要定于细胞核，呈弥漫性黄褐色颗粒。在40例喉癌标本中，25例P16蛋白表达阳性，占60％，在对照组中阳性表达率为0.00％，两者差异有显著性（P

2.3PTEN和P16在喉癌组织中表达的关系

喉鳞癌组织中PTEN表达和P16表达呈负相关，25例PTEN阳性表达者中15例P16表达阴性，而15例阴性表达中13例阳性。（P

3.讨论

3.1 PTEN的抑癌机制及其在喉癌组织中的表达

PTEN是具有磷酸酶活性的抑癌基因，其编码的蛋白质的主要功能是参与细胞增殖和凋亡过程中所生的去磷酸化作用。本研究对喉癌组织中PTEN的表达进行检测，结果显示其蛋白质表达产物位于细胞核。PTEN蛋白在喉癌组织中表达率减低和表达减弱，，在对照组中均为强阳性表达，两组间差别有显著意义。PTEN的表达与喉癌的不同病理分级，临床分期，T分级，淋巴结转移均有相关性，并随肿瘤的G分级，T分级，临床分期的增高及淋巴结的转移，PTEN表达水平出现相应减弱（见表1），同时PTEN的表达与性别，年龄无关。以上结果提示PTEN的表达率降低与喉癌的发生，发展，浸润和转移有关。

P16是抑癌基因，在人类大多数肿瘤中均检测到p16突变或缺失。本实验中P16定位于细胞核，P16蛋白在喉癌组织中阳性表达率为62.5％，与对照组间差异有显著意义。P16的表达与喉癌的不同病理分级，临床分期，T分级，淋巴结转移有相关性，并随着肿瘤的G分级，T分级，临床分期的增高及淋巴结转移。P16的阳性率表达增加（见表1），同时，P16的表达与性别，年龄无关。以上结果提示，P16表达率的升高与喉癌的发生，发展，浸润，转移有关。

3.2 PTEN与P16在肿瘤的协同作用

PTEN通过其磷酸酶的活性与其他抑癌基因协同，上调抑癌因子及下调促肿瘤因子的表达发挥抑瘤作用。正常P16功能受自身含量及是否磷酸化的影响，其磷酸化后，抑制DNA作用增强，在P16诱导细胞凋亡过程中，当PTEN突变后P16磷酸化化水平降低，抑癌作用减弱。

本实验显示15例PTEN表达阴性的喉癌标本中有13例p16表达阳性，仅有2例表达阴性，PTEN表达与P16在喉鳞癌组织中的表达呈明显的负相关，PTEN的失表达与P16的高表达在喉癌组织中同时发生，提示PTEN与P16的变异可能协同促进喉癌的发生，发展。

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