氨基酸态氮检测的完善
开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇氨基酸态氮检测的完善范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！
摘要：本文在国家标准GB 18186-2000 氨基酸态氮检测的基础上，结合自己的工作实际在标准滴定溶液标定及氢氧化钠标准溶液测定时滴定速度、仪器校正提出了完善方法。
关键词： 氨基酸态氮 检测 完善
前言：
氨基酸是蛋白质在酿造过程中的主要产物之一，是酱油这个调味品鲜味的主要来源，现在的酱油一般在食品标签一般只标明氨基酸态氮这个指标，充分说明了氨基酸的重要性，准确无误检测氨基酸态氮已经成为检测工作最迫切的问题。笔者结合自己的工作实际在标准滴定溶液标定及氢氧化钠标准溶液测定时滴定速度、仪器校正提出了完善方法。不当之处，敬请广大专家学者批评指正。
1、试剂
1.1 蒸馏水 GB/T 6682-2008 三级水要求；
1.2 氢氧化钠 分析纯；
1.3 邻苯二甲酸氢钾，基准；
1.4 酚酞 10 g/1L，称取1.0 g分析纯酚酞；
1.5 乙醇 95%，分析纯；
1.6 甲醛溶液，37～40%。
2、设备及仪器
2.1 分析天平：感量0.1 m g，量程0～200 g；
2.2 碱式滴定管：25m L，25m L；
2.3 酸度计，附磁力搅拌器；
2.4 秒表。
2.5 温湿度计
2.6 空调，能够保证实验室温度在20±2℃
2.7 除湿机，能够保证房间湿度在60～70%RH；
2.8 容量瓶，100m L，500 m L；
2.9 烧杯，200m L；
2.10 移液管 5m L，10 m L，20 m L，50 m L.
3、分析步骤及评论
3.1 氢氧化钠标准滴定溶液配制
称取110 g氢氧化钠，溶于100 ml无二氧化碳的水中，摇匀，注入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液。按表1的规定，用塑料管量取上层清液，用无二氧化碳的水稀释至1 000ML，摇匀。
表1
氢氧化钠标准滴定溶液的浓度[c（NaOH）] mol/L） 氢氧化钠溶液的体积V/mL
0.1 5.4
0.05 2.7
3. 2 标定
按表 2 的规定称取于 105`C--110℃电烘箱中干燥至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾，加无二氧化碳的水溶解，加2滴酚酞指示液（10 g/1L），用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，并保持30 s。同时做空白试验。
表2
氢氧化钠标准滴定溶液的浓度[c（NaOH）]/（mol/L） 邻苯二甲酸氢钾的质量，/g 无二氧化碳水的体积V，ML
0.1 0.75 50
0.5 0.38 50
3.3 分析步骤
吸取 5.0 m L样品，置于100m L容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取 20.0 m L，置于200m L烧杯中，加 60m L水，开动磁力搅拌器，用氢氧化钠标准溶液[c（NaOH）= 0 .0 5m ol/L]滴定至酸度计指示
pH=8.2 〔记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（（0.05 m ol/L）的毫升数，可计算总酸含量〕。加入 10 .0 m L甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液（0.0 5m ol/L）继续滴定至pH=9.2 ，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05 m ol/L）的毫升数。同 时取 80m L水，先用氢氧化钠溶液（0.0 5m ol/L）调节pH为8.2，再加入10.0 m L甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定溶液（0.05 m ol/L）滴定至pH=9.2 ，同时做试剂空白试验。
3.4 分析与评论
3.4.1 氢氧化钠标准溶液标定
氢氧化钠标准滴定溶液是一种比较难以准确标定的溶液，这是由于三个方面的缘故。其一，氢氧化钠溶液体积影响。在滴定时笔者发现氢氧化钠溶液的体积不多，其滴定体积为35mL左右，体积越少其相对误差就越大，难以达到重复性临界极差在0.18%之内。笔者在实践中，发现当滴定体积在50～75mL时可以满足这个要求，则其称量的基准邻苯二甲酸氢钾为1～1.5g。其二，酚酞指示液的影响。标准规定滴定终点是微红色，而在实际操作之中，那种颜色才是微红色，由于每个人都有自己的见解，这就必然导致每个人对终点的判断在在不同，这就必然影响最终的滴定结果。介于此，笔者建议有条件的，最好用酸度计来指示终点。其三，温度及湿度的影响。众所周知，温度对水及溶液的体积在在影响，有的用校正公式进行校正，而校正公式是经验公式，计算起来比较麻烦。而湿度太干燥或者太闷热都会影响操作者的情绪及心情，当然会对检测结果造成影响。因此，笔者建议，在有条件的情况下，最好用空调及除湿机达到相应的要求。
3.4.2样品分析步骤
这个步骤对检测结果影响有三个方面。第一，滴定速度。由于酸度计是用复合电极来测定溶液的PH值的。而复合电极的外面是玻璃膜，反应速度就不如指示剂那样灵敏，如果滴定速度过快，其结果会导致检测数据偏高；如果滴定速度过慢，会导致检测结果偏低。笔者经过长期实践，建议滴定速度控制在1～2秒为宜。第二，搅拌速度的影响。标准溶液滴进样品溶液之后，只有通过搅拌充分混匀之后才能进行酸碱反应。磁力搅拌器的搅拌如果速度过慢，会影响反应速度与进程；如果搅拌速度过快，或者会导致溶液从烧杯飞溅出来让结果不准确，或者会搅拌不充分让酸碱不能充分中和反应影响检测结果。因此，搅拌的速度非常重要。第三，溶液的PH值是与温度有关的。如果酸度计的校正或者标定的温度与滴定的温度不一致也会影响检测结果准确性。因此建议，酸度计的校正、标定及滴定温度最好控制在20±2℃。
4、标准溶液标定及检测步骤完善如下：
4.1 氢氧化钠标准溶液标定
4.1.1 酚酞法
在空调与除湿机控制温度20±2℃环境的实验室里，称取于 105`C--110℃电烘箱中干燥至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾1～1.5g，加无二氧化碳的水溶解，加2滴酚酞指示液（10 g/1L），用50 m L0配制好标准溶液加入试剂之中，混匀，然后继续用配制好的氢氧化钠溶液滴定至溶液呈粉红色，并保持30 s。同时做空白试验。
4.1.2 酸度计法
在空调与除湿机控制温度20±2℃环境的实验室里，称取于 105`C--110℃电烘箱中干燥至恒重的工作基准试剂邻苯二甲酸氢钾1～1.5g，加无二氧化碳的水溶解，加2滴酚酞指示液（10 g/1L），用50 m L0配制好标准溶液加入试剂之中，混匀，然后继续用配制好的氢氧化钠溶液滴定至PH至8.2，并保持30 s。同时做空白试验。
4.2 检测步骤
在空调与除湿机控制温度20±2℃环境的实验室里，先预热酸度计30min，然后进行标定与校正。吸取 5.0 m L样品，置于100m L容量瓶中，加水至刻度，混匀后吸取 20.0 m L，置于200m L烧杯中，加 60m L水，开动磁力搅拌器至能够匀速而充分搅拌烧杯里面的溶液，用氢氧化钠标准溶液[c（NaOH）= 0 .0 5m ol/L]以1～2秒1滴的速度进行滴定至酸度计指示pH=8.2 〔记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（（0.05 m ol/L）的毫升数，可计算总酸含量〕。加入 10 .0 m L甲醛溶液，混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液（0.0 5m ol/L）继续以1～2秒1滴的速度进行滴定至pH=9.2 ，记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液（0.05 m ol/L）的毫升数。同 时取 80m L水，先用氢氧化钠溶液（0.0 5m ol/L）调节pH为8.2，再加入10.0 m L甲醛溶液，用氢氧化钠标准滴定溶液（0.05 m ol/L）以1～2秒1滴的速度进行滴定滴定至pH=9.2 ，同时做试剂空白试验。
参与文献：
[1] 中华人民共和国国家标准《GB 18186-2000酿造酱油》；
[2] 中华人民共和国国家标准《GB /T601-2002标准溶液的制备》。