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人参与含不同成分的中药配伍后人参皂苷的动态变化研究

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[摘要] 目的:研究人参与不同成分中药配伍人参皂苷动态变化规律。方法:以HPLC法测定不同配伍中药对水煎液、浓缩膏、不同温度干燥细粉人参皂苷的含量。结果:人参与不同中药配伍后,人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量有不同程度的降低。结论:人参皂苷类成分的变化受多种因素影响,配伍中药所含化学成分影响最大。

[关键词] 高效液相色谱法;人参;配伍

[中图分类号]R961 [文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2009)06(c)-061-02

The study of the panaxsaponin dynamic change in Panax Ginseng after being compatible with different traditional Chinese medicines

CHEN A'li 1, CUI Yongxia2 , LI Junwei3, ZHOU Liyan1, LIANG Shengwang1*

(1.Guangdong Phamaceutical University, Guangzhou510006, China; 2.Henan University of TCM, Zhengzhou450008, China; 3.Hutchison Whampoa Guangzhou Baiyunshan Chinese Medicine Company Limited, Guangzhou510555, China)

[Abstract] Objective: To study the law of the panaxsaponin Rg1, Re and Rb1's dynamic change on Panax Ginseng after being compatible with different traditional Chinese medicines. Methods: By HPLC measuring different compatible medicines contents to water solution, condensed extract and dry fine powder panaxsaponin Rg1, Re and Rb1 under different temperatures. Results: After being compatible with different traditional Chinese medicines, the contents of the panaxsaponin Rg1, Re and Rb1 had reduced with different degrees. Conclusion: The change of the panaxsaponin Rg1, Re and Rb1's composition is subject to many factors, with the chemical composition contained in the compatibility traditional Chinese medicines having the greatest impact.

[Key words] HPLC; Panax Ginseng; Compatibility

人参为名贵中药,其在复方中的成分变化较大,当组成不同、工艺不同或有其他因素时,人参皂苷类成分产生较大的差异,较难控制含人参复方制剂的质量。因此,研究人参与含不同成分的中药配伍后人参皂苷的成分动态变化及其影响因素,对于保证制剂工艺的科学性、产品质量的稳定性和可控性都具有重要意义[1]。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Techcomp LC-2000液相色谱仪。

1.2 试药

人参药材(郑州市中原药材行,批号为070922),人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re对照品(中国药品生物制品检定所,批号分别为110703-200424、110704-200420、110754-200421);乙腈为色谱纯,水为自制蒸馏水。

2 方法与结果

2.1 人参皂苷Rg1、Re、Rb1的含量测定方法

2.1.1 色谱条件[2]色谱柱为Hypersil ODS2柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈,水梯度洗脱;流速为1.0 ml/min;波长为203 nm;柱温为30℃。

2.1.2 标准曲线精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及人参皂苷Re适量,加甲醇制成每毫升含0.8 mg的混合溶液,摇匀,即得[3]。分别精密吸取2、4、8、12、16、20 μl注入液相色谱仪测定,以进样量(μg)为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,得人参皂苷Rg1回归方程为y=169 366.815 9x-7 870.627 397,r=0.999 8;人参皂苷Re回归方程为y=157 831.193 2x+3 516.257535,r=0.9996;人参皂苷Rb1回归方程为y=155 157.905 3x+2 530.169 864,r=0.999 9。表明人参皂Rg1在1.952~19.520 μg之间,人参皂苷Re在1.616~16.160 μg之间,人参皂苷Rb1在1.868~18.68 0 μg之间分别呈良好线性关系[4-5]。

2.1.3 样品的制备取人参粗粉50 g,精密称定,与所选药材混匀,加8倍量水煎煮2次,每次1 h,滤过,合并滤液并浓缩定容至1 000 ml,混匀,取40 ml水煎液,取2份,剩余水煎液平均分为3份,分别浓缩至相对密度为1.30~1.35(50~60℃)的稠膏,从一份稠膏中取含2 g人参药材的稠膏,再分别将其于60、80、100℃干燥,粉碎,过80目筛,即得[6]。

2.1.4 供试品溶液的制备取一定量的样品(水煎液直接提取,稠膏与细粉分别先用40 ml的蒸馏水溶解),用乙醚洗2次,每次15 ml,弃去乙醚液,用水饱和的正丁醇萃取5次,每次15 ml,合并正丁醇液,用1%NaOH溶液洗2次,每次20 ml,再用正丁醇饱和的水洗2次,合并正丁醇液,挥干,残渣加甲醇溶解并稀释定容至5 ml,即得[7]。

2.2 人参与不同药对配伍后含量变化

2.2.1 在所选药对中,人参配伍五味子使人参皂苷的含量变化最大,笔者在此就以人参与五味子配伍为例进行分析讨论,配伍后液相色谱图见图1。

图 1 人参与五味子配伍HPLC图谱

(A.人参单味药材;B.人参∶五味子=3∶1;C.人参∶五味子=3∶2;

D.人参∶五味子=3∶3)

Fig.1 HPLC chromatograms of Panax Ginseng after being compatible with Fructus Schisandrae Chinensis

(A.Panax Ginseng; B.Ginseng∶Schisandrin=3∶1; C.Ginseng∶Schisandrin=3∶2; D.Ginseng∶Schisandrin=3∶3)

2.2.2 人参与其他药材配伍后的含量变化笔者研究所选的药对除了人参-五味子外,还有人参-柴胡、人参-甘草等。各个配伍药对的转移率见表1。

3 讨论

《中国药典》2005版人参含量测定项是以乙腈-水为流动相梯度洗脱,以人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1为含测指标,因此本课题研究亦采用此法。在实验研究过程中,发现柱温对色谱峰的分离度影响很大,当柱温高于35℃时,人参皂苷Rg1、Re不能达到基线分离,当温度低于25℃时,人参皂苷Rg1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb1的保留时间均会提前10 min左右,峰面积波动也比较大,因此,在实验过程中,应控制柱温在(30±2)℃。

在人参配伍不同成分药材水煎、浓缩、干燥过程中,浓缩过程损失人参皂苷的含量最大,浓缩时温度高、时间长,一些在临床疗效很好的汤剂经开发做成现代剂型后疗效往往不如汤剂,就是因为在浓缩干燥过程中有效成分损失而使疗效降低,因此,应不断开发更先进的制药设备,优化药品的制剂工艺[8],使成药更好地发挥疗效。

[参考文献]

[1]李秀玲,徐青,张曦,等.HPLC研究川芎-赤芍配伍的化学成分变化[J].世界科学技术――中医药现代化:基础研究,2004,6(1):21-24.

[2]国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京:化学工业出版社,2005.

[3]王志才,陈燕萍,杨凡.HPLC测定生脉葡萄糖注射液中人参皂苷Rg1、Re的含量[J].人参研究,2008,3:2-4.

[4]荆淑芹,姜海平,刘凤云,等.生晒参红参林下参中7种人参皂苷含量的比较[J].中华中医药学刊,2009,27(1):207-209.

[5]胡海波,史道芬,潘文,等.HPLC测定颐和春口服液Rg1、Re、Rb1的含量[J].南京医科大学学报:自然科学版,2009,29(2):200-204.

[6]赵亮,吕磊,纪松岗,等.高效液相色谱法快速测定人参中8种主要皂苷类成分的含量[J]. 第二军医大学学报,2008,29(12):1507-1510.

[7]吴嘉瑞,张冰.人参与莱菔子配伍后人参皂苷Rg1含量变化研究[J].中国中药杂志,2006,31(1):79-80.

[8]金子丹,张慧卿.浅议人参的配伍禁忌[J].甘肃中医,2008,21(10):33-34.

(收稿日期:2009-03-12)