陕西省乾县羊衣原体病血清学调查
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【摘 要】羊衣原体病是由流产嗜性衣原体（Chlamydophila abortus）所引起的一种地方性传染病，临床症状主要包括怀孕母羊流产、早产、产死胎，种公羊炎等。为了查清乾县各乡镇羊群是否感染衣原体，本文采用衣原体抗体间接血凝试验（IHA）的方法于2013 年4～6 月份对采自乾县的部分羊群的血清学进行检测，为羊衣原体病防治措施的制定提供依据。
羊衣原体病是由流产嗜性衣原体（Chlamydophila abortus）所引起的一种地方性传染病，临床症状主要包括怀孕母羊流产、早产、产死胎，种公羊炎等。衣原体感染还能引起肺炎、多发性关节炎、脑脊髓炎和腹泻等症状。流产嗜性衣原体为共患病病原，感染的羊只可向饲养者传播，已有多起妊娠妇女与患衣原体病的羊群接触而感染流产嗜性衣原体而导致流产的病例报告。上世纪80年代在我国部分地区曾爆发过由衣原体感染引起的羊的地方性流产病。2012年1月至2月，乌鲁木齐市发生两起流产嗜性衣原体引起羊流产疫情，共7204只母山羊发生流产，流产率高达37.4%，2013年青海省也发生了由羊衣原体流产疫情。据调查，2012年陕西省杨凌区羊衣原体感染率达14.29%，富平县某镇羊衣原体感染率为6.82%，而在千阳、凤翔、白水、淳化等县未检测出羊感染衣原体。为了查清乾县各乡镇羊群是否感染衣原体，本文采用衣原体抗体间接血凝试验（IHA）的方法于2013年4～6月份对采自乾县的部分羊群的血清学进行检测，为羊衣原体病防治措施的制定提供依据。
1、材料与方法
1.1 血清的采集
对乾县所辖的5个乡镇（新阳镇、峰阳镇、注泔镇、大杨镇、梁山镇）15个较大规模的养殖场的羊群，采用随机抽样的方法采集血液样本316份，制备血清，-20℃保存备用。
1.2 检测试剂
IHA检测试剂盒购买自中国农业科学院兰州兽医研究所。
1.3 试验方法
IHA检测方法按试剂盒说明书操作步骤进行，简述如下：首先向96 孔110°V 型微量聚乙烯反应板每孔中加入75 μL稀释液；再将25 μL待检血清加入第1 孔，然后呈4 倍递增稀释3 个孔（即1∶4～1∶64）；最后向每孔加稀释好的抗原25 μL，孔中的液体总体积为100 μL。以衣原体阳性血清和阴性血清设置对照组。微孔板置于微量振荡器上振荡2 min，然后在37 ℃温箱中孵育2 h，观察结果，若对照组各孔均成立，那么被检血清1∶16稀释的孔中出现“++”以上的判定为阳性；1∶4稀释的孔中出现“+”以下的判定为阴性；1∶4稀释的孔中出现“++”而1∶16 稀释的孔中出现“+”以下的为可疑，可疑样品再复检一次。
2、结果
本次试验共检测了316份羊血清，其中有21份血清为阳性，阳性率为达到6.64%。所检测的59份种公羊血清中4份为阳性，阳性率为6.78%；257份生产母羊血清中17份为阳性，阳性率为6.61%，表明在种公羊和生产母羊的衣原体感染率相当（见表1）。
表1 乾县羊衣原体病血清学调查结果
3、讨论
尽管乾县多年来从未发生过羊流产嗜性衣原体病，也没有羊感染衣原体的报道，但本次调查结果显示乾县5个乡镇羊群在一定程度上感染了流产嗜性衣原体，且感染率较高，平均感染率为6.64%，其中种公羊（6.78%）和生产母羊（6.61%）的感染率相当，这表明乾县存在羊流产嗜性衣原体疫病发生和向外传播的可能性。据报道，2001年陕西省羊流产嗜性衣原体平均感染率在1.90%～2.2%左右，到了2012年，羊流产嗜性衣原体平均感染率上升到了2.88%，其中杨凌区羊的感染率达14.29%。青海省是我国牛、羊流产嗜性衣原体病发生较多的地方之一，部分地区牛、羊流产嗜性衣原体的感染平均感染率可达20%。与青海省相比，尽管陕西省的羊流产嗜性衣原体平均感染率相当较低，但部分地区，如杨凌区，流产嗜性衣原体已经成为养羊业的潜在危险因素。由于近年来我国各地区间畜禽流通日益频繁，加之衣原体病尚未列入大多数地区的常规检测和防疫计划中，因此，感染流产嗜性衣原体的羊只在未经严格检疫的情况下可由其他地区流通到本地，再从本地流通到其他地方，增加了流产嗜性衣原体在不同区域传播的几率和风险。由于包括羊在内的各种牲畜在感染流产嗜性衣原体后通常不引起或很少引起明显症状，由于得不到及时的诊断和治疗，这些感染的牲畜可长期带毒，但在一定条件下，如冬春产羔季节会突然发病，引起较大经济损失。因此，这种隐性的带毒传播应该受到相关职能部门的重视。乾县这次调查结果及先前的调查结果提示，羊流产嗜性衣原体病有可能会在将来在陕西省发生并对养殖企业和养殖户造成一定经济损失。尽管流产嗜性衣原体慢性感染期牲畜不表现明显症状，但其血清中已经存在相应的抗体，可以用血清学方法（如IHA）检测出来。因此，为净化动物衣原体病，有必要对畜群定期进行血清学检测，及时淘汰衣原体阳性牲畜。因此，相关职能部门应当制定相应的对策，对可能存在的衣原体疫病风险进行前期防范。
在动物衣原体病目前预防方面，国内外大多采用鸡胚卵黄囊灭活油佐剂苗进行免疫接种，如我国部分地区使用由中国农业科学院兰州兽医研究所研制的动物衣原体灭活疫苗，在控制动物衣原体病发生方面发挥了一定作用。建议当地行政主管部门重视和加强衣原体病的防治工作，把羊衣原体病纳入当地的免疫防疫计划体系中。在相关措施落实之前，如果羊群或其他动物发生衣原体病，必须对圈舍及用具进行彻底消毒，对流产胎儿尸体等进行无害化处理，发病动物可用青霉素、金霉素、红霉素、氯霉素、多黏菌素B等抗生素进行治疗。