脑心通对血管性痴呆大鼠血浆\脑组织精氨酸加压素含量的影响

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关键词 血管性痴呆 脑心通精氨酸加压素 大鼠

本研究采用改良Pulsinelli四血管阻断法(4-vessel occlusion，4-VO)建立慢性脑缺血动物模型，观察脑心通对血管性痴呆(vascular dementia，VD)大鼠学习记忆及血浆、脑组织精氨酸加压素(argininevasopressln，AVP)含量的影响，探索中药治疗VD的药理机制，为寻求新的VD治疗手段提供依据。

1　材料与方法

1.1 动物及分组：选取清洁级(二级)老龄Wistar大鼠48只，雌雄不拘，体重200±20g，由第三军医大学野战外科研究所实验动物中心提供[许可证号：SCXK(渝)2003.0003]。随机分为假手术组、模型组、中药组和西药组(阳性对照组)，每组12只。

1.2　药物：脑心通胶囊(国药准字220025 001，0.4g／粒，成阳步长制药有限公司)，由黄芪、乳香、没药、全蝎、地龙等16味中药组成。按参照文献方法计算大鼠用药剂量为0.45g・kg-1・d-1，以生理盐水制成混悬液。西药组采用喜得镇(hydergine)(瑞士山德士药厂与天津华津制药厂合作产品，每片1mg)，用生理盐水配成混悬液。

1.3　给药方法：中药组：脑心通混悬液灌胃，0.45g・kg-1。・d-1，西药组：喜得镇混悬液灌胃，0.32mg・kg1・d-1假手术组和模型组给予同容量生理盐水。四组每日均分早、中、晚3次用药。术后当天开始用药，连续8周。

1.4　穿梭箱检查：采用第三军医大学野战外科研究所研制的微机控制的穿梭箱主动回避反应系统。该系统以灯光为条件刺激，足底电击为非条件刺激。如大鼠在灯光刺激后即能完成穿梭动作称主动回避反应(active avoidance reaction，AAR)，而经电刺激后才能完成穿梭动作称被动回避反应(passive avoidonce re-action，PAR)。大鼠的学习记忆能力以完成AAR的次数与测试总次数(20次)的比值即AAR比率代表。术前大鼠行7天穿梭箱训练，以AAR比率>80％入选，

1.5　标本采集、处理及储存：大鼠在无麻醉下快速断头，颈动脉采集血液约4ml，置入专用试管内，立即离心25min(3000rp／m)，取上清液注入聚丙乙烯塑料管内，做好标记，密封后立即放入－70℃冰箱保存待测；采血完毕后立即开颅取全脑，置沸生理盐水中煮5min取出，用滤纸吸干附着的液体后，分离大脑皮层、下丘脑和海马，分别称重后加入lmol／I。HCI1ml，匀浆后倒入塑料指形管中，室温放置100min，再加入lmol／L HCl 1ml，4℃离心(4000rp／m，10min)，取上清液，置-70℃冰箱保存待测。

1.6　指标测定：采用放射免疫分析法(radioi mmu-noassay，RIA)测定AVP含量，AVP RIA药盒购自第二军医大学神经生物学教研室。操作严格按药盒说明书进行，并根据标准曲线求得标本实际浓度。

1.7　统计学分析：数据采用均数±标准差(x±s)表示。采用SPSS10.0统计软件进行单因素方差分析和相关性分析。

2 结果

2.1　各组大鼠手术前后穿梭箱AAR比率变化：模型组术后2、4、8周AAR比率显著低于假手术组(P

2.2　各组大鼠血浆及不同脑区AVP含量比较：与假手术组比较，模型组大脑皮质、下丘脑和海马AVP含量降低，差异有显著性意义，P0.05。见表2。

2.3　各组大鼠血浆及不同脑区AVP含量与AAR的相关性分析：模型组、中药组和西药组大鼠血浆、大脑皮质和下丘脑AVP含量与AAR比率无显著相关(P>0.05)；而各组海马AVP含量与其呈显著正相关(分别为r=0.892，P(0.05；r=0.937，P

3　讨论

脑心通由黄芪、乳香、没药、全蝎、地龙等16味中药组成，具有益气活血、化瘀通络、醒脑开窍、宣痹止痛之功效。本实验结果表明，中、西药治疗可显著提高VD大鼠AAR比率，对大脑皮质、下丘脑和海马AVP含量有明显上调作用，但不影响血浆AVP水平变化。说明脑心通与西药喜得镇是通过改善脑血液循环、保护脑组织，调节中枢递质AVP的紊乱，对神经突触传递和认知功能发挥积极的调控作用，显著提高VD大鼠学习记忆能力。另外还发现大脑皮质、下丘脑内AVP含量中药组明显高于西药组，海马AVP含量中药组略低于西药组，但无显著性差异。提示脑心通对大脑皮质、下丘脑的AVP作用优于西药，对海马AVP作用与西药相当。总之，脑心通治疗VD的机制之一可能是通过提高脑组织尤其海马内AVP含量而实现，但其确切机制有待进一步深入研究。