哮喘患儿血清转化生长因子—β1和血浆血小板活化因子的变化及临床意义

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（摘要） 目的 观察哮喘儿童血清转化生长因子-β1（TGF-β1）和血浆血小板活化因子（PAF）水平的变化及其与哮喘发作期病情分度的关系，探讨其在哮喘发病机制中的作用和临床的意义。 方法 选取45例急性发作期哮喘患儿分轻，中、重度发作组和15例健康儿童作为对照组。采用ELISA法测定哮喘儿童急性期血清血清转化生长因子-β1（TGF-β1）和血浆血小板活化因子（FAF）的水平，同期接受健康儿童为对照组，检测TGF-β1和PAF的水平。 结果 哮喘儿童急性期血清转化生长因子-β1（TGF-β1）的水平和正常对照组的水平明显升高，差异有统计学意义（p

（关键词）儿童哮喘 血清转化生长因子-β1（TGF-β1） 血浆血小板活化因子（PAF）

评价支气管哮喘气道炎症的“金标准”是支气管镜下行支气管内膜活检，但由于其操作复杂及创伤较大，故在哮喘的监测中受到明显限制，尤其对儿童哮喘患儿。支气管诱导痰细胞分析虽然无创，但痰液的收集有一定困难，对气道炎症评价的敏感性和特异性也有局限性。临床常用肺功能测定与气道炎症也没有显著的相关性，气道炎症仍可在肺功能正常和哮喘症状得到良好控制的患儿出现（1）。目前，我国儿童哮喘的患病率仍呈上升趋势，虽然有不少疗效确切的治疗哮喘药物应用于临床，但儿童哮喘的整体控制状况仍不理想（2），部分原因与缺乏有效的疾病监测手段有关。

1）资料与方法

1.1 一般资料

我院2010年—2012年住院及门诊收治的急性发作期哮喘患儿（哮喘组）45例，男，27例，女，18例，年龄3—14岁，均符合儿童哮喘诊断标准（3）。按照《全球哮喘防治的倡议》（4）分为轻度组13例男7例，女6例，年龄3—14岁；中、重度组32例，男20例，女12例，年龄3—14岁。另外健康体检组（对照组）15例，其中男，9例，女6例，年龄3—14岁，均无个人及家族哮喘史和过敏史（包括湿疹，过敏性鼻炎，过敏性皮炎）。

1.2方法

抽取静脉血2毫升放于2%EDTA_—Na2抗凝剂的塑料试管中，抗凝剂与静脉血的比例为1：9，标本于3000r/min 离心半径17.9cm 离心10 min后，取上清液-70度保存备用。TGF-β1试剂盒有上海西塘生物制品公司提供，按说明书由ELISA方法检测。血小板活化因子（PAF）实验，购由上海麦莎生物技术公司，用双抗体夹心ABC—ELISA方法检测血浆血小板活化因子（PAF）的含量。

1.3统计学分析

数据均以x±s标准差表示，采用spss11.5软件进行统计学处理。组间两结果比较采用的t检验，进行多组结果比较采用单因素方差分析，组间比较用ISD法检验。P

2）结果

1. 哮喘儿童急性期血清转化生长因子-β1（TGF-β1）和血浆血小板活化因子（PAF）水平比较：见表1 哮喘儿童急性期血清转化生长因子-β1（TGF-β1）水平和正常对照组水平明显升高，差异有统计学意义（p

2.不同病情分度的哮喘儿童与健康儿童血清转化生长因子-β1（TGF-β1）和血浆血小板活化因子（PAF）水平比较：见表2 哮喘轻，中、重组血清转化生长因子-β1（TGF-β1）和血浆血小板活化因子（PAF）水平逐渐增高，各组比较差异有统计学意义（p

3、哮喘儿童急性期血清转化生长因子-β1（TGF-β1）和血浆血小板活化因子（PAF）水平呈显著正相关。（r=0.914 p

讨论

哮喘患儿可出现气道重构现象，表现为气道壁增厚，气道平滑肌增生、肥厚，基底膜增厚，血管生成，黏膜生化等。TGF-β1是一种多功能细胞因子，能够诱导上皮细胞层破坏、气道炎症、平滑肌细胞增殖、杯子细胞增生以及促进血管重构等多重细胞反应，并可通过促使杯状细胞增生、诱导释放血管内皮细胞生长因子导致血管重塑，促进气道平滑肌增生肥大、迁移以及破坏上皮细胞层等多种途经参与气道重塑（5）。Minshall等（6）用荧光标记原位杂交方法研究发现，哮喘患者血清TGF-β1与水平与病情严重程度呈正相关。本研究结果显示，哮喘患儿急性期血清转化生长因子-β1（TGF-β1）水平明显升高，而中、重度发作组患儿急性期血清转化生长因子-β1（TGF-β1）水平又明显高于轻度发作组患儿，表明血清转化生长因子-β1（TGF-β1）水平高低与哮喘的严重程度密切相关，并且哮喘患儿可能存在不同程度的气道重构。1972年Benveniste等发现嗜碱性粒细胞在受IgE攻击后产生一种能使血小板活化聚集释放组胺的可溶性脂质，称之为PAF。国内外动物实验研究表明，PAF在哮喘、败血症、缺血再灌注损伤病变中均上升（7）。近年来，通过放射性胚体结合实验，真是证实PAF受体广泛分布在脑，肺脏，肝脏，子宫以及血小板，中性粒细胞，巨噬细胞，单核细胞，内皮细胞等多种组织细胞中（8）。PAF在哮喘的作用有1）血管直接损伤作用，注射外源性PAF可直接抑制心肌中冠状血管收缩引起心肌收缩力下降，心输出量减少，全身低血压，导致肺及气管粘膜低灌注，造成肺及气管粘膜缺血。2）直接作用于血管内皮细胞，引起血管通透性增加。3）通过血管紧张素A2引起气道高反应。本研究显示，哮喘儿童血浆血小板活化因子（PAF）水平较正常对照组水平明显升高。且TGF-β1与PAF正相关，哮喘患儿体内血清转化生长因子-β1（TGF-β1）水平和血浆血小板活化因子（PAF）水平随病情程度加剧而上升。病情越重，升高越明显。可作为哮喘儿童急性期指标之一，反映病情变化及预后。

总之，TGF-β1、PAF参与了哮喘患儿气道炎症反应和气道重构病理生理过程，在哮喘的发病机制及检测指标尚不完善的情况下，通过检测哮喘儿童血清转化生长因子-β1（TGF-β1）水平和血浆血小板活化因子（PAF）水平，对临床上早期干预具有重要指导意义，哮喘患儿气道炎症反应和气道重构具体机制错综复杂，仍需进一步深入研究。

参考文献：

（1） Sont JK， Han J， van krieken JK， et al. Relationship between the inflammatory infiltrate in bronchial biopsy specimens and clinical severity of asthma in patients treated with inhaled steroids （J） thorax.2010，51：496-502

（2） 洪建国，重视哮喘临床研究提高哮喘诊治水平（j），中华儿科杂志，2007，45（10）724-726

（3） 中华医学会儿科学分会呼吸学组，中华医学会（中华儿科杂志）编辑委员会 儿童支气管哮喘防治常规（试行）（j）. 中华儿科杂志，2004，42（2）：104-106

（4） 诸福棠实用儿科学，2007：631-642

（5） 李涛，黄芪。转化生长因子在支气管哮喘气道平滑肌重塑中的作用 （J）.国际呼吸杂志2010，30（3）：169-172.

（6） Minshall EM，Leung DY，Martin RJ，et al. Eosinophil associated TGF –betal mRNA expression and airway fibrosis in bronchial asthma （J）.AM Respir Cell Mol Biol，2009.17（3）：326-333

（7） 杜东红。何云，袁风仪。血小板活化因子的生物学特征及拮抗剂（J）.国外医学：临床生物化学与检验学分层，2002，23（3）：137-138

（8） Marrache AM， gobil F， Bernier SG ，et al .Proinflammatory gene induction by platelet-activating factor mediated via its cognate nuclear receptor （J），J Immunol.2010.169（11）：6474-6481