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肠道病毒71型手足口病的研究进展

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【摘要】EV71已代替CoxA16,成为手足口病最主要的病原体,在亚太地区,特别是中国成爆发趋势,严重危害着儿童的生命健康和人民的生活,已引起我国乃至全球人民的广泛关注。对病毒及其相关特征的研究,有助于药物的研发和疾病的预防。本文对EV71的病原学、流行病学、诊断、预防和治疗等方面的研究进展进行了总结。

【关键词】肠道病毒71型、手足口病、流行特征、诊断、治疗。

【中图分类号】R599

【文献标识码】A

【文章编号】2095-6851(2014)05-0604-02

肠道病毒71型(enterovirus 71 ,EV71)病毒感染后的临床表现包括无症状感染以及以发热和手、足、口腔等部位的皮疹、疱疹或溃疡为特征的手足口病(Hand foot mouth disease ,HFMD),少数患者可出现心肌炎、脑炎、无菌性脑膜炎、急性弛缓性麻痹和神经源性肺水肿等致命的并发症,严重的可导致死亡。在HFMD 患者中,EV71感染是造成重症和死亡的主要危险因素之一[1]。近年来,世界各国报道的EV71 爆发以惊人的频率和程度增长[2],在亚太地区的流行也呈上升趋势[3],在我国表现尤为明显。自2008年以来,该病在国内成爆发态势,逐步成为丙类传染病中发病人数最多、死亡率最高的疾病,因此,本文对EV71 在病原学、流行病学、实验室诊断、预防和治疗等方面取得的进展进行总结。

1病原学

肠道病毒71型归属于小RNA病毒科(Picornaviridas),肠道病毒属(Enterovirus)的成员,归属于人类肠道病毒A。EV71病毒颗粒为直径约24~30nm的二十面体立体对称的球形结构,无包膜和突起,基因组为一长约7.4kb 的单正链RNA。病毒由RNA核心和外层的衣壳构成,病毒颗粒衣壳组成复杂,首先由病毒基因组编码的分子量分别为别34kD、30kD、26kD和7kD的多肽VP1、VP2、VP3和VP4四种衣壳蛋白构成原聚体,然后5个原聚体可再拼装成具有五聚体样结构的亚单位,最后由12个五聚体相互连接组成具有20个三角形和12个顶点的二十面体[4]。在四种结构蛋白中,病毒的抗原决定簇基本上位于VP1~VP3上,其中VP1是病毒衣壳蛋白中最外和免疫决定的部分,直接决定病毒的抗原性,主要的血清特异性中和位点也存在于VP1上。VP1基因具有与病毒血清型完全对应的遗传多样性,变异快速(其年进化率为1.35×10-2/核苷酸),而且可作为小RNA 病毒科内不同属的分类参考。因此VP1基因成为EV71分型和病毒稳定性分析研究的最重要的对象。

2流行病学

自1969年首次从加利福尼亚患有中枢神经系统疾病的婴儿的粪便标本中分离出来EV7l病毒后,世界不同国家和地区先后报道了EV71 的流行情况。据调查EV71 流行呈周期性, 1971~ 2000 年间,全球一共报道了近20次EV71大流行,在时间分布上呈现出3个明显的“波”,间隔时间为10年。近年来, EV71 在亚太地区的流行有上升趋势,从世界各国的报道来看,目前世界上比较严重的手足口病大爆发均由EV71引起,因此,EV71已代替CoxA16,成为手足口病最主要的病原体。

我国于 1980年由上海首先报道本病,以后各地均有散发报道。但从2008年以来,在国内成爆发态势,仅2010年,HFMD发病人数达170万,其中重症患者2万多人,死亡900余人到2012年发病数又升高到200余万人,死亡500余人,统计近几年EV71病毒在我国大陆的流行情况,发现其流行株均以C4亚型为主,但2004年之前以C4b 为主,而2004年之后则以C4a为主, 病毒之间的重组和基因变异,也使得手足口病的流行和致病性等特征进一步复杂化。

3鉴别诊断

EV71感染的诊断通常是通过临床特征性疱疹和流行病学资料,如:患者的年龄、特征性疱疹、近期接触史、神经系统疾病以及流行病学资料等来进行初步诊断的。但由于引起相关症状的原因较多,初步诊断的结果并不可靠,目前实验室的诊断方法大致包括以下几种:

3.1 病毒分离培养

病毒的分离培养,出现细胞病变后利用型特异性组合抗血清进行中和试验鉴定,但是,病毒的分离鉴定繁琐、费力、耗时,且费用高,更重要的是往往贻误特异性治疗,

3.2 酶联免疫吸附试验(ELISA)

ELISA方法虽然特异性强,灵敏度高,过程简单,实验所需时间短,可作为临床实验室的检测手段之一,且有关于EV71研究的报道,国内外已有EV71血清学诊断成功方法,敏感性和特异性达93%左右。

3.3逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)

此法是用特异性引物检测待测标本中和EV71 RNA同源的基因序列,从而作为判断结果的依据。RT-PCR一般可在收到标本后5~24h内提供诊断结果,是目前较理想的诊断技术。

3.4 基因芯片技术

使用肠道病毒鉴定芯片对EV71进行诊断,基于5′-UTR和VP2的特异寡核苷酸探针,可以同时监测多段基因,花费时间较短,灵敏度和特异度可高达89.6%和90.9%[6]。

4预防和治疗

手足口病已被国家列为丙类传染病,但目前还没有特效的药物和疫苗来治疗及预防EV71感染引起的手足口病,因此需要建立完善的EV71流行监测、预警、报告、分析和处理网络,对患儿早发现、早诊断、早隔离、早治疗,并且在治疗过程中应强调医疗单位在流行期间实行预检分诊制度,对托幼机构执行严格的晨检措施,并进行相关的宣传教育。

参考文献

[1]翁育伟,严延生. 肠道病毒71 型研究进展[J],中国共患病学报,2014,30(1):79-84.

[2]S. A. Sanders1,2 L. J. Herrero1,2, K. McPhie et al .Molecular epidemiology of enterovirus 71 over two decades in an Australian urban community[J] Arch Virol 2006,151:10031013.

[3]周世力,李琳琳,田波.肠道病毒71型SHZH03株VP1基因的进化分析[J],生物技术通讯,2005,16(6):609-611.

[4]周伯平,李成荣等,肠道病毒71型手足口病,第一版[M]. 北京: 人民卫生出版社,2009.

[5]尤俊斌,苏郑明,陈讳莹.肠道病毒71型引起手足口病的发病机制[J],医学研究生学报,2012,25(8):876-878.