血细胞分析仪对血小板的影响因素
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[关键词] BC-5500血细胞分析仪；血小板计数；影响因素
血小板计数是血液常规检验的重要项目之一，在临床检验工作中，常发现少数病人经全自动血细胞分析仪进行血小板检测时，血小板测定值常不准确，血小板数值与临床症状不相符，为探讨其发生原因，本文对120例健康人血标本进行重复监测，寻找血细胞分析仪计数血小板的准确性及重复测定的可比性及影响因素。
1.材料与方法
1.1仪器
深圳迈瑞公司生产的BC-5500血液分析仪。
1.2试剂
BC-5500专用配套试剂（溶血剂、稀释液、清洗液）。
1.3其他
校准物与质控液，全血校准液（由深圳迈瑞公司提供），全血质控物（由青海省临检中心提供）。
1.4方法
1.4.1按仪器维护保养要求，对仪器进行全面的维护，经常保持微孔的清洁，以保证BC-500在正常条件下批内重复测定变异数（RCV）在规定范围内，每次实验前血液分析仪用全血校准物校准仪器后，严格按仪器操作步骤进行测试。
1.4.2用含EDTA-K抗凝管，采集120例健康人静脉血2ml，轻轻混匀后，立即在血液分析仪BC-500上测定3次，然后分别于5、10、20、30、60min各测3次，并用全血质控物质同步监测仪器，分别计算其均值，按时间分组，分别利用多样本均数间显著性检验与配对t检验进行统计学分析。
2.结果
2.1标本自身因素的影响
由于采血过程不顺利，过分挤压或未充分与抗凝剂混匀等因素人为造成血小板的凝集，是造成血小板计数不准确的首要原因。
2.2标本放置时间的影响
WBC在采血后0―30min内随时间延长其数量不规则递减，组与组之间差异有显著性（P
2.3血小板聚集分可逆聚集和不可逆聚集
当新鲜静脉血加入EDTA―K2：抗凝瓶混匀后血小板即发生聚集反应，此时立即进行全血细胞测定，可逆聚集的血小板还没有解聚，会造成全血细胞分析结果误差。白细胞不同程度假性升高，直方图的小细胞群会出现一个很高的截距，血小板不同程度的假性降低，直方图就会出现锯齿波或尾部抬高。但抗凝血静置30min后，再进行测定，即可消除上述假性结果。100例静脉血放置不同时间各参数的均值比较可看出60min与30min测定值差异无显著性（P>0.05），30min与20min测定值差异有显著性（P
3.讨论
BC-5500型血细胞分析仪计数血小板的原理是直接计数2―20fl范围内的血小板，根据正态分布理论，用电子拟合线拟合0―70fl范围内的血小板数量作最终报告结果，具有双曲线的血小板直方图是它的标准结果，只具有单曲线的血小板直方图，只要成正态对数分布，曲线在20fl范围内有明显的主峰，其仪器计数法与显微镜计数法较一致，与临床基本吻合[1]。血小板膜分内膜和外膜，外膜围绕胞质形成浆膜，并延伸到胞质内部并折叠形成开放微小管系统，它是血小板摄取和释放的通道。质膜内侧附着许多微丝，其主要成分为肌动蛋白的肌凝蛋白，与微管环周束共同支持伪足的形成。当新鲜静脉血离体加入EDTA―K抗凝瓶内，管壁周围的全血外环境及温度发生改变，使血小板形态发生变化[2]。由于血小板发生聚集，在阻抗法做血小板计数时，聚集体所产生的脉冲大于仪器预设的单一血小板脉冲值，因而就不会计数血小板结果内，从而使血小板数量减少。
故血小板聚集的原因可能有：
（1）抗凝剂EDTA―K2：能使血小板形态发生改变。由盘状变成球状，从而使可逆聚集血小板的伪足回缩到血小板胞质内，血小板相互缠绕的伪足就可解除。
（2）可逆聚集的血小板由于形态有所改变及伪足的形成，增大了血小板表面积，其表面负电荷相应增大，同性电荷的排斥力也就相应增强。
（3）温度升高，分子运动速度越快，温度对可逆聚集血小板解聚的影响尤其在用预稀释方法作全血细胞测定中更为明显。
（4）溶血剂的加入量、溶血时间和仪器检测的清洁度有关，因此必须保持微孔的清洁，才能保证仪器测定的可靠性。原因：经EDTA―K2抗凝的全血标本，在采血30min后进行全血细胞分析，可提高结果的准确性。但需排除化疗、血小板减少性紫癜、白血病及造血系统异常等疾病。血小板形态不规则且细小，任何灰尘和斑点都会影响计数。反复使用的测定管极易引起杂质吸附，造成残余溶血素污染，从而引起PLT计数偏高。血细胞分析仪检测血小板的准确性取决于很多因素，环境、温度、抗凝剂混合情况以及所有影响电脉冲大小及数目的因素都会影响正确计数。因此，只有正确操作，排除各种干扰，才能使血小板的计数结果准确靠。
参考文献：
[1]毛赛锦.血细胞分析仪测血小板结果偏低的原因分析[J].实用中西医结合临床，2007，7（1）：64-65.
[2]郭旭霞，王立兵，闫惠.EDTA―K2致假性血小板减少分析[J].长治医学院学报，2007，2l（2）：55-56.