MMP-7、CD147在卵巢子宫内膜异位囊肿中的表达及意义

开篇：润墨网以专业的文秘视角，为您筛选了一篇MMP-7、CD147在卵巢子宫内膜异位囊肿中的表达及意义范文，如需获取更多写作素材，在线客服老师一对一协助。欢迎您的阅读与分享！

[摘要] 目的 探讨mmp-7、cd147与子宫内膜异位症（EMT）发病的相关性。方法 本文应用免疫组化方法检测了33例正常子宫内膜（增生期13例，分泌期20例），45例在位子宫内膜（增生期25例，分泌期20例）、45例巧囊异位内膜中MMP-7、CD147的表达情况。检测结果用美国Media Cybernetics公司的image pro-plus 5.0专业图像分析软件进行定量分析，分析结果采用SPSS11.5软件进行秩和检验和等级秩相关Spearman分析。结果 （1）MMP-7、CD147在巧囊异位内膜中的表达高于其在在位内膜及正常内膜中的表达，差异有显著性；在在位内膜中的表达高于在正常子宫内膜中的表达，差异有显著性；在在位内膜分泌期中的表达高于增生期，差异有显著性；而在正常子宫内膜分泌期与增生期中的表达无显著性差异。（2）MMP-7与CD147在巧克力囊肿中的表达呈正相关趋势，差异有显著性。结论 MMP-7、CD147与EMT发病有关。

[关键词] 卵巢子宫内膜异位囊肿；基质金属蛋白酶-7；细胞外基质金属蛋白酶诱导因子

[中图分类号] R711.71 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2011）23-51-02

The Expressions of MMP-7、CD147 in Ovarian Endometriosis and Its Significances

DING Yonghui

Department of Gynecology, the Affiliated Hospital of Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, China

[Abstract] Objective To detect the expressions of MMP-7 and CD147 in ovarian endometriosis. Methods The expressions of MMP-7 and CD147 were observed by immunohistochemistry in the ectopic and eutopic endometrium of 45 cases with ovarian endometriosis, using normal endometrium of 33 cases as contrast group. The detected results of MMP-7 and CD147 in tissues using image pro-plus 5.0 software, and analyzed the detected Results by SPSS11.5, with choosing IOD as evaluating parameter. Results （1） The positive expressions of MMP-7, and CD147 increased gradually from normal endometrium to eutopic endometrium and to ectopic endometrium. There were significant statistical differences of IOD between eutopic endometrium and normal endometrium, between eutopic endometrium and ectopic endometrium, and between ectopic endometrium and normal endometrium, respectively. （2） The expressions of CD147 and MMP-7 in ovarian endometriosis were positively correlated significantly. Conclusion The expressions of MMP-7 and CD147 may play key roles in occurrence of endometriosis.

[Key words] Ovarian endometriosis; MMP-7; CD147

具有活性的子宫内膜组织出现在子宫内膜以外部位时称为子宫内膜异位症（endometriosis，EMT）。卵巢子宫内膜异位囊肿，俗称巧克力囊肿，是最常见的子宫内膜异位症[1]。近年研究发现，恶性肿瘤细胞发生远处转移及浸润，必须黏附异位组织、降解细胞外基质并且突破细胞基底膜。而基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）在肿瘤的发生、发展方面发挥了上述作用。MMP-7是MMP家族中结构最小的成员。岳军等[2]在食道癌的研究中发现MMP-7表达可代表肿瘤的浸润特征，其表达增高可促进肿瘤进展。CD147又称为细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（extracellular matrix metalloproteinase inducer，EMMPRIN），作为细胞外基质金属蛋白酶刺激物，在肿瘤浸润、转移过程中起重要作用[3]。因此，CD147可能在EMT的发病中具有重要作用。本文探讨MMP-7及CD147在巧囊中的表达及意义。

1 材料与方法

1.1 标本来源

实验组及对照组组织蜡块均取自宁夏医科大学附属医院病理科。2006年1月～2009年1月因巧克力囊肿切除子宫患者45例，取巧克力囊肿异位内膜及在位内膜标本蜡块，患者年龄24～48岁，平均38岁。对照组为同期在该院因不孕症（排除器质性疾患及子宫内膜异位症）行诊刮患者的正常子宫内膜33例，患者年龄25～46岁，平均34岁。实验组与对照组患者年龄无统计学差异。所有患者术前均未经内分泌药物及子宫内膜异位症药物治疗。

1.2 实验材料

鼠抗人单克隆抗体MMP-7、CD147免疫组化试剂盒及DAB试剂盒均购自福州迈新生物技术有限公司。

1.3 实验方法

组织标本蜡块脱蜡、水化；PBS冲洗3次，每次3min；应用0.3% H2O2封闭内源性过氧化物酶10min；PBS冲洗3次，每次3min；加鼠抗人MMP-7/CD147单克隆抗体，室温下孵育2h或4℃冰箱过夜；PBS冲洗3次，每次3min；加生物素标记的羊抗鼠IgG，室温下孵育20min；PBS冲洗3次，每次3min；加链霉素生物素蛋白30min；PBS冲洗3次，每次3min；加DAB显色液；苏木精复染核8min；梯度乙醇脱水；二甲苯透明、中性树胶封片。每次实验重复3次。

1.4 结果判定[4]

在高倍镜下观察，根据着色面积和着色强度进行综合评分：①着色面积：＜5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，＞75%为4分；②着色强度：无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。以上两项结果相加，＜2分为（-），2～3分为（+），4～5分为（++），6～7分为（+++）。阳性对照片由试剂公司提供，阴性对照采用PBS代替一抗。

本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文

1.5 统计学处理

采用SPSS10.0软件进行等级秩相关Spearman分析和秩和检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MMP-7在巧囊异位内膜、在位内膜及正常内膜中的表达

见图1及表1。

注：*VS**，Z＝2.905，P＞0.05；*VS***，Z＝6.109，P＜0.05；**VS***，Z＝5.643，P＜0.05

2.2 CD147在巧囊异位内膜、在位膜及正常内膜中的表达

见图2及表2。

注：*VS**，Z＝1.692，P＞0.05；*VS***，Z＝6.377，P＜0.05；**VS***，Z＝5.887，P＜0.05

2.3 CD147与MMP-7在巧克力囊肿异位内膜中表达的相关性

经绘制散点图，有直线相关趋势，故进行相关性分析。经Spearman相关分析表明，MMP-7与CD147在巧克力囊肿中的表达呈正相关，差异有统计学意义（r＝0.822，P＝0.000）。

3 讨论

EMT是生育期妇女常见病。据流行病学研究表明，EMT发病率逐年增加，已达生育年龄妇女的15%～28%，而手术及药物治疗效果均不满意，术后复发率高达20%～40%[5]，是一种严重影响妇女健康及生活质量的疾病，也是目前困扰患者和妇科医师的难题之一。

1927年Sampson等提出了经血逆流学说，认为EMT形成是子宫内膜随经血逆流至腹腔种植而导致EMT。但此学说无法解释80%～90%的妇女有经血逆流，但只有20%左右的妇女罹患EMT。说明经血逆流只是诱因，而内异症患者内膜与非内异症患者内膜相比，具有类似恶性肿瘤特性的细胞侵蚀转移能力，才是本病的发病关键。这就是“在位内膜决定论”的新观点[6]。依此观点，异位内膜扩散必须突破细胞外基质（ECM）屏障，从而使异位内膜组织细胞向周围组织浸润，促进异位内膜侵袭和转移，导致EMT的形成[7]。可见降解细胞外基质是子宫内膜异位症的形成过程中的关键步骤。

3.1 MMP-7与卵巢子宫内膜异位症发病关系

MMP-7是MMPs家族中结构最小的成员，是一种分泌型的基质金属蛋白酶，具有破坏细胞基底膜及促血管生成作用[8]。国内外多位学者研究发现MMP-7与肿瘤的浸润特性密切相关。其机制是MMP-7可通过直接破坏基底膜和肿瘤基质浸润周围组织而呈侵袭性生长；肿瘤细胞可能与肿瘤周围脉管细胞相互作用，使脉管细胞表达MMP-7而促进肿瘤细胞侵入动脉、静脉、淋巴管。可见MMP-7是肿瘤的浸润和远处转移的一个重要指标。

在本研究中，MMP-7阳性表达位置在胞浆。MMP-7在33例正常内膜中表达低于在45例在位内膜中的表达，而二者又低于其在45例异位子宫内膜中的表达，差异均有显著性。这一结果提示MMP-7与EMT的发病有关。MMP-7在EMT的发病中，可能起到了类似恶性肿瘤向周围组织浸润生长的作用，并通过侵入动脉、静脉、淋巴管而向远处转移，使得异位内膜得以在周围浸润生长并向远处转移。MMP-7在正常内膜与在位内膜的表达具有显著性差异，在分泌期在位内膜中的表达与增生期在位内膜中的表达具有显著性差异，进一步佐证了“在位内膜决定论”。

3.2 CD147与卵巢子宫内膜异位症发病关系

CD147已被发现在人肿瘤细胞、外周血细胞、血管内皮细胞的表面有较多表达。研究发现[3]，CD147在肿瘤的浸润、转移过程中，不仅通过促进肿瘤组织细胞与细胞、细胞与基质的黏附而发挥作用，还通过诱导肿瘤细胞释放MMPs，加速BM和ECM的降解，从而发挥MMPs上游分子的作用。

本实验结果表明，CD147在正常子宫内膜中的表达最低，低于其在巧克力囊肿在位内膜及异位内膜中的表达。在位内膜及正常内膜相比差异有显著性。以上结果表明EMT患者在位内膜与正常内膜是有差异的。这种差异可以解释80%的女性有经血逆流，但仅有约20%的女性患有EMT的现象，符合“在位内膜决定论”的观点。CD147在异位内膜中的表达程度高于其在巧克力囊肿在位内膜及正常内膜中的表达，且均有显著性差异，表明CD147与EMT的发病具有相关性。

3.3 MMP-7与CD147在巧克力囊肿中表达的相关性及意义

本研究通过对MMP-7及CD147在巧克力囊肿的表达进行相关性分析，发现二者呈高度正相关。这一结果证实CD147在EMT发病过程中，与其在恶性肿瘤中的作用相同，除其本身作用外，还促进异位内膜组织产生MMPs，进一步促进EMT的发生、发展。

综上所述，EMT的浸润和转移是一个复杂的多阶段过程，具有侵蚀活性的内膜细胞通过降解BM及ECM而发生浸润和转移，而BM和ECM的降解取决于MMPs的作用。而CD147作为黏附分子及MMPs的上游分子，在EMT发病中亦发挥了重要作用。目前诊断EMT主要靠临床症状及体征，尚无良好的实验室检查。倘若将MMPs作为一种辅助的检测手段，通过检测疑似EMT患者子宫内膜中MMPs的表达，结合临床，将提高EMT及AM的诊断准确率。

[参考文献]

[1] 乐杰. 妇产科学[M]. 第7版. 北京：人民卫生出版社，2008：12.

[2] 岳军，王松阳. 基质金属蛋白酶-7在食管癌组织中的表达及其意义[J]. 新乡医学院学报，2006，23（1）：27-29.

[3] Ishibashi Y，Matsumoto T，Niwa M，et al. CD147 and matrix metalloproteinase-2 protein expression as significant prognostic factors in esophageal squamous cell carcinoma[J]. Cancer，2004，101（9）：1994-2000.

[4] 丁永慧，张治宁. Bcl2、Bax在卵巢子宫内膜异位囊肿中的表达及意义[J]. 宁夏医学杂志，2009，31（12）：1143-1144.

[5] 钟刚. 复发性子宫内膜异位症[M]//曹泽毅. 中华妇产科学. 北京：人民卫生出版社，2004：1515-1518.

[6] 郎景和. 子宫内膜异位症的研究与设想[J]. 中华妇产科杂志，2003，38（8）：478-480.

[7] 潘凌亚. 子宫内膜异位症流行病学[M]//郎景和. 子宫内膜异位症的基础与临床研究. 北京：中国协和医科大学出版社，2003：35-49.

[8] Holnthoner W，Kerenyi M，Groger M， et al. Regulation of matrilysin expression in endothelium by fibroblast growth factor-2[J]. Biochem Biophys Res Commun，2006，342（3）：725-733.

（收稿日期：2011-05-23）

本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文